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1、课时分层训练(三十五)(建议用时：4 5分钟)A组 基 础 达 标1.(2 0 1 4全国卷I I)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这 样 做 的 目 的 是；然后，将1 mL水样稀释1 0 0倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为3 9、3 8和3 7。据此可得出每升水样中的活菌数为 o(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过_ _ _
2、_ _ _ _ _灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。(3)示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。【解析】(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 mL稀释液中平均有(3 9+3 8+3 7)/3=3 8个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目
3、为3 8/0.1=3 8 0,则稀释前每毫升水样中活菌数目为3 8 0 X X 1 0 4 X 1()4 XX 1()7。Q)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和 图B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养
4、的细菌生长速度快。【答案】X I。(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B (4)溶 解 氧 营 养 物 质2.如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。回答下列问题。(1)在_ _ _ _ _ _ _(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是 个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是(用 编 号 表 示)。(2)下表是某微生物培养基成分。编号成分含量编号成分含量粉状疏1 0 g(N H4)2S O40.4 gK.HPO44 gM g S O49.2 5 gF e S 040.5 gC a C l,0.5 gH2O1 0 0 m L若培养从
5、土壤中分离出来的自生固氮菌，该 培 养 基 应 添 加，去除若要鉴别纤维素分解菌，可用 法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入 O【解析】(1)从图中可知，号区域出现了单个菌落；1 个菌落最初是由1个细菌形成；根据线条数量可判断，划线的顺序依次是f f 。(2)自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌,可在培养液中加入酚红指示剂O【答案】（1）1 f f（2）碳 源 氮 源 刚 果 红 染 色 酚 红指示剂3.（2 0 1 3.全国卷I I）临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验
6、时,首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用 法或 法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，在 3 7 C培养箱中培养2 4 h,使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B；含 C的滤纸片周围
7、的透明圈比含A的小，说明；含 D的滤纸片周围的透明圈也比含A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的 0（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素 o【解析】（1）实验室中对微生物纯化培养时，常用的接种方法有划线法和稀释涂布法。（2）若让已经获得的单个菌落在固体培养基上大量且均匀繁殖，常用涂布器把稀释的菌液均匀涂满整个平板。（3）对某种抗生素越敏感的致病菌，在该抗生素存在的范围内，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中还有菌落生存，则说明这个菌落的细菌耐药性很强。（4）通过（3）可知，在应用时，要想杀死某致病菌，就得选择能使
8、该致病菌大量死亡，即产生的透明圈大的那种抗生素。【答案】（1）划 线 稀 释 涂 布（或涂布）（2）涂 布（3）敏 感 不 敏 感 该 致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐 药 菌（4）A4.2 0 1 6 年 7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有1 5 家美容美发场所的毛巾、理发（美容）用具大肠杆菌严重超标。如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。图乙基础培养基100mL20%乳糖溶液2 mL2%伊红水溶液2 mL0.5%美蓝水溶液1 mL回答下列相关问题：图甲中滤膜的孔径应_ _ _ _ _ _ _（填“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试
9、剂可以怎样除菌？0（2）配 制 图 乙 中 的 基 础 培 养 基 时，除 了 水 分、无 机 盐 以 外，还应加入（一种营养成分），以及 O待各成分都溶化后和分装前，要进行的是 和灭菌，对 培 养 基 进 行 灭 菌 的 常 用 器 具 是。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是 o伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于培养基。（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是 o要检测样液中的大肠杆菌含量，取2 5 c m 2毛巾样本，加5 mL蒸储水，浸润半小时，然后 在3
10、个平板上用涂布法分别接入0.1 mL样液；在3 7 c的培养箱中放置4 8小时，3个平板上的黑色菌落数分别为4 9、4 8和4 7。据此可得出2 5 c m 2毛巾样液中的活菌数为 o【解析】（1）图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，滤膜过滤才能获得大肠杆菌，对不耐高温的试剂除菌时无法用高压蒸汽灭菌法，可以用滤膜过滤达到除菌目的。（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入氟源以及琼脂。配制的培养基在溶化后和分装前需要先进行调p H和灭菌。高压蒸汽灭菌法常用高压蒸汽灭菌锅对培养基等进行灭菌。倒平板后将平板倒置的主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。从功能上划分，伊红
11、美蓝培养基属于鉴别培养基。（3）接种环灼烧灭菌后，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，据题意可知，2 5 c m2X X 1 03o【答案】(1)小于用滤膜过滤除菌(2)氮 源 琼 脂 调 整pH高压蒸汽灭菌锅防止培养血盖上的冷凝水落入培养基造成污染鉴别X 1 035.(2 0 1 7 河南毕业班测试)纤维素酶在生物燃料制作、布料处理中起重要作用。目前，利用微生物提高纤维素酶产量是主要发展方向。如图甲，用紫外线照射含有纤维素分解菌的土样，进行分离、培养，再检测各菌株的纤维素酶的产生量。请回答下列
12、相关问题:AQQA.0A提取纤维素藏提取纤维素面O-IAA测定纤差酶的产量提 取.纤维素而甲(1)紫外线照射的目的是,Ao组未经紫外线处理，其作用是作为。(2)经高压灭菌锅灭菌的培养基，需要冷却后才能用来倒平板。常用于估计培养基已冷却到5 0 左右的简便方法为。(3)上述培养皿中的培养基除含有水和无机盐、酵母膏、水解酪素、琼脂等外，还应有，目的是选择纤维素分解菌。(4)上述检测结果如图乙所示。由图可知，组酶活力与A o组相同,最可能的原因是 o【解析】(1)紫外线属于诱发基因突变的物理因素，通过紫外线照射后细菌突变频率大大提高，从而可能筛选出人类需栗的高产菌株；Ao组未经紫外线处理，为对照组。
13、(2)用手触摸盛有培养基的锥形瓶刚刚不烫手时的温度是50 左右。(3)以纤维素作为唯一碳源的培养基上只有产纤维素酶的细菌才能存活。(4)据图乙可知A5组纤维素酶的含量与对照组相同，由于基因突变具有低频性的特点，该组可能没有发生基因突变。【答案】(1)诱发基因突变，提高突变频率，获得高产的纤维素分解菌 对昭(2)用手触摸盛有培养基的锥形瓶刚刚不烫手(3)纤维素(4)A5没有发生基因突变6.(2017.河南郑州二测)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸储水定容到1 000 m L,再经高温灭菌，制成固体培养基备用。(1)根据培养基
14、的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？(填“能”或“不能”)原因是。KH2P。4Na2HPO4MgSO4-7H2O蛋白陈葡萄糖尿素琼脂1.4 g2.lg0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(2)通常培养基用 方法灭菌，培养皿用 方法灭菌，待培养基冷却到(填“20”“30”“40”或“50”)左右时,在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止,以免造成污染。(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用 法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大约推测出样品中活菌数。(4)培养分解尿
15、素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 o(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_ _ _ _ _ _ _ _ _ _处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。【解析】(1)因培养基中有尿素以外的氮源蛋白陈，故该培养基不能用于分离土壤中分解尿素的细菌。(2)培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌。平板冷却凝固后倒置可防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染。（3）稀释涂布平板法接种可用于菌体计数。因每个菌落均由单个菌体繁殖形成，故可以统计平板上的菌落数而推测出样品中的活菌数目。（4）将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生从而判断培养基
16、是否被污染。（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须进行灭菌处理，以防微生物污染环境。【答案】（1）不 能 培 养 基 含 蛋 白 陈，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物（培养基含蛋白月东，蛋白陈中含有氮元素）（2）高压蒸汽灭菌 干 热 灭 菌5 0酒 精 灯 火 焰 培 养 皿 皿 盖 上 的 水 珠 落 入 培 养 基（3）稀释涂布 平 板 菌 落 数 目（4）将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生（5）灭菌B组 能 力 提 升7.（2017.贵阳一检）某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进 行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计
17、数实验”，部分实验处理和结果如图所示。（注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验条件适宜；实验操作规范等）请回答相关问题。（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的和 条件；另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。（2）据图可知，研究小组采用的是 法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9 mL生理盐水的4支试管，并 编 号1 4号；第二步，用移液管从样品中吸取1 mL牛奶，注 入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推。4号试管的稀释倍数是 o（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可 在10%15%NaCl肉汤中生长
18、。本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为 培养基，以利于金黄色葡萄球菌生长，抑制或阻止其他微生物的生长。(4)在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为 o【答案】(1)营 养 环 境(2)稀 释 涂 布 平 板 灭 菌 1 0 4 x 1()58.(2 0 1 7.山东枣庄一模)运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。(1)某科普实验小组欲从石油污染的水域中筛选出能高效降解石油的微生物。请回答：从水体中分离纯化菌种时，若要获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此 过 程 所 用 的 接 种 工 具 是
19、,操作时采用 灭菌的方法。在筛选过程中，应将菌液接种于以石油为唯一碳源的固体培养基上，在微 生 物 培 养 前，需对培养基进行,该 培 养 基 从 功 能 上 看 属 于(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用 法来分离提取，还可以用和蒸储等提取植物芳香油的方法。【解析】(1)平板划线法用接种环接种，接种环采用灼烧灭菌的方法灭菌。培养基要进行高压蒸汽灭菌。以石油为唯一碳源的固体培养基属于选择培养基。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用有机溶剂萃取法来分离提取，
20、除了萃取，还有压榨和蒸健等方法。【答案】(1)接 种 环 灼 烧 灭 菌 选 择 培 养 基(2)萃 取 压 榨9.(2 0 1 5.全国卷I)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微 生 物 A菌体中的油脂通常可用 染色。微 生 物 A产生的油脂不易挥发，可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸储法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用_ _ _ _ _
21、 _ _ _ 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35,40、45 c温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中，条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 C设计后续实验。【解析】(1)油脂可被苏丹川染液染成橘黄色，被苏丹IV染液染成红色，因此油脂通常用苏丹川或苏丹IV染色。不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取，水蒸气蒸馈法一般用来提取易挥发的物质。(2)能产生脂肪酶的微生物B能利用脂肪(油脂)作为碳源，所以在制备选择微生物B的培养基时，应将油脂作为唯一的
22、碳源。(3)用显微镜直接对微生物进行计数，需栗用血细胞计数板。如果对活菌进行计数，则要用稀释涂布平板法涂布平板，培养后统计菌落数目，然后计算出活菌数量。(4)降解等量的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中45 C下酶的活力最小。从三种温度下的实验结果可知，40 下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后续实验。【答案】苏丹111(或苏丹I V)萃 取 法 油 脂 血 细 胞 计 数 板 稀 释涂 布 平 板45 40课时分层训练(三十六)(建议用时：4 5 分钟)A 组 基 础 达 标1.(2017 柳州模拟)在葡萄酒酿制过程中
23、，有许多需要注意的环节，请回答下列有关问题：(1)用 于 酿 制 葡 萄 酒 的 主 要 微 生 物 是，酒精发酵一般将温度控制在 O(2)工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，需更大程度地抑制其他微生物的生长，采取的措施是对原料和设施进行 和，并接入合适的菌种。(3)在 制 作 葡 萄 酒 的 实 验 中，向 发 酵 瓶 中 装 入 葡 萄 汁 时，要留有大约的空间。如果要继续制作葡萄醋，在发酵后期要向发酵液中通入，以保证发酵液处于 环境，并将发酵液置于的温度环境中，一段时间后，发酵液中会出现醋酸菌。【解析】(1)用于酿制葡萄酒的主要微生物是酵母菌，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是1825,因此
24、酒精发酵一般将温度控制在1825 o(2)工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，需更大程度地抑制其他微生物的生长，采取的措施是对原料和设施进行消毒和灭菌，并接入合适的菌种。(3)在制作葡萄酒的实验中，向发酵瓶中装入葡萄汁时，要留有大约1/3的空间。如果要继续制作葡萄醋，在发酵后期要向发酵液中通入无菌空气，以保证发酵液处于有氧环境，并将发酵液置于3035 的温度环境中，一段时间后，发酵液中会出现醋酸菌。【答案】酵 母 菌 1825 (2)消 毒 灭 菌(3)1/3(无菌)空气有氧3035 2.葡萄发酵可生产葡萄酒，请利用相关的知识回答问题。甲乙丙注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管(1)利用
25、葡萄制作葡萄酒的过程中，发 挥 作 用 的 微 生 物 是。该 微 生 物 通 过 无 氧 呼 吸 可 分 解，产生的终产物是 和(3)甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需要排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其 中 甲 同 学 的 错 误 是，导致发酵中出现的主要异常现象是-丙 同 学 的 错 误 是,导 致 发 酵 中 出 现 的 主 要 异 常 现 象 是。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙 同 学 实 际 得 到 的 发 酵 产 品 依 次 是、(4)在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤
26、操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是 o【解析】葡萄酒制作利用酵母菌无氧呼吸产生酒精和C02。甲同学的错误是未夹住发酵瓶的充气管，导致发酵液从充气管流出，并且空气会进入发酵瓶，抑制了酵母菌发酵，醋酸菌利用乙醇有氧发酵生成果醋。乙同学操作正确，得到果酒。丙同学的错误是瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口，使生成的C02不能排出，产品也是果酒。【答案】(1)酵母菌(2)葡 萄 糖 酒 精C 02(3)未夹住发酵瓶的充气管发酵液从充气管流出，发 酵 液 变 酸 瓶 中 发 酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口排气时发酵液从排气管流出葡萄醋(或果醋)葡萄酒(或果酒)葡萄酒(或果酒)(4)未及时
27、排气3.(2 0 1 7.茂名模拟)如图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：挑选葡萄|一 睡|一 臃 汨-I酒精发酵I 一两箍果酒果醋(1)从自然菌样中筛选较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用接种方法。(2)果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _o由 果 酒 转 变 成 果 醋 的 制 作 时，需 要 改 变 的 环 境 条 件 是和温度控制在。果 汁 发 酵 后 是 否 有 酒 精 产 生，可用来检测，在酸性条件下呈现_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 色证明有酒精产生。(3)若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋
28、酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。o【解析】(1)从自然菌样中筛选较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用平板划线接种方法。(2)果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制 在1825,由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是持续通入氧气并将温度控制在3035 0果汁发酵后是否有酒精产生，可用重格酸钾来检测，在酸性条件下呈现灰绿色证明有酒精产生。(3)如果果汁中已含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌不能将果汁中的糖发酵为醋酸，因为果酒发酵是在缺氧环境中进行的，而醋酸菌是嗜氧菌，果酒发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长。【答案】(1)平板划线(2)1825 通 入
29、氧 气3035 重 铝 酸 钾 灰 绿(3)不能。因为果酒发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足4.腐乳是我国古代劳动人民创造的一种经过微生物发酵的大豆食品。腐乳味道鲜美，易于消化吸收，所以一直受到人们的喜爱。请结合腐乳制作的原理及流程示意图，回答下列问题：腐乳 制 作 的 曲|蛋白质|国|脂肪|上山松苗|让豆腐上|加盐 _加 卤 汤 密 封|流程：|长出毛一尸|腌 菊 尸 装 危 尸*|初 一 二 三 四(1)图中a、b分别表示的是,它们的来源是，作用是 o(2)过程一中，为保证产品的质量，应采取的措施是 o（3）过程二具体的操作应该是 o这样既能使豆腐不过早酥烂，又能
30、避免豆腐块腐败变质。（4）过程三中卤汤配制所需要的材料有 o（5）过程四应如何操作才能取得最佳效果？0【解析】（1）腐乳制作过程主要利用的微生物是毛霉，在毛霉等多种微生物分泌的蛋白酶和脂肪酶的作用下，蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪被分解成甘油和脂肪酸。（2）在接种过程中为保证产品的质量，应在严格无菌的条件下，将优良毛霉菌种接种在豆腐上。（3）在加盐腌制的过程中要将豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，并逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，以防杂菌从瓶口进入。（4）卤汤主栗由盐水、酒和香辛料配制而成。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味，香辛料可以调制腐
31、乳的风味，也具有防腐和杀菌的作用。（5）密封时，为防止杂菌污染，应将瓶口通过酒精灯的火焰，再用胶条密封瓶口。【答案】（1）蛋白酶、脂 肪 酶 毛 霉 等 微 生 物 将 蛋 白 质 水 解 为 小 分 子 的肽和氨基酸，将脂肪水解为甘油和脂 肪 酸（2）在严格无菌的条件下，将优良毛霉 菌 种 接 种 在 豆 腐 上（3）将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，并逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些（4）盐水、12%左右的酒和香辛料（如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等）（5）密封时，将瓶口通过酒精灯的火焰，再用胶条密封瓶口5.（2 0 17.海南海口高三调研）超市里形
32、形色色的食品，它们大多数都与微生物发酵有关，请回答下列与微生物发酵、培养有关的问题：（1）果酒在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 的作用下，经过深层发酵可形成果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是 o（2）腐乳是用豆腐发酵制成的，有多种微生物参与其中，其中起主要作用的是 o从微生物培养的角度来看，腐乳制作过程中的豆腐应该属于（3）果酒发酵过程中是否有酒精产生，可用 来检测。【解析】（1）醋酸菌可以将果酒中的乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸。因醋酸菌是需氧型微生物，故需不间断地向发酵液中通入氧气，以保证醋酸菌的正常代谢。（2）腐乳制作过程中，毛霉是主要的发酵微生物。豆腐是用于微生物
33、生长的培养基。（3）酸性重格酸钾与酒精反应呈灰绿色，故可用酸性重辂酸钾检测果酒发酵过程中是否有酒精产生。【答案】（1）醋 酸 菌 只 有 在 氧 气 充 足 时，醋酸菌才能进行旺盛的生理活动（2）毛 霉 培 养 基（3）酸性重铭酸钾6.泡菜是人们日常生活中比较喜欢的一种食品，但是泡菜中却含有亚硝酸盐。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.30.5 g 时，会引起中毒；达 到 3 g 时，会引起死亡。我国卫生标准规定，亚硝酸盐的残留量在酱腌菜中不得超过20mg/kgo针对泡菜在发酵过程中会产生亚硝酸盐的事实，某中学生物活动小组设计实验，探究不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响。（1）请补充实
34、验设计的空缺内容。制作泡菜的原理：o测量指标及方法：亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成_ _ _ _ _ _ _色染料。先使泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与该化学物质发生显色反应，然后通过_ _ _ _ _ _ _，可以估测出泡菜样品中亚硝酸盐的含量。确定浓度梯度：经过查找资料和初步实验，发现当食盐浓度为3%以下时,制作的泡菜容易发生腐败，而当食盐浓度在8%以上时，制作的泡菜又容易成为咸腌菜。因此，分别设计了 3%、5%、7%的食盐浓度梯度来制作泡菜。选择实验材料：红萝卜和白萝卜，哪种更适合用作实验材料？o 理由是。制作泡菜：将实验材料分成3 组制作泡菜，除了实验材料的质量相同外
35、,还要保证每组泡菜的 相同。从第3 天开始，定期测定泡菜中的亚硝酸盐含量并记录。（2）下图是该生物活动小组记录的3 种食盐浓度下泡菜中的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图。654321亚硝酸盐含量(mg)0 3 5 7 9 11 13 时间(d)根据此图的实验结果，请你给出制作泡菜的最佳指导意见。你给出此建议的理由：食盐浓度为3%的泡菜中亚硝酸盐含量总体上在3坛泡菜中;食盐浓度为5%的泡菜在发酵初期亚硝酸盐含量迅速升高，且 亚 硝 酸 盐 含 量 变 化，但 发 酵 1 1 天后亚硝酸盐含量降到最低值;而食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量变化不大，虽一直处于较低数值，但容易成为。【解析】（1）选择
36、实验材料时首先要能够保证实验的顺利进行。本实验中需要对比颜色，红萝卜中的色素会干扰实验结果，不是理想的实验材料。（2）对比不同食盐浓度的泡菜中亚硝酸盐的含量，从图中曲线可看出食盐浓度为3%的泡菜中亚硝酸盐含量总体上是3坛泡菜中最高的；食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化最快，它的最高值是3坛中最高的，但 发 酵 1 1 天后亚硝酸盐含量降到最低值；而食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量变化不大，一直处于较低的水平，但容易成为成腌菜。【答案】（1）乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖并发酵产生乳酸玫瑰红 比 色 白 萝 卜 避 免 植 物 中 的 色 素 对 显 色 反 应 的 干 扰 制 作（或培养、
37、发酵）条 件（2）用 5%的食盐制作泡菜比较适合食用，但要在发酵时间达1 1 天以 后 食 用 才 比 较 适 宜 最 高 最 快 咸 腌 菜7.（2 0 1 7.河北正定中学期末）下图是果酒果醋的制作流程。请据图回答以下问题：挑选优质苹果接种菌种酒精发酵接种菌种醋酸发酵（1）在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 菌发酵产生乳酸；也可能是，导致_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 菌生长繁殖,产生醋酸。（2）某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每 隔 1 2 h 左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是,
38、二是避免氧气进入和杂菌污染。（3）在酸性条件下，可用 来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用 法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。（4）在果酒制作中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _关系；二是由于果酒中的 不利于杂菌的生长。【解析】（1）葡萄酒变酸是因为醋酸菌发酵产生醋酸，也可能是乳酸菌发酵产生乳酸。（2）将瓶盖拧松再拧紧的目的是释放掉发酵产生的C O2 o（3）可用酸性重铭酸钾鉴别酒精；估算菌体的数目采用稀释涂
39、布平板法。（4）酵母菌发酵产生的酒精对其他杂菌具有抑制作用。【答案】（1）乳 酸 发 酵 装 置 密 闭 不 严 醋 酸（2）放掉发酵产生的C O M 答案合理即给分，如排气、防止装置爆裂、降压等）（3）重铭酸钾稀释涂布平板（4）竞 争 酒 精B组 能 力 提 升8.（2 0 1 7.江南十校二联）乳酸菌是存在于人体内的益生菌，能助消化，利于肠道健康，因此常用于酸奶的制作。回答下列问题：（1）与腐乳制作所用的微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是 o（2）大 量 生 产 乳 酸 菌 一 般 用（填“固体”或“液体”）培养基，培养基中除添加必需的营养成分外，还需要注意控制 等培养条件。（3）酸奶
40、制作时杀菌很重要，牛奶一般用 法，所用仪器如接种环常用 法，接种室用 法。（4）含有抗生素的牛奶（填“适合”或“不适合”）作为酸奶的制作材料。（5）乳酸菌也常用于泡菜的制作，在腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量的变化是 o【解析】（1）与用于腐乳发酵的微生物毛霉相比，乳酸菌为原核生物。（2）因液体培养基可为微生物生长提供更大的生存空间，且菌体可与营养物质充分接触，故大量培养微生物一般用液体培养基。乳酸菌为厌氧微生物，培养环境为无氧。（3）巴氏消毒法不破坏牛奶的营养成分，故牛奶一般用巴氏消毒法消毒,接种环常用灼烧灭菌，接种室常用紫外线灭菌。（4）因抗生素可抑制乳酸菌的生长，故不能用含抗生素的牛奶制作酸
41、奶。（5）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量的变化规律为先增加再减少。【答案】(1)无 核 膜 包 被 的 细 胞 核(2)液 体 无 氧(3)巴 氏 消 毒 灼 烧 灭菌 紫 外 线 灭 菌(4)不 适 合(5)先增加后减少9.(2 0 1 7.大连市高三二模)某校同学在实验室开展生物技术实践活动。请回答下列有关问题：(1)A 组同学制作泡菜。在泡菜腌制的过程中，要注意控制腌制的时间、和食盐的用量；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是(2)B 组同学制作腐乳。在制作腐乳过程中，在腐乳表面往往会有一层致密的皮，这 层 皮 实 际 上 是 微 生 物 的,对 人 体 无 害；加 盐 的
42、作 用 是_，避免豆腐块变质。(3)C 组同学制作蓝莓果酒与果醋。某同学对自己的发酵装置定时通过充气口充气，该同学是在制蓝莓果 o另一位同学在蓝莓果汁中直接加入某品牌活性酵母，之后先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，通入无菌空气的目的是(4)在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由_ _ _ _大量繁殖而形成的，其 可 在 缺 少 糖 源 时 将 乙 醇 变 为,然后变为醋酸。【解析】(1)在泡菜腌制的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量，温度过高，食盐用量过低、腌制时间过短，易导致细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。泡菜制作使用的微生物是乳酸菌，为厌氧菌，腌制时向坛盖边沿
43、的水槽中注满水的目的在于保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。(2)腐乳制作过程中所用的微生物主要是毛霉，表面有一层致密的皮，是前期发酵形成的，属于毛霉的白色菌丝，即匍匐丝。加盐的目的有：调味、析出水分使其变硬，同时还可抑制微生物的生长。(3)某同学对自己的发酵装置定时通过充气口充气，说明微生物发酵时需氧气，而醋酸菌为好氧菌，说明此同学在制蓝莓果醋。在制作蓝莓果酒时，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气的目的在于让酵母菌可迅速繁殖，增加其数量，以保持后期持续的酒精发酵。(4)葡萄酒变酸形成葡萄醋，主要原因是醋酸菌污染，因此在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的。
44、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇直接变为乙醛，最终转变为醋酸。【答案】（1）温 度 保 证 坛 内 乳 酸 菌 发 酵 所 需 的 无 氧 环 境（2）匍 匐 丝 析出豆腐中的水分使其变硬、抑制微生物生长（需答两个要点才可以）（3）醋 在 有氧条件下，使酵母菌迅速繁殖，数 量 增 加（4）醋酸菌乙醛10.（2017.湖南省高考生物冲刺压轴卷）常见的果酒、果醋、泡菜和腐乳的制作都离不开微生物的作用，请结合微生物的特点及产品的制作过程，回答下列问题：（1）苹果醋的制作过程中，利用了代谢类型为 的醋酸菌的发酵作用，该过程需要控制的温度条件是 o（2）在腐乳的制作过程中，起 主 要 作 用 的 微 生 物
45、是。加盐的作用是 O（3）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是 o 在条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸反应后，与 N-1-蔡基乙二胺盐酸盐结合形成_ _ _ _ _ _ _ _ _ _色，与标准液进行目测比较，可以估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。【解析】（1）苹果醋的制作过程中，利用了醋酸菌的发酵作用，其代谢类型为异养需氧型。醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是3035,因此醋酸发酵时应该持续通入氧气并将温度控制在30 35（2）在腐乳的制作过程中，起主要作用的微生物是毛霉。加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐变硬和抑制微生物生长，避免豆腐块变质。（3）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是创造无
46、氧环境。在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸反应后，与 N-1-蔡基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色，与标准液进行目测比较，可以估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。【答案】（1）异 养 需 氧 型 3035（2）毛 霉 析 出 豆 腐 中 的 水 分，使豆腐变硬和抑制微生物生长，避免豆腐块变质（3）创 造 无 氧 环 境 盐 酸 酸 化 玫 瑰 红课时分层训练（三十七）（建议用时：4 5 分钟）A组 基 础 达 标1.（2 0 1 7 湖北七市4 月联考）某植物园中种植的有菊花、玫瑰等花卉，还有葡萄、橘子等水果，其中玫瑰、橘子都可以作为植物芳香油提取的原料。请回答下列问题：（1）植 物 芳 香 油 的
47、提 取 方 法 有、压榨和 等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。（2）玫瑰精油适合用 提取，其理由是玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定的特点。蒸储时收集的蒸镭液不是纯的玫瑰精油，而是0经冷凝管冷却后，混合物又会重新分出_ _ _ _ _ _ _ _ _ _层和水层。如果蒸储过程中不进行冷却，则精油提取量会减少，原因是 o（3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油，其中将橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，其目的是 o【解析】（1）植物芳香油的提取方法有蒸偏、压榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。（2）玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学
48、性质稳定的特点，适合用水蒸气蒸愉法提取。蒸储时收集的蒸愉液不是纯的玫瑰精油，而是油水混合物。经冷凝管冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。如果蒸健过程中不进行冷却，由于部分玫瑰精油会随水蒸气挥发而流失，则精油提取量会减少。（3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用压榨法提取橘皮精油，其中将橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，其目的是防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。【答案】（1）蒸 储 萃 取（2）水 蒸 气 蒸 储 法 油 水 混 合 物 油 部 分 玫 瑰精油会随水蒸气挥发而流失（3）压 榨 防 止 橘 皮 压 榨 时 滑 脱，提高出油率2.（2 0 1 7.河北唐山二模）生物组织中存在
49、多种有机物，不同的有机物其提取与鉴定方法不尽相同。根据所学知识，回答下列问题。（1）采用蒸储法提取玫瑰精油时，向 初 步 提 取 的 乳 化 液 中 加 入，作用是。（2）采用压榨法提取橘皮精油时，提取之前需用 浸泡，以提高出油率。为了使橘皮油易于与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的和5%的,并调节pH至7 8。（3）采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、。干燥时，要注意控制，否则会引起胡萝卜素的分解；萃 取 的 效 率 主 要 取 决 于 萃 取 剂 的,同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定时应与 作对照
50、。【解析】5%的NaHCCh和5%的Na2so4,并调节pH至7 8。（3）采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩。干燥时，要注意控制温度和时间，否则会引起胡萝卜素的分解；萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定时应与标准样品作对照。【答案】（1）氯 化 钠 增 加 盐 的 浓 度，有利于油水分层（2）石灰水 NaHCCh Na2so4（3）过 滤 浓 缩 温 度 和 时 间 性 质 和 使 用 量 标 准 样 品3.（2017.广西南宁一模）薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄