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1、大家好!本节课我要跟大家一起学习的内容是临床生物化学检验常用微量元 素的检测。微量元素检测是指通过仪器检查微量元素的多少。现代科学研究证明,微量 元素在人体中起着极其重要的作用,它的缺乏和过剩与人的健康息息相关。目前 国际上对于微量元素检测暂无统一、准确的标准。不同的医院可能有不同的数据, 因为不同的检测仪、不同的试剂,其参考值都不同,所以可能造成结果也不同。 另外,微量元素检测出来的结果只是一个参考值,同时影响微量元素测定结果的 因素也很多。影响准确测定微量元素的关键因素之一是污染,人体内微量元素的 含量较低,在样品的采集过程中易受到各种污染,因此严格的防污染措施必须从 标本采集开始,贯彻包
2、括预处理直到分析过程的始终。微量元素检测的标本类型主要有:血液、尿液样品、毛发和指甲、唾液样品 等。血液标本,通常为清晨空腹静脉血或末梢血,在采集过程中需格外小心,避 免污染。除对样品采集做出的要求外,还要采用经过定期抽查后合格的微量元素 专用检测管,以杜绝容器本身对检测结果的影响。采样后最好立即检测,如果需 要存储,应在4c冷藏,在-20至-80可保存更长时间。尿液样品可以反映微 量元素的代谢和排泄情况,是除了血液标本之外临床常用的标本类型。根据需要 可采集24h尿和部分尿,如晨尿、白FI尿等。尿液标本要放置在吸附性能差、能 密闭的塑料容器中,阴凉处存放或加入苯甲酸防腐剂。微量元素与头发有特
3、殊的亲和力,头发中的微量元素是组织内蓄积于头发中 或者析出的微量元素的指示器。采集发样,一般都规定用不锈钢剪刀剪取距头皮 2-3毫米以上的1厘米长的头发作样品。唾液的采集,唾液中的微量元素是摄入机体中的微量元素在吸收后经代谢被 排泄的体内微量元素。成人唾液的一天分泌量是1L5L唾液采集前,受检者 需将口洗刷干净,然后按检测元素及方法的要求,收集所需量的唾液在试管中。 唾液采样应在受检者身体条件恒定时,清晨空腹进行。指甲也是微量元素检测常用样品之一,它是组织中蓄积或析出体内的一部 分微量元素,通常每周采集1次,采集1个月收集的混合样品,将污垢洗净,干 燥保存。另外,脏器样品(如肝、肾、心等)、牙
4、齿等也可以作为微量元素检测 的样品。样品采集之后还要对样品进行预处理,这是微量元素分析过程中质量控制的 重要环节之一。其目的是为了将试样转化成适于分离和测定的物理状态和化学状 态,使样品便于分析,除去对分析有干扰的物质。一般临床样品微量元素的检测 中常用的预处理方法有:稀释法、高温灰化法、低温灰化法、高压消化法、常压 消化法、燃烧法、水解法及微波消解法等。随着对微量元素检测的精密度、准确度、灵敏度要求的不断提高,检测方法 愈来愈多,日趋完善。目前,国内常用的微量元素检测方法有中子活化分析法、 原子吸收光谱法、紫外可见吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法、离子选 择性电极法、伏安法、荧光分析法
5、等。中子活化分析法是放射化学分析法之一,它是利用热中子辐射,使待测元素 原子发生核反应,产生放射性同位素,检测其放射性强度而进行定量分析的方法, 是进行元素含量分析的一种最灵敏的方法。该方法标本用量小、干扰小,可以同 一样品中的多种元素进行测定,但因中子源放射性强、成本高,不易推广使用。原子吸收光谱法又称原子吸收分光光度法,根据样品中待测元素原子化的方 法不同,分为火焰原子吸收光谱法、化学原子吸收光谱法和石墨炉原子吸收光谱 法。它是基于待测元素,从光源发射的特征辐射,被蒸气中待测元素的基态原子 吸收,然后根据待测元素浓度与吸收辐射的原子数成正比的关系,求得样品中被 测元素的含量。原子吸收光谱法
6、简便、灵敏、准确,是临床微量元素检测中最常 用的方法。紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法。它是基于待测元素与某些试 剂在一定条件下形成化合物,该化合物对紫外、可见光具有选择性地吸收而进行 定量分析的一种吸收光谱法。该法操作简便,也是临床微量元素检测中常用的方 法。电感耦合等离子体发射光谱法是利用电感耦合等离子作为激发能源.使处于 基态的待测元素原子从外界能源获得能量,跃到激发态,激发态原子将多余能量 以光的形式释放出来返回基态,从而产生特征光谱而进行定量分析的一种方法。 该法灵敏、准确、快速、干扰小,而且可多种元素同时测定,是临床微量元素检 测的常用方法,仪器价格昂贵。此外,离子选择电极
7、法、伏安法、荧光分析法等, 都是临床微量元素检测中常用的方法。下面我们介绍一下常用微量元素的检测。铁元素检测时最常用的两个指标是血清铁和总铁结合力测定。目前,血清铁 的测定尚缺少权威性方法。原子吸收法由于仪器复杂,费用昂贵,且没有分光光 度法可靠性好,恨少用来做血清铁的常规分析。比色法仍然是测定血清铁的主要 方法。血清铁和总铁结合力常用的方法是亚铁嗪比色法。其原理是血清中的铁与运 铁蛋白结合成复合物,在酸性介质中铁从复合物中解离出来,被还原剂还原成二 价铁,再与亚铁嗪直接作用生成紫红色复合物,与同样处理的铁标准液比较,即 可求得血清铁含量。总铁结合力是指血清中运铁蛋白能与铁结合的总量。将过量
8、铁标准液加到血清中,使之与未带铁的运铁蛋白结合,多余的铁被轻质碳酸镁粉 吸附除去,然后测定血清中的总铁含量,即为总铁结合力。血清锌测定方法有原子吸收分光光度法、中子活化法和毗咤偶氮酚比色法。 临床常用的是哦咤偶氮酚比色法测定血清锌。其原理是血清中的高价铁及铜离子 被维生素C还原成低价,两者均能同氟化物生成复合物而掩蔽。锌也和氟化物结 合,但水合氯醛能选择性地释放锌,使锌与化合物反应生成红色复合物,与同样 处理的标准品比较,得到血清锌的含量。另外,临床上常检测的微量元素还有血清铜和血清铅。血清铜的测定方法 主要有原子吸收分光光度法和比色法。血铅测定的方法主要有:石墨炉原子吸收 法、等离子发射光谱法、阳极溶出伏安法、火焰原子吸收光谱法等。最后小结一下本次课程的内容,本次课程主要介绍常用微量元素的检测对于标 本类型、采集、预处理的要求,以及介绍了常用微量元素检测的方法。本节课 就讲解到这儿,谢谢大家!