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1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 41 河南省地方标准 DB41/T 2295.22022 泡桐标准综合体 第 2 部分：泡桐良种培育 2022-09-16 发布 2022-12-14 实施 河南省市场监督管理局 发 布 DB41/T 2295.22022 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 选择育种.1 5 杂交育种.2 6 四倍体育种.3 7 品种审定.3 8 档案的建立和管理.4 DB41/T 2295.22022 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请
2、注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件是DB41/T 2295泡桐标准综合体的第2部分。DB41/T 2295分为以下5个部分：第1部分：泡桐种质资源收集与保存；第2部分：泡桐良种培育；第3部分：泡桐种苗繁育；第4部分：泡桐栽培管理；第5部分：泡桐丛枝病防治。本文件由河南省林业局提出并归口。本文件起草单位：河南农业大学、河南省林业科学研究院、华北水利水电大学。本文件主要起草人：范国强、赵振利、翟晓巧、常德龙、邓敏捷、曹喜兵、陈卓。DB41/T 2295.22022 1 泡桐标准综合体 第 2 部分：泡桐良种培育 1 范围 本文件规定了泡桐良种培育的选择育
3、种、杂交育种、四倍体育种、品种审定、档案的建立和管理等技术要求。本文件适用于泡桐的良种培育。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18894 电子文件归档与电子档案管理规范 DB41/T 384 林木品种审定规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 泡桐良种 经人工选育，通过试验和鉴定，并经省级以上林木品种审定委员会审定并通过的泡桐品种。3.2 无性系 通过同一母株采用无性繁殖方法繁殖的植株总和。3.3
4、杂交育种 通过父母本杂交并对杂交后代进行筛选，获得具有父母本优良性状的新品种的育种方法。3.4 四倍体 单个细胞中具有四组染色体的生物。4 选择育种 优树选择 4.1 选择树干高大通直，速生性、抗病性和稳定性均强的泡桐作为优树。优树选择相关指标按以下方法测定：DB41/T 2295.22022 2 速生性：在相同立地与管理条件下，单株木材产量超出周边同龄树 15%以上的称为速生性强。抗病性：泡桐丛枝病是泡桐最严重的一种病害，统计植株连续 3 年的发病情况，计算发病率，平均发病率低于 20%的单株称为抗病性强。稳定性：连续测定泡桐 3 年的生长量，按照平均材积量年度变异系数判别。年度变异系数0.
5、3为高。优树确定 4.2 对候选单株的速生性、抗病性、稳定性等性状进行连续3年观测，采用4.1指标测定与判别标准或与当地现有栽培品种相比有一项以上的性状具有显著优势的确定为优良单株。优良无性系获得 4.3 对选出的优树通过埋根繁育方式进行获得优良无性系。区域试验 4.4 对获得的的优良无性系，通过在3个以上具有显著生态差异地理区域进行试验，试验园四周设置保护行，参试品种46株为一试验小区，选择12个当地主栽良种为对照，随机区组设计，重复35次，要求同一区组内立地条件、树龄一致，管理措施相同。5 杂交育种 亲本选择 5.1 根据育种目标，选择目标性状优良、优势性状互补的单株作为杂交亲本。花粉采集
6、与贮藏 5.2 3月中旬至4月底，泡桐花开始开花前进行采集花粉，选择父本树花即将开放，花冠还没有张开，采集花冠，室内剥开花冠，用镊子取出花药，放在干净白纸上，在室内阴干2 d3 d，避免阳光直射，等观察花药干燥时，然后把花药压碎，装到花粉瓶内，当季使用时在在0 4 条件下贮藏，隔年使用时在-20 条件下贮藏。杂交授粉 5.3 在3月中旬至4月底，选择即将开放的花冠，用镊子拨开花冠，去掉雄蕊。用毛笔蘸花粉在柱头处轻轻涂抹，让花粉粘附在雌蕊上，然后用曲别针将花冠顶端夹紧。并在花枝基部挂标牌标注杂交父母本及时间。更换父本时，毛笔也应更换。杂交果采收与处理 5.4 杂交果成熟后，蒴果没有开裂前，按杂交
7、组合分别采集、取籽，干燥保存。杂交后代优树选择 5.5 杂交种子在温室内进行营养袋育苗，苗木达到1.2 m以上，移栽大田，株行距4 m 4 m。2年后根据杂交育种目标，参照4.1相关指标选出聚合亲本优良性状的优株。DB41/T 2295.22022 3 优良无性系获得 5.6 优良无性系获得按照4.3执行。6 四倍体育种 育种材料的培养 6.1 将采集的泡桐种子用70%的乙醇消毒30 s后，再用0.1%的HgCl2消毒5 min，然后，用无菌水冲洗35次，用灭菌吸水纸吸干种子表面液体后放置到MS培养基上，培养基中附加蔗糖20 g L-1和琼脂粉3.0 g L-1，置于温度为（25 2），光照强
8、度为1500 Lx左右的人工气候箱内培养。预培养 6.2 取培养80 d的育种材料自形态学上端往下第24对叶的叶片，剪去叶缘，剪成约1.0 cm1.0 cm的小块，放置于MS0.1 mgL-10.5mgL-1 NAA9 mgL-115 mgL-1 BA培养基（附加蔗糖25 gL-1，琼脂粉3.0 gL-1）中，于20 人工气候箱内，在黑暗条件下进行预培养12 d。诱导处理 6.3 将经过预培养的育种材料放置于含有10 mg L-1秋水仙素的6.2中所用的培养基中，置于人工气候箱内，在20 的黑暗条件下进行诱导处理24 h。芽诱导 6.4 将诱导处理后的育种材料用无菌水冲洗35次，无菌滤纸吸干表
9、面液体后，将其放置到MS 0.1 mg L-10.3 mg L-1 NAA4 mg L-110 mg L-1 BA培养基（附加蔗糖25 g L-1，琼脂粉3.0 g L-1）中诱导产生愈伤组织，将诱导产生的愈伤组织放置到MS0.5 mg L-11.1 mg L-1 NAA10 mg L-116 mg L-1 BA培养基（附加蔗糖25 g L-1，琼脂粉3.0 g L-1）中诱导产生幼芽。植株再生 6.5 当诱导出的幼芽长到约2 cm时，从茎基部剪下，放置到盛有25 mL的1/2 MS+0 mg L-10.03 mg L-1 NAA培养基（附加蔗糖25 g L-1，琼脂粉3.0 g L-1）的三
10、角瓶中诱导其生根，获得完整的再生植株。四倍体鉴定 6.6 获得的再生植株幼苗根长至1.5 cm2.0 cm时，采用染色体条数计数和流式细胞仪测定单细胞相对DNA含量的两种方法进行变异植株的倍性鉴定，经鉴定确认为四倍体泡桐。炼苗与培养 6.7 当四倍体泡桐苗幼根长到3 cm左右时，去掉三角瓶塞，在室内强光下（3000 Lx）锻炼7 d。然后移至室外锻炼7 d后，移入盛有蛭石（经5%高锰酸钾消毒处理）的口径为10 cm12 cm的育苗塑料钵中锻炼30 d，在苗木达到1.2 m以上时移植于大田内培养。7 品种审定 DB41/T 2295.22022 4 品种审定按DB41/T 384执行。8 档案的建立和管理 泡桐良种培育档案的建立和管理按GB/T 18894执行。