《2022届新教材新高考二轮复习七生物技术与工程作业.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022届新教材新高考二轮复习七生物技术与工程作业.pdf（56页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、专题七生物技术与工程-真题分类再回访课堂定时练规范-等级考真题真体验I.发酵工程1.2021浙江6 月 下列关于原生质体和细胞计数的叙述，错 误 的 是()A.测定植物原生质体的密度时，可用血细胞计数板B.红墨水不能进入活细胞，可用于检测细胞的存活状态并计数C.涂布分离法和划线分离法均能得到单菌落，都可用于细菌计数D.酵母菌在液体培养基中培养一段时间后，可用比浊计测定其密度2.2021.浙江1 月 用白萝卜制作泡菜的过程中，采用适当方法可缩短腌制时间。下列方 法 中 错 误 的 是()A.将白萝卜切成小块B.向容器中通入无菌空气C.添加己经腌制过的泡菜汁D.用沸水短时处理白萝卜块3.2020.
2、浙江7 月 下列关于微生物培养及利用的叙述，错 误 的 是()A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B.配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化4.2021 湖南卷 大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可 达 12 38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：(1)纤 维 素 酶 是 一 种 复 合 酶，一 般 认 为 它 至 少 包 括 三 种 组 分，即。为筛选纤维素分解菌，将大
3、熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以为唯一碳源的固体培养基上进行培养,该培养基从功能上分类属T 培养基。(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是 o 检测固体培养 基 灭 菌 效 果 的 常 用 方 法 是 简 要 写 出 测 定 大 熊 猫 新 鲜 粪 便 中 纤 维 素 分 解 菌 活 菌 数 的 实 验 思 路(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3 株纤维素分解菌，在 370c条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株，理由是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
4、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _5.2021 河北卷，节选 葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。目前这些皮渣菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重()纤维素降解率()A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：(2)为了解皮渣中微生物的数量，取 10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。IO4
5、倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和 9 5,则每克皮渣中微生物数量为 个。(3)皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH 调至_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀 后 倒 平 板，加 入 碳 酸 钙 的 目 的 是_。培养筛选得到的醋酸菌时，在缺 少 糖 源 的 液 体 培 养 基 中 可 加 入 乙 醇 作 为。(4)皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。(简要写
6、出实验步骤和预期结果)6J2021广东卷 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。(嗜 盐 单 胞 菌 卜搅拌器其他营养物质、空气盐U /（pH 调 节）乂 温 度 调 节)糖费或餐房垃圾等各种废弃一处一原料理,PHA分离纯化制备开放式发酵系统回答下列问题：(1)为 提 高 菌 株 H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为，并不断提高其浓度，经多次传代培养(指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株
7、。培养过程中定期取样并用 的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有 等。(答出两种方法即可)(2)基于菌株H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L,pH 为 1 0,菌株H 可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(答出两点即可)(3)研究人员在工厂
8、进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H 细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中 可能是高密度培养的限制因素。(4)菌株H 还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产P H A,说明其能分泌_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _n.基因工程和细胞工
9、程1.2021 浙江6 月 采 用 CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的Y 染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（）A.基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液B.基因编辑处理的受精卵经体外培养至2 细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达EGFP的小鼠C.分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠D.通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎22021 浙江1 月 下图为动物成纤
10、维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（）取 组 织 制 备 细 胞 悬 浮 液 原 代 培 养 f t代培养A.步骤的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤到的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤培养过程中不会发生细胞转化3.2020北京卷 人体感染新冠病毒后，机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，可制备出全人源单克隆抗体。以下表述错误的是（）A.该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测B.在该单抗制备过程中利用了基因工程技术C.该单抗可与新冠病毒相应蛋白特异性结合D.可用
11、抗原一抗体反应检测抗体基因表达产物4.2020北京卷 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。杨树内源DNA（D 左边电l，右边界 H启 动 于H ”材 八3基 因H终 止 于H-杨树内源DNA注：、表示引物为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的H M A 3基因，同时避免内源H M A 3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（）A.+B.+C.+D.+5.2020 天津卷 在克隆哺乳动物过程中，通常作为核移植受体细胞的是去核的（）A.卵原细胞 B.初级卵母细胞C.次 级 卵 母 细
12、 胞 D.卵细胞6.2021 河北卷 采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的C d富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中C d的含量。为提高植物对C d污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因导入受试植物，并检测了相关指标。回答下列问题：(1)为获取YCF1基因，将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体称为。(2)将DNA序列插入T i质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是 o(3)进行前期研究
13、时，将 含 有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是。研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到C d污染的土壤中，半年后测定植株干重(图1)及不同器官中C d含量(图2)。据 图1可知，与野生型比，转基因植株对C d具有更强的(填“耐性”或“富集能力”)；据图2可知
14、，对转基因植株的 进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。(5)已 知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是。相较于草本植物,采 用 杨 树 这 种 乔 木 作 为C d污 染 土 壤 修 复 植 物 的 优 势 在 于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(写出 两点即 可)。7.2021山 东卷 人类丫基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，丫基因的表达被抑制。通过改变该结合位
15、点的序列，解除对丫基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了Y基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。；例控序列及启动于 R 丫?因 R:引物-V-yL_ P：竦激素诱导下发挥-1 L 左=十 _ 4|中广 作用的宿动子；F1 F2 J .F7 Mun 1 ；.终止子 限制我识别序列及切割位点：的“I：皇ATTG嬴瑞龙 岁8日一二哭基因 1 皿 小 drcoA cNhel EcoR I Mm I rnR I X!m 终止 F W ltG C l AGC(1)为将扩增后的产物定向插入
16、载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1 F7末 端 添 加 的 序 列 所 对 应 的 限 制 酶 是,在R末端添加 的 序 列 所 对 应 的 限 制 酶 是。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要 种酶。(2)将构建的载体导入除去BCL1L4基因的受体细胞，成功转化后，含F1 F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与 R 扩增产物的受体细胞无荧光的原因是(3)向培养液中添加适量的雌激素，含F1 F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F 5-F 6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若 丫
17、 基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A蛋白结合位点位于_,理由是_8.2021 广东卷 非细胞合成技术是一种运用合成生物学方法，在细胞外构建多酶催化体系，获得目标产物的新技术，其核心是各种酶基因的挖掘、表达等。中国科学家设计了 4步酶促反应的非细胞合成路线(如图)，可直接用淀粉生产肌醇(重要的医药食品原料)，以期解决高温强酸水解方法造成的严重污染问题，并可以提高产率。糖到酸 萄糖变 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 号售热色_便 畔 矍 正腰一葡萄糖日也更受网4w碗酸盐回答下列问题：(1)研究人员采用PCR技术从土
18、壤微生物基因组中扩增得到目标酶基因。此外，获得酶基因的方法还有。(答出两种即可)(2)高质量的D N A模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一。在制备高质量D NA模板时必须除去蛋白，方法有。(答出两种即可)(3)研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细胞、pET20b为表达载体分别进行4种酶的表达。表达载体转化大肠杆菌时，首先应制备 细胞。为了检测目的基因是否成功表达出酶蛋白，需要采用的方法有(4)依图所示流程，在一定的温度、pH等条件下，将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一个反应体系。若这些酶最适反应条件不同，可能导致的结果是。在分子水平上，可以通过改变,从而改变蛋白质的结构，实现对酶特性的改
19、造和优化。9.2021湖南卷M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源D N A片 段F插 入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。回答下列问题：克隆动物A(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是,这类酶能将特定部位的两个核甘酸之间的,断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A 成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
20、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ O(3)与 胚 胎 细 胞 核 移 植 技 术 相 比，体 细 胞 核 移 植 技 术 的 成 功 率 更 低，原因是从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为(答出两点即可)，功能上具有。(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M 蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A 中 M 基因是否失活的实验思路_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
21、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _O10J2020 山东卷 水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因(敝基因)启动子序列的定点编辑，从而获得了 3 个突变品系。(1)将能表达出基因编辑系统的D N A 序列插入T i质粒构建重组载体时，所需的酶是，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为。(2)根 据 启 动 子 的 作 用 推 测，祗基 因 启 动 子 序 列 的 改 变
22、影 响 了，从而改变了法基因的转录水平。与野生型水稻相比，3 个突变品系中散 基 因 控 制 合 成 的 直 链 淀 粉 合 成 酶 的 氨 基 酸 序 列(填“发生”或“不发生”)改 变，原 因 是(3)为检测启动子变化对Wx-基因表达的影响，科研人员需要检测於 基因转录产生的mRNA(WrmRNA)的量 检测时分别提取各品系胚乳中的总R N A,经 过程获得总cD N A,通 过 P C R 技 术 可 在 总 cD N A 中专一性地扩增出W r基 因 的 cD N A,原因是(4)各品系祗mRNA量的检测结果如图所示，据 图 推 测 糯 性 最 强 的 品 系 为,原因是。1.51.O
23、O.O5(些玄生)11.2020天津卷 某植物有A、B 两品种。科研人员在设计品种A 组织培养实验时，参照品种B 的最佳激素配比(见下表)进行预实验。品种B 组织培养阶段细胞分裂素浓度(Hmol/L)生长素浓度(/mol/L)I 诱导形成愈伤组织miniII诱导形成幼芽m2H 2in诱导生根m31 1 3据表回答:(1)1 阶 段 时 通 常 选 择 茎 尖、幼 叶 等 作 为 外 植 体，原 因 是(2)在 I、I I、I I I 阶段中发生基因选择性表达的是 阶段。(3)为确定品种A 的 I 阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m 2.0),以O.5 n m o l/L 为梯度
24、，设计5 个浓度水平的实验,细胞分裂素最高浓度应设为 g m o l/L o(4)1 1 1 阶段时，科研人员分别选用浓度低于或高于n3 Mm o l/L 的生长素处理品种A幼芽都能达到最佳生根效果，原因是处理幼芽时，选 用 低 浓 度 生 长 素 时 的 处 理 方 法 为,选用 高 浓 度 生 长 素 时 的 处 理 方 法 为。(5)在_ _ _ _ _ _ _ _ 阶段用秋水仙素对材料进行处理，最易获得由单个细胞形成的多倍体。1 2.2 0 2 0 浙江7月，节选 回答下列(二)小题：(二)回答与基因工程和植物克隆有关的问题：(1)天然农杆菌的T i 质粒上存在着一段DN A片段(T
25、D N A),该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组T i 质粒时，应考虑T-DN A中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的 o(2)结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用 的转基因方法。(3)利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前 者 总 培 养 时 间，且不经历 过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。(4)与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根
26、培养基时，可根据实际情况适当添加,促 进 丛 状 苗 基 部 细 胞 分 裂 形 成 愈 伤 组 织 并 进 一 步 分 化 形 成,最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如(A.提 高 蔗 糖 浓 度 B.降低培养基浓 度 C.提高大量元素浓度D.不添加琼脂)。小高考共性借鉴类1.2 0 2 0 江苏卷 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：(1)常规微生物实验中，下 列 物 品 及 其 灭 菌 方 法 错 误 的 是(填 编 号)。编号物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称 取 1.0 g某土壤样
27、品，转 入 9 9 m L 无菌水中，制备成菌悬液，经 后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1 m L 菌悬液涂布在固体培养基上，其 中 1 0 倍稀释的菌悬液培养后平均长出了 4 6 个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌_ 个。(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以 为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_ 的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。(4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为 评 价 A、B 两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应
28、选择菌株 进行后续相关研究，理由是_培养时间2.2 0 1 8 江苏卷，3 1 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：称量土样梯度稀释 平 板 浇 划 线 扩 大注分离 纯化 培养(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的，及时对培养基进行分装，并进行 灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤中将温度约(在2 5、50 或 8 0 中选择)的培养
29、基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，可获得甲醇高耐受株(4)步骤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和 供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 0 0 0 倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用 2 5X1 6型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上_ _ _ _ _ _ _ _ 色细胞的个数应不少于才能达
30、到每毫升3 X 1()9个活细胞的预期密度。3.2 0 1 7江苏卷，3 1 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白陈、K 2 H p e)4、M g S O4苯酚和水，其中可作为碳源的有。(2)将采集到的样品接种培养，苯 酚 用 量 应 随 转 接 次 数 增 加 而 逐 渐，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加。(3)下图为连续划线法示意图，在 图 中(填
31、 图 中 序 号)区 域 更 易 获 得 单 菌 落。(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯 度 并 进 行 显 色 反 应，下 表 中 1 5号 比 色 管 的 苯 酚 浓 度 应 分 别 为苯酚浓度(mg/L)如 果 废 水 为 50mg/L苯酚溶液，降 解 后 约 有 21%的苯酚残留，则需将残留液稀释(填序号：51 0 20)倍后，再进行比色。4 浙江卷，17 某研究小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。紫葡萄葡萄浆装 瓶 发 醉 过 滤 沉 淀干酵母酵母悬液葡萄酒请回答：(1)制作葡萄浆前，对葡萄进行清洗和用_ _ _
32、_ _ _ _ _ _ _ 色的高镭酸钾溶液浸泡。制作酵母悬液时，在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现 即可。(2)装瓶后开始一段时间，发 酵 瓶 中 溶 解 氧 的 含 量 变 化 是。发酵过程中，发 酵 瓶 中 酒 精 的 含 量 变 化 是。(3)下列关于装置中有水弯管作用的叙述，错误的是。A.隔绝气体出入B.使发酵瓶内外的压强基本平衡C.减少杂菌污染D.有利于发酵瓶内形成缺氧环境(4)实验中，判 断 发 酵 完 毕 的 依 据 是。A.发酵瓶中pH 开始下降B.发酵瓶中停止出现气泡C.发酵瓶中酒精浓度达到30%D.发酵瓶中酵母菌数量急剧减少(5)欲利用葡萄酒制作果醋，发
33、 酵 瓶 中 应 加 入 的 菌 种 是,该菌种在_ _ _ _ _ _ _ _条件下能将乙醇氧化为醋酸。5.2020.江苏卷，33 如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图(以EcoR I 酶切为例)：染色体DNAI 急切 I|rf t cDT fiGK；AAATlTGCj混合的DNA片段H未知序列 已知序列 未知序列 L a.1-；I -=片段 In连 接|DNA连接隔已知序列、环状DNAUI扩增|ThgDNA聚合酶 PCR产物IV测序、分析|5-7片段F的完整序列请据图回答问题：步 骤 I 用的EcoR I 是一种 酶，它通过识别特定的
34、 切割特定位点。(2)步骤II用的DNA连接酶催化相邻核甘酸之间的3，一羟基与5，一磷酸间形成P C R 循 环 中，升 温 到 95 是为了获得；h q D N A 聚 合 酶 的 作 用 是 催 化(3)若如表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤III选用的PCR引物必须 是(从 引 物 中 选 择，填编号)。(4)对 PCR产物测序，经分析得到了片段F 的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处DNA序列(虚线处省略了部分核甘酸序列)已知序列5f-A ACTATGCGCTC ATG A-GC A ATGCGTAGCCTCMllllllllllllllll llllllllll
35、llllll3-TTGATACGCG AGTACT-CGTrACGCATCGG AGA-5PCR引物夕一 AACTATGCGCTCATGA-3(2)5,-GCAATGCGTAGCCTCT-3,5，一 AGAGGCTACGCATTGC-35-TC ATG AGCGC ATAGTT3省略了部分核昔酸序列)，结果正确的是A.51-A ACTATGCG-AGCCCTT-3B.5-AATTCCATGCTGAATT3C.5,-GC A ATGCGTTCGGG A A-31D.5-TTGATACGCCGAGTACT，6.2019天 津卷 B 基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞(2)和精子中正常表达，但在卵
36、细胞中不转录。为研究B 基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。水 稻 B 基因编码蛋白的序列基因y/1 、EZ3启 动 子*海 霉 素.抗性基因卡那霉素抗性基因一褥 止 子B-D 融合基因T-4T4A鳖定筛选*可在水稻卵细胞中后动转录的角动子据图回答:(1)B 基因在水稻卵细胞中不转录，推 测 其 可 能 的 原 因 是 卵 细 胞 中(单 选)。A.含 B基因的染色体缺失B.DNA聚合酶失活C.B基因发生基因突变D.B基因的启动子无法启动转录(2)从水稻体细胞或 中提取总R NA,构建 文库，进而获得B基因编码蛋白的序列。将该序列与基因(表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光)连接成融合基因(
37、表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能)，然后构建重组表达载体。(3)在过程、转化筛选时，过程 中T DNA整合到受体细胞染色体D N A上，过程_ _ _ _ _ _ _ _ _在培养基中应加入卡那霉素。(4)获得转基因植株过程中，以 下 鉴 定 筛 选 方 式 正 确 的 是(多 选)。A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交C.以 B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光(5)从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞
38、发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _7.20 1 9 江苏卷 图1 是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P 0 具有四环素抗性基因(*一)和氨苦青霉素抗性基因3 叩，)。请回答下列问题：图1GATATCCTATAG(l)E eR V 酶切位点为 t ，氏Y)R
39、V酶切出来的线性载体P l 为 末端。(2)用 h qDNA聚合酶进行P C R 扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺喋吟脱氧核甘酸。载体P 1 用酶处理，在两端各添加了一个碱基为 的脱氧核甘酸，形成P 2；P 2 和目的基因片段在 酶作用下，形成重组质粒P 3。(3)为筛选出含有重组质粒P 3 的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得 到 A、B、C 三类菌落，其生长情况如下表(“十”代表生长，“一”代表不生长)。根据表中结果判断，应 选 择 的 菌 落 是(填 表 中 字 母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是落类型平板类ABC无抗生素+氨茶青霉素+四环素+氨节青霉素+四环素+
40、一图 2(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选 择 的 一 对 引 物 是。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp 片 段，原 因 是8.2020江苏卷，28新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下
41、列问题：图 1图2(1)图1中人体内抗原递呈细胞吞噬病毒，并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被细胞表面的受体识别后激活该细胞。(2)B细胞识别入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，经过细胞的,形成细胞。(3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的;采集血液样本主要用于血清学检查，检测 o(4)据 图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射 免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞,再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用H AT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。9.2019江苏卷 利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基
42、因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：3号 4号 对 1 号 猪 使 用 处 理，使 其 超 数 排 卵，收 集 并 选 取 处 在时期的卵母细胞用于核移植。(2)采集2号猪的组织块，用 处理获得分散的成纤维细胞,放置于3 7 的 C 0 2 培养箱中培养，其中C 02的作用是。(3)为获得更多基因编辑猪，可 在 胚 胎 移 植 前 对 胚 胎 进 行。产出的基因编辑猪的性染色体来自于 号猪。(4)为 检 测 病 毒 外 壳 蛋 白 基 因 是 否 被 导 入 4 号猪并正常表达，可采用的方法有(填序号)。DNA测序
43、染色体倍性分析体细胞结构分析抗原一抗体杂交1 0.2 0 1 9 海南卷人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质(Y),该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。(1)若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取 作为模板，在_ 催化下合成c D N A,再利用 技术在体外扩增获得大量Y的基因。(2)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。若将上述所得Y 的基因插入农杆菌T i 质粒上的 中，得到含目的基因的重组T i 质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经培养、筛选等得到了能稳定表达 Y 的愈伤组织，则说明 Y 的基因已经(
44、3)天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y 进行改造以提高其热稳定性，具体思路是_全国卷真题再回访I .发酵工程1.2 0 2 1 全国乙卷工业上所说的发酹是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。盐食苕(困酸母1-:一发酵池发酵提取酱油油乳酵米曲霉发酵豆麦数喃大小麦对回答下列问题：(1)米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦秋可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的 可为米曲霉的生长提供氮源，
45、小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的、能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如 将 蛋 白 质 分 解 为 小 分 子 的 肽 和。米曲霉发酵过程需要提供营养物质，通入空气并搅拌，由 此 可 以 判 断 米 曲 霉 属 于(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。(3)在 发 酵 池 发 酵 阶 段 添 加 的 乳 酸 菌 属 于(填“真核生物”或“原核生物”)；添加 的 醉 母 菌 在 无 氧 条 件 下 分 解 葡 萄 糖 的 产 物 是。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖
46、是保证酱油质量的重要因素，据 图 分 析 该 阶 段 中 可 以 抑 制 杂 菌 生 长 的 物 质 是(答 出 1 点即可)。2.2020全国卷I,37 某种物质S(一种含有C、H、N 的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解 S 的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S 和 Y。接种稀释涂布平板 挑单菌落接种多次筛选淤 泥 工 区g&上工区工鬣髓无菌水 甲 乙 甲回答下列问题：(1)实验时.，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y 物质是。甲、乙
47、培养基均属于 培养基。(2)实验中初步估测摇瓶M 中细菌细胞数为2X IO7个/mL,若要在每个平板上涂布lOOgL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M 中的菌液稀释 倍。(3)在步骤的筛选过程中，发现当培养基中的S 超过某一浓度时，某菌株对S 的降解量反而下降，其原因可能是(答出点即可)。(4)若 要 测 定 淤 泥 中 能 降 解 S的 细 菌 细 胞 数，请 写 出 主 要 实 验 步 骤：(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即。3.2020全国卷m,3 7,节选 水果可以用来加工制作果汁、果酒
48、和果醋等。回答下列问题：(4)获得的果汁(如苹果汁)可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要 菌，这一过程中也需要02,的作用是。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于(填“好氧”或“厌氧”)细菌。4.2019全国卷I,37 已知一种有机物X(仅含有C、H 两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X 的细菌(目标菌)。I 号培养基：在牛肉膏蛋白腺培养基中加入X(5g/L)。II号培养基：氯化钠(5g/L),硝酸筱(3g/L),其他无机盐(适量)，X(15g/L)UI号培养基：氯化钠(5g/L),硝酸镂(3g/L),其他无机盐(适量)，X(45g/L)o回答下列问题。(1
49、)在 I 号培养基中，为微生物提供氮源的是。II、III号 培 养 基 中 为 微 生 物 提 供 碳 源 的 有 机 物 是。(2)若将土壤悬浮液接种在H号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X 的细菌比例会，其原因是.(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是。(4)假设从ni号培养基中得到了能高效降解x 的细菌，且该菌能将x 代谢为丙酮酸，则在 有 氧 条 件 下，丙 酮 酸 可 为 该 菌 的 生 长 提 供 和5.Q019全国卷H,37 物 质 W 是一种含氮有机物，会污染土壤。W 在培养基中达到一定量时培养基表
50、现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W 的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌，所 用 选 择 培 养 基 中 的 氮 源 应 该 是。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择 菌落进一步纯化，选择的依据是(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W 的酶(酶E)。为了比较醐E 与天然酶降解W 能力的差异，该小组