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1、猪活体颈部采血技 术猪颈部采血技术简介v 猪疫病监测与免疫抗体监测是掌握猪病发生、流行、净化的重要工作，猪血的采样是进行疫病监测与免疫抗体监测的前提，血清质量的好坏直接关系着实验结果的准确性，因此，如何获得符合卫生要求、高质量的血清，是摆在我们基层兽医工作者面前的实际问题，现根据自己从事猪血采样工作经验，将猪血采样技术及要点总结如下。采血化验和送检是畜牧兽医工作者的一项重要工作。目前，在对猪的采血过程中国内很多都是使用从猪耳静脉抽血的方法采血。这种方法实际上存在很多缺点：1、采血前的准备v 器械准备：采样箱，一次性使用5 10ml 注射器和注射针头，75%的酒精棉球，干棉球，10ml 离心管，
2、止血钳，猪保定器或保定绳，记号笔，登记表，乳胶手套、防护服、防护帽、一次性手套、一次性鞋套等物品。采血前物资准备（一）止血钳刀片采血长针头（1518cm）简易的铁线，用于清洗长针头里凝固的血液耳静脉采血技术v 耳静脉采血（图一）。适用于40Kg 以上的中大猪或种猪。采用站立保定，由1 名助手用猪保定器套住猪的上颌骨、收紧，用力向前方牵引，另一助手在猪耳根处用力压住耳静脉近心端，采血员左手拉伸猪耳，右手用酒精棉球反复涂擦耳静脉使血管怒张后，右手持连接9 号针头的注射器，沿血管走向刺入，针头与猪耳水平面呈10 15 度角进针，回血后，缓慢抽取所需血液量后，用干棉球或棉签按压止血。猪耳静脉采血的缺点
3、v 1 猪耳静脉采血，应缓慢回抽注射器活塞，若回抽活塞过快过猛，会使血管壁紧贴针尖，而抽不出血液。v 2 猪耳静脉采血速度慢，容易被污染，采血量少，血清少，中小猪尽量不用此方法采血。3 费时：从耳静脉抽血，每采一头猪需要 10 分钟以上，一个大型的猪场，如果送检 40 头份猪血，采血起码要 8 个小时。v 4 易失败：由于猪的耳静脉细（特别是小猪），采血过程中猪只又经常晃动，使本来已经扎准的针头经常抽不出血来。v 5 血样不卫生。很多时候，特别是猪小的情况下，用一次性针筒抽血，很难抽得出来。为此，很多兽医都是用针头刺穿耳静脉后，直接用西林瓶在耳沿接血，这样接到的血样是不符合卫生要求的。更可怕的
4、是，由于耳静脉采血费时费力，很多基层兽医技术人员为了贪图方便，应付工作任务，往往只采一头或几头猪的血液，然后稀释成几份送检，造成检验结果不准而误诊，贻误了猪病治疗时机，不但给我们的工作造成了不良的影响，也可能给养殖户带来严重的经济损失。前腔静脉采血技术v 前腔静脉采血是一些兽医常用的采血方法，但是，真正能熟练运用这种方法的人员不多。由于有关资料缺少对这项技术的详细介绍，很多基层畜牧工作者往往以为这是一项复杂的技术，需要高超的操作技能。其实，只要掌握操作要领，经过一段短时间的摸索，每个兽医都可掌握这项技术。应用前腔静脉采血方法，可比从耳静脉抽血节约2/3 半以上的时间，而且采出的血样卫生干净。每
5、次采血 20 头母猪和 40 头肉猪，不足 2 个小时就可以完成任务。猪颈部采血操作技术v 猪颈部静脉采血，因有一定的技术难度，采血员必须具备准确而熟练的操作技术。猪前腔静脉采血技术要点：一是根据猪的大小选用不同型号的针头；二是做好保定，注意人畜安全。根据猪体大小，采用不同保定方式。猪保定后应相对稳定，不能骚动、后缩及左右摇摆；三是进针部位准。由于左侧靠近膈神经，故多在右侧进行采血。1.选取合适的针筒和针头 通常都是用一次性5 毫升注射用针筒。由于猪的大小不同，前腔静脉的深浅不一样，要求使用的针头也是不一样的。若针头太短，刺不到前腔静脉；针头太长，可能刺穿整条前腔静脉，也是采不到血的。根据我场
6、长期操作的经验，种公母猪选用 16#100 毫米针头；30 千克以上的中猪，应选择 12#72 毫米针头；10 30 千克小猪，应选择 9#50毫米针头；10 千克以下乳猪，应选择9#30 毫米针头。2.猪只的保定v 2.1 种公母猪需要用保定绳固定，并且要求尽可能吊得高一点，使猪的头颈与水平面呈 30 度以上（如图 1）。这样，既方便采血人员察看采血部位，又使前腔静脉向外突出，静脉血充胀。30 千克以上的中大猪，由 1 2 名饲养员用捉猪器(或保定绳)拉住，头昂起，偏向右侧(如图 2)；v 2.2 20-30Kg 的小猪。一般用仰卧保定法，由一名助手抓握两后肢，尽量向后牵引，另一助手用手将下
7、颌骨下压，使头部贴地，并使两前肢与体中线基本垂直。此时，两侧第一对肋骨与胸骨结合处的前侧方呈两个明显的凹窝。采血员用酒精棉球消毒皮肤后，手持连接7 9 号针头的一次性注射器（10 40Kg 小猪，选择 925 毫米针头；10Kg 以下乳猪，选择720 毫米针头），向右侧凹窝处，由上而下，稍偏向中央及胸腔方向刺入，见有回血，即可采血，采血完毕，左手拿酒精棉球紧压针孔处，右手迅速拔出采血针管，稍压片刻止血后，解除保定。40Kg 以上的中大猪，采用站立式保定，由一名助手用猪保定器套住猪的上颌骨、收紧，用力向前上方牵引，使猪的上颌骨稍稍吊起，两前肢刚刚着地，让猪的胸前凹窝充分暴露，采血员用酒精棉球消毒
8、皮肤后，手持连接1238 毫米针头的一次性注射器，朝右侧胸前凹窝最低处，由下而上，且垂直凹窝方向进针，见回血后，标志已刺入血管，轻轻抽动注射器活塞，采取血液。采血完毕，拔出针头，术部用酒精棉球压迫片刻止血后，解除保定。v 20 千克以下的小猪，可由 1 2 名饲养员抓起、倒立，后背紧靠在栏架上（如图 3）。3.找准下针部位 猪的前腔静脉越往头部越浅，但也越细；越靠胸部越粗，但也越深，所以，采血应选择适当的部位。若小猪采血的部位太靠头部，血管太细，很难扎中，即使扎中了也很难抽出血，所以，小猪的采血部位应稍靠后。中大猪和种母猪血管比较粗，靠胸部较深，针头够不到血管，所以，应略靠前。v 根据我个人的
9、经验，20 千克以下的小猪应采两前肢与气管交汇处，种公母猪和 20千克以上的中大猪可选颈部最低凹处。4.下针和抽血 小猪：对准以上描述的部位，用针垂直刺入，拉紧针筒活塞，若针头扎中前腔静脉，可见血液自血管源源流出，一直抽取到所需的血量即可。如果抽不到血液，说明针头没有扎中血管，此时可上下移动针头，直到针筒中见血液流出为止。v 种公母猪和中大猪：对准下针部位，使针头偏向气管约 15 度方向下针，拉紧针筒活塞，若针头扎中前腔静脉，可见血液流出。如果不见血液流出，说明针头没有扎中，有可能是前腔静脉较深，可用手顶紧针筒，使针头扎深一点。若仍采不到血，可以把针头往后稍退，或左右摇摆针头，直到有血流出为止
10、。实际上，操作熟练后，针头有没有扎中是可以感觉到的，当针头扎破静脉壁时，可以感觉到轻微的“扑”的一声。采血注意事项v 1 猪耳静脉采血，应缓慢回抽注射器活塞，若回抽活塞过快过猛，会使血管壁紧贴针尖，而抽不出血液。v 2 猪耳静脉采血速度慢，容易被污染，采血量少，血清少，中小猪尽量不用此方法采血。v 3 猪前腔静脉采血，难度较大，采血员必须具备准确而熟练的操作技术。猪前腔静脉采血技术要点：一是根据猪的大小选用不同型号的针头；二是做好保定，注意人畜安全。根据猪体大小，采用不同保定方式。猪保定后应相对稳定，不能骚动、后缩及左右摇摆；三是进针部位准。由于左侧靠近膈神经，故多在右侧进行采血。血液样品的处
11、理v 1 血浆的制备：在采血器内加入适量的抗凝剂，采血后，反复颠倒采血器，使抗凝剂与血液充分混匀，静置或经过离心使血细胞下沉后，上清液即为血浆。v 2.2 血清的制备：首先将采集的血液样品置室温半小时，待血液凝固后2000-3000 转/分离心5-10 分钟，上清夜即为血清；如离心后有轻微的溶血，用牙签将血凝块挑出，将混有红细胞碎片的血清再次离心，用干净吸管收集血清于干燥的指型管中，贴上标签备用。如血清溶血严重，应剔出样品3.血液样品的保存与运送v 采集的血液样品如不能及时进行检验，必须做适当的处理，防止其成分发生大的变化。v 通常分离到的血清与血浆样品保存于密闭试管中，存放于4 冰箱内或冷冻
12、。v 全血样品应保存于4 冰箱内，检验时，样品必须达到室温，达到室温之后颠倒数次，使血液充分混匀后，方可检验。v 如果样品能在24 小时内送往实验室，可保存于4 环境的保温箱内，如果24 小时内不能抵达或有些样品送往外地实验室时，样品必须冷冻处理后，并在低温下运送。运送途中防止样品泄漏，密闭封装并加冰袋运送。同时要填写详细的样品记录。血液样品变异因素的控制 v 严格控制血液样品的 变异因素，是使检测结果尽可能符合客观情况的重要环节。因此，在采血过程中应注意下列问题：v 1.规定动物的采血时间：有些血液化学成分有明显的昼夜波动，对采血动物，应在禁食12 小时后采血，这样可以将食物对血液各种成分的
13、浓度的影响减少到最低程度。在刚进完食动物身上采取的血液样品，往往出现血糖、甘油三酯增高，无机磷降低，麝香草酚浊度增加。进食富含脂肪的饲料，常导致血清混浊而干扰很多项目的生化检测。v 2.血液样品来源一致：动脉血和经脉学的化学成分略有差异，整个试验期间，采取的血液样品必须一致。v 3.防止分解：血液内某些化学成分，离体后由于氧化酶或细菌的作用，容易分解，致其含量有所改变。所以，为了防止血液内某些化学成分的分解，血液样品被采集后应立即按规定处理，及时检测或加入适当的保存剂按规定保存。v 4.防止气体逸散：血液暴露于空气中后，二氧化碳迅速逸出，并吸收氧气提高血氧饱和度，进而引起血浆成分的改变，因此，
14、在采血过程中要根据检测项目的需要来采取适当的采血方式v 5.防止污染：采血器及样品容器都必须用化学处理并用重蒸馏水冲洗，防止铜、铁等金属离子和污染物对影响检测结果。并且在做作蛋白结合碘测定时，禁用碘酊消毒采血部。v 6.防止溶血：溶血可以影响许多生化检测项目的结果。红细胞破裂后释放出的物质与血浆中许多成分的浓度不一样，如钠、氯化物、钙等在血浆中的浓度要高于红细胞内的浓度，应予以防止。v 7 引起溶血原因是强力震荡、离心速度过快、温度过低或者过高、加入与血液环境不等渗液体、放置时间过长等等引起红细胞破裂的因素。保存及运输需要注意的事项v 1.怀疑曾有疫情发生的畜群，错过组织样品采集时机时，可无菌操作采集动物血液，每头不少于5mL。无菌分离血清装入灭菌小瓶中，加盖密封后冷藏保存，通过检测抗体，做出追溯性诊断。v 2.采集样品时要填写样品采集登记表。v 3.装样容器必须密封，即防水又不透气。样品容器需加贴防水标签，并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等。v 4.样品运输前将样品容器装入套筒中，套筒应填充防震材料，加盖密封，与采样记录一同装入专用运输容器中。专用运输容器应隔热坚固，内装适当冷冻剂和防震材料。外包装上要加贴生物安全警示标志谢 谢！