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1、第五章第五章第五章第五章 细菌和噬菌体的遗传分析细菌和噬菌体的遗传分析细菌和噬菌体的遗传分析细菌和噬菌体的遗传分析第一节第一节第一节第一节 细菌和噬菌体的突变型及其识别方法细菌和噬菌体的突变型及其识别方法细菌和噬菌体的突变型及其识别方法细菌和噬菌体的突变型及其识别方法突变型:带有突变型:带有突变型:带有突变型:带有 突变基因并在表现性上显示出相对差异的个体。突变基因并在表现性上显示出相对差异的个体。突变基因并在表现性上显示出相对差异的个体。突变基因并在表现性上显示出相对差异的个体。一、细菌的突变型一、细菌的突变型一、细菌的突变型一、细菌的突变型1 1、按营养代谢的正常与否分类、按营养代谢的正常
2、与否分类、按营养代谢的正常与否分类、按营养代谢的正常与否分类原养型(野生型):原养型(野生型):原养型(野生型):原养型(野生型):这类细菌能在基本培养基上生长,用这类细菌能在基本培养基上生长,用这类细菌能在基本培养基上生长,用这类细菌能在基本培养基上生长,用“+”表示。表示。表示。表示。营养缺陷型(突变型):营养缺陷型(突变型):营养缺陷型(突变型):营养缺陷型(突变型):这类细菌需在基本培养基中添加所需的成分才这类细菌需在基本培养基中添加所需的成分才这类细菌需在基本培养基中添加所需的成分才这类细菌需在基本培养基中添加所需的成分才能生长。能生长。能生长。能生长。如:大肠杆菌(如:大肠杆菌(如
3、:大肠杆菌(如:大肠杆菌(E.coliE.coli)中,苏氨酸野生型中,苏氨酸野生型中,苏氨酸野生型中,苏氨酸野生型 ThrThr+苏氨酸缺陷型苏氨酸缺陷型苏氨酸缺陷型苏氨酸缺陷型 ThrThr-苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新2 2、按细菌的抗药性能分类、按细菌的抗药性能分类、按细菌的抗药性能分类、按细菌的抗药性能分类敏感型(野生型):敏感型(野生型):敏感型(野生型):敏感型(野生型):这类细菌通常会被一定剂量的某种药物杀死,这类细菌通常会被一定剂量的某种药物杀死,这类细菌通常会被一定剂量的某种药物杀死,这类细菌通常会被一定
4、剂量的某种药物杀死,用用用用“s s”表示表示表示表示抗药型(突变型):抗药型(突变型):抗药型(突变型):抗药型(突变型):这类细菌能够在涂布有一定剂量某种药物的培这类细菌能够在涂布有一定剂量某种药物的培这类细菌能够在涂布有一定剂量某种药物的培这类细菌能够在涂布有一定剂量某种药物的培养基上生长,用养基上生长,用养基上生长,用养基上生长,用“r r”表示表示表示表示如对青霉素(如对青霉素(如对青霉素(如对青霉素(PenecillinPenecillin)敏感型敏感型敏感型敏感型 PenPens s 抗药型抗药型抗药型抗药型 PenPenr r苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物
5、系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新3 3、根据能否抗噬菌体(、根据能否抗噬菌体(、根据能否抗噬菌体(、根据能否抗噬菌体(phagephage)分类分类分类分类噬菌体敏感型噬菌体敏感型噬菌体敏感型噬菌体敏感型 如如如如 E.coliE.coli的的的的 TonTons s(对对对对噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体T1T1敏感敏感敏感敏感)TtoTtos s(对对对对噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体T2T2敏感敏感敏感敏感)抗噬菌体突变型抗噬菌体突变型抗噬菌体突变型抗噬菌体突变型 如如如如 E.coliE.coli的的的的 TonTonr r(抗噬菌体抗噬菌体抗噬菌体抗噬菌体T1)T1)Tto Tto
6、r r(抗噬菌体抗噬菌体抗噬菌体抗噬菌体T2)T2)E.coliTonTons sE.coliTonTonr rT1 phageT1 phageT1 phageT1 phage致死生长苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新二、噬菌体的突变型二、噬菌体的突变型二、噬菌体的突变型二、噬菌体的突变型 噬菌斑(噬菌斑(噬菌斑(噬菌斑(plaqueplaque):):):):是指由于噬菌体的侵染,使细菌细胞裂解,是指由于噬菌体的侵染,使细菌细胞裂解,是指由于噬菌体的侵染,使细菌细胞裂解,是指由于噬菌体的侵染,使细菌细胞裂解,在长成的细菌菌落上出
7、现一些圆形而清亮的小洞,这些小洞就是在长成的细菌菌落上出现一些圆形而清亮的小洞,这些小洞就是在长成的细菌菌落上出现一些圆形而清亮的小洞,这些小洞就是在长成的细菌菌落上出现一些圆形而清亮的小洞,这些小洞就是噬菌斑。噬菌斑。噬菌斑。噬菌斑。plaque苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新1 1、快速溶菌突变型、快速溶菌突变型、快速溶菌突变型、快速溶菌突变型 如如如如T2phage T2phage 的的的的 r r+、r rE.coliE.coliT2phageplaque:小、边缘模糊 r+plaque:大、边缘清晰 r苏州科技学院生物
8、系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新2 2、寄主范围突变型、寄主范围突变型、寄主范围突变型、寄主范围突变型 如如如如T2 phage T2 phage 的的的的 T T2 2h h+、T T2 2h h接种T T2 2h h+、E.coli TtorE.coli TtorE.coli TtorE.coli Ttos接种T T2 2h h、无噬菌斑无噬菌斑无噬菌斑无噬菌斑有噬菌斑有噬菌斑有噬菌斑有噬菌斑E.coli TtorE.coli TtosE.coli TtosT T2 2h h 能能能能作用于作用于作用于作用于 T T2 2h h+只能只能只
9、能只能作用于作用于作用于作用于 苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新第二节第二节第二节第二节 细菌的遗传分析细菌的遗传分析细菌的遗传分析细菌的遗传分析一、一、一、一、E.coliE.coli的结构的结构的结构的结构质粒(plasmid)细菌染色体细胞壁细胞膜苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚
10、新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新 质粒(质粒(质粒(质粒(plasmidplasmid):是指能自我复制,并可在细菌分裂时传递给子是指能自我复制,并可在细菌分裂时传递给子是指能自我复制,并可在细菌分裂时传递给子是指能自我复制,并可在细菌分裂时传递给子细胞的细菌染色体外的环状细胞的细菌染色体外的环状细胞的细菌染色体外的环状细胞的细菌染色体外的环状DNADNA分子。分子。分子。分子。1 1、质粒存在的状态、质粒存在的状态、
11、质粒存在的状态、质粒存在的状态独立于细菌染色体外进行遗传独立于细菌染色体外进行遗传独立于细菌染色体外进行遗传独立于细菌染色体外进行遗传连在细菌染色体上一同遗传连在细菌染色体上一同遗传连在细菌染色体上一同遗传连在细菌染色体上一同遗传苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新2 2、质粒的基本功能、质粒的基本功能、质粒的基本功能、质粒的基本功能 自我复制自我复制自我复制自我复制 与细菌染色体连接与细菌染色体连接与细菌染色体连接与细菌染色体连接 感染感染感染感染3 3、几种典型的质粒、几种典型的质粒、几种典型的质粒、几种典型的质粒 性因子性因子
12、性因子性因子F F 产大肠杆菌素质粒产大肠杆菌素质粒产大肠杆菌素质粒产大肠杆菌素质粒ColE1ColE1 抗生素抗性质粒抗生素抗性质粒抗生素抗性质粒抗生素抗性质粒R100R1004 4、质粒的分类质粒的分类质粒的分类质粒的分类 按转移特性分类按转移特性分类按转移特性分类按转移特性分类 接合型接合型接合型接合型:这类质粒一般使细菌细胞有致育性,且在细胞间接触:这类质粒一般使细菌细胞有致育性,且在细胞间接触:这类质粒一般使细菌细胞有致育性,且在细胞间接触:这类质粒一般使细菌细胞有致育性,且在细胞间接触时转移。时转移。时转移。时转移。非接合型非接合型非接合型非接合型:这类质粒不能在细胞间转移,其中大
13、部分不具备编:这类质粒不能在细胞间转移,其中大部分不具备编:这类质粒不能在细胞间转移,其中大部分不具备编:这类质粒不能在细胞间转移,其中大部分不具备编码性伞毛的基因。码性伞毛的基因。码性伞毛的基因。码性伞毛的基因。苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新 按自我复制能力分类按自我复制能力分类按自我复制能力分类按自我复制能力分类 严紧型严紧型严紧型严紧型:这类质粒在寄主体内只产生一个或几个拷贝,它们的复:这类质粒在寄主体内只产生一个或几个拷贝,它们的复:这类质粒在寄主体内只产生一个或几个拷贝,它们的复:这类质粒在寄主体内只产生一个或几个拷
14、贝,它们的复制与染色体制与染色体制与染色体制与染色体DNADNA复制相伴随。接合型质粒一般是严紧型质粒。复制相伴随。接合型质粒一般是严紧型质粒。复制相伴随。接合型质粒一般是严紧型质粒。复制相伴随。接合型质粒一般是严紧型质粒。松弛型松弛型松弛型松弛型:这类质粒在寄主体内可产生:这类质粒在寄主体内可产生:这类质粒在寄主体内可产生:这类质粒在寄主体内可产生1010至至至至200200个拷贝,它们与染色个拷贝,它们与染色个拷贝,它们与染色个拷贝,它们与染色体复制不同步。大部分非接合型质粒属于松弛型质粒体复制不同步。大部分非接合型质粒属于松弛型质粒体复制不同步。大部分非接合型质粒属于松弛型质粒体复制不同
15、步。大部分非接合型质粒属于松弛型质粒质粒、附加体、温和性质粒、附加体、温和性质粒、附加体、温和性质粒、附加体、温和性 phagephagephagephage、病毒特征区别病毒特征区别病毒特征区别病毒特征区别苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新二、细菌的杂交二、细菌的杂交二、细菌的杂交二、细菌的杂交在在在在E.coliE.coli中,有两个营养缺陷型品系中,有两个营养缺陷型品系中,有两个营养缺陷型品系中,有两个营养缺陷型品系 A A品系:品系:品系:品系:metmet-bio bio-thrthr+leuleu+thithi+B B
16、品系:品系:品系:品系:metmet+bio bio+thrthr-leuleu-thithi-苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新原养型菌落出现的可能原因:原养型菌落出现的可能原因:原养型菌落出现的可能原因:原养型菌落出现的可能原因:细菌之间结合发生重组而形成。细菌之间结合发生重组而形成。细菌之间结合发生重组而形成。细菌之间结合发生重组而形成。细胞间并没有接合,而是交换了细胞间并没有接合,而是交换了细胞间并没有接合,而是交换了细胞间并
17、没有接合,而是交换了DNADNA。细胞间并没有接合,而是通过培养基交换了养料细胞间并没有接合,而是通过培养基交换了养料细胞间并没有接合,而是通过培养基交换了养料细胞间并没有接合,而是通过培养基交换了养料 细胞并没有接合,而是亲本细菌发生了回复突变细胞并没有接合,而是亲本细菌发生了回复突变细胞并没有接合,而是亲本细菌发生了回复突变细胞并没有接合,而是亲本细菌发生了回复突变A品系B品系滤片基本培养基基本培养基无菌落无菌落苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新三、三、三、三、E.coliE.coli的性别的性别的性别的性别A A:MM-B
18、B-(甲硫氨酸和生物素缺陷型)甲硫氨酸和生物素缺陷型)甲硫氨酸和生物素缺陷型)甲硫氨酸和生物素缺陷型)B B:T T-L L-B1B1-(苏氨酸亮氨酸维生素苏氨酸亮氨酸维生素苏氨酸亮氨酸维生素苏氨酸亮氨酸维生素B1B1缺陷型)缺陷型)缺陷型)缺陷型)ASASr r:M:M-B B-抗链霉素突变型抗链霉素突变型抗链霉素突变型抗链霉素突变型 ASASs s:M:M-B B-链霉素敏感型链霉素敏感型链霉素敏感型链霉素敏感型BSBSr r:T:T-L L-B1B1-抗链霉素突变型抗链霉素突变型抗链霉素突变型抗链霉素突变型 BSBSs s:T:T-L L-B1B1-链霉素敏感链霉素敏感链霉素敏感链霉素敏
19、感型型型型在不含链霉素的基本培养基上在不含链霉素的基本培养基上在不含链霉素的基本培养基上在不含链霉素的基本培养基上正交正交正交正交 ASASs s x x BSBSr r 反交反交反交反交 ASASr r x x BSBSs s有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现正交正交正交正交 ASASs s x x BSBSr r 反交反交反交反交 ASASr r x x BSBSs s在含有链霉素的基本培养基上在含有链霉素的基本培养基上在含有链霉素的基本培养基上在含有链霉素的基本培养基上有原养型出现有原养型出现有原养型出现有原养型出现无原养型出
20、现无原养型出现无原养型出现无原养型出现苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新F F-:相当与雌性动物的相当与雌性动物的相当与雌性动物的相当与雌性动物的E.coliE.coliF F+:相当与雄性动物的相当与雄性动物的相当与雄性动物的相当与雄性动物的E.coliE.coli 决定决定决定决定E.coliE.coli 性别的是一种质粒,性别的是一种质粒,性别的是一种质粒,性别的是一种质粒,即即即即F F因子。因子。因子。因子。F F因子既可脱离核染色体因子既可脱离核染色体因子既可脱离核染色体因子既可脱离核染色体组而在细胞质内游离存在,也可
21、插入即整合在染色体组上。它既可经过组而在细胞质内游离存在,也可插入即整合在染色体组上。它既可经过组而在细胞质内游离存在,也可插入即整合在染色体组上。它既可经过组而在细胞质内游离存在,也可插入即整合在染色体组上。它既可经过接合作用而获得,也可通过接合作用而获得,也可通过接合作用而获得,也可通过接合作用而获得,也可通过叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素c c等的处等的处等的处等的处理理理理,使其,使其,使其,使其DNADNA的复制受抑制后而从细胞中消除,它是有关细菌性别的决的复制受抑制后而从细胞中消除,它
22、是有关细菌性别的决的复制受抑制后而从细胞中消除,它是有关细菌性别的决的复制受抑制后而从细胞中消除,它是有关细菌性别的决定者,凡有定者,凡有定者,凡有定者,凡有F F因子的细胞,在其表面均有性伞毛存在。因子的细胞,在其表面均有性伞毛存在。因子的细胞,在其表面均有性伞毛存在。因子的细胞,在其表面均有性伞毛存在。F F+x F x F-70%F70%F-变成变成变成变成F F+F F+x F x F+100%F100%F+F F+变成变成变成变成F F-苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生
23、物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新四、四、四、四、HfrHfr品系(高频重组品系)品系(高频重组品系)品系(高频重组品系)品系(高频重组品系)苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物
24、系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新HfrHfr与与与与F F+、F F-菌株的异同点菌株的异同点菌株的异同点菌株的异同点 F F+和和和和F-F-能杂交,能杂交,能杂交,能杂交,HfrHfr和和和和F F-也能杂交,也能杂交,也能杂交,也能杂交,F F-和和和和F F-则不能杂交。则不能杂交。则不能杂交。则不能杂交。F F+、HfrHfr的细胞表面均具有性伞毛,而的细胞表面均具有性伞毛,而
25、的细胞表面均具有性伞毛,而的细胞表面均具有性伞毛,而F F-细胞无。细胞无。细胞无。细胞无。HfrHfr经经经经叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素叮啶类化合物、溴化乙锭或丝裂霉素c c等处理,性质不变,等处理,性质不变,等处理,性质不变,等处理,性质不变,而而而而F F+则变为则变为则变为则变为F F-。HfrHfr x F x F-F -F-,F F+x F x F-F -F+从从从从F F+中能得到中能得到中能得到中能得到HfrHfr,而从而从而从而从F F-中不能得到中不能得到中不能得到中不能得到 HfrHfr苏州科技学院生物
26、系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新F F 品系转变成品系转变成HfrHfr品系的品系的频率要高频率要高于于F F品系。品系。F F 变成变成HfrHfr时时F F 因子整合到因子整合到相同位点相同位点上,上,而而F F变成变成HfrHfr时可整合到时可整合到
27、不同位点不同位点。F F FF高频传递特定的基因,形成部分高频传递特定的基因,形成部分二倍体,而二倍体,而F FFF产生产生F F但不转移任何但不转移任何基因,或以基因,或以10107 7将宿主的基因按顺序转将宿主的基因按顺序转入受体,受体仍为入受体,受体仍为F F。所转移的基因是所转移的基因是不同的不同的。F 和和F因子因子苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新五、中断杂交试验和连锁分析作图五、中断杂交试验和连锁分析作图五、中断杂交试验和连锁分析作图五、中断杂交试验和连锁分析作图 中断杂交技术:中断杂交技术:中断杂交技术:中断杂交技
28、术:是指根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘是指根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘是指根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘是指根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘制连锁图的技术。制连锁图的技术。制连锁图的技术。制连锁图的技术。strstrs Hfr:thr+leu+azis tons lac+gal+strstrr F-:thr-leu-azir tonr lac-gal-苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系
29、苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院
30、生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新第三节第三节第三节第三节 噬菌体的遗传分析
31、噬菌体的遗传分析噬菌体的遗传分析噬菌体的遗传分析一、噬菌体(一、噬菌体(一、噬菌体(一、噬菌体(plageplage)烈性噬菌体烈性噬菌体烈性噬菌体烈性噬菌体(virulent phage)(virulent phage):感染细胞后毒都引起细菌细胞裂解。感染细胞后毒都引起细菌细胞裂解。感染细胞后毒都引起细菌细胞裂解。感染细胞后毒都引起细菌细胞裂解。温和性噬菌体温和性噬菌体温和性噬菌体温和性噬菌体(temperate phage)(temperate phage):感染细胞后细菌细胞不裂解而能继感染细胞后细菌细胞不裂解而能继感染细胞后细菌细胞不裂解而能继感染细胞后细菌细胞不裂解而能继续生长繁殖
32、,成为溶源性细菌续生长繁殖,成为溶源性细菌续生长繁殖,成为溶源性细菌续生长繁殖,成为溶源性细菌溶源性细菌溶源性细菌溶源性细菌溶源性细菌(lysogeniclysogenic bacteria)bacteria):带有温和噬菌体的细菌。带有温和噬菌体的细菌。带有温和噬菌体的细菌。带有温和噬菌体的细菌。原噬菌体原噬菌体原噬菌体原噬菌体(prophageprophage):侵入的温和噬菌体的核酸附着在细菌染色体上,侵入的温和噬菌体的核酸附着在细菌染色体上,侵入的温和噬菌体的核酸附着在细菌染色体上,侵入的温和噬菌体的核酸附着在细菌染色体上,称为原噬菌体称为原噬菌体称为原噬菌体称为原噬菌体原养型原养型原
33、养型原养型(prototroph)(prototroph):不带有噬菌体的细菌类型。不带有噬菌体的细菌类型。不带有噬菌体的细菌类型。不带有噬菌体的细菌类型。苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新二、噬菌体的基因重组二、噬菌体的基因重组二、噬菌体的基因重组二、噬菌体的基因重组 对对对对T2T2噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体的噬菌斑、寄主范围来研究的噬
34、菌斑、寄主范围来研究的噬菌斑、寄主范围来研究的噬菌斑、寄主范围来研究r r型能快速溶菌,产生大噬菌斑,边缘清晰型能快速溶菌,产生大噬菌斑,边缘清晰型能快速溶菌,产生大噬菌斑,边缘清晰型能快速溶菌,产生大噬菌斑,边缘清晰r+r+型缓慢溶菌产生小噬菌斑,边缘模糊型缓慢溶菌产生小噬菌斑,边缘模糊型缓慢溶菌产生小噬菌斑,边缘模糊型缓慢溶菌产生小噬菌斑,边缘模糊h h寄主范围突变型,对寄主范围突变型,对寄主范围突变型,对寄主范围突变型,对TtoTtos s,Tto,Ttor r均能感染,噬菌斑透明均能感染,噬菌斑透明均能感染,噬菌斑透明均能感染,噬菌斑透明h+h+野生型对野生型对野生型对野生型对TtoT
35、tos s能感染能感染能感染能感染,对对对对TtoTtor r不能感染噬菌斑混浊不能感染噬菌斑混浊不能感染噬菌斑混浊不能感染噬菌斑混浊苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新噬菌体的杂交和重组值的计算噬菌体的杂交和重组值的计算噬菌体的杂交和重组值的计算噬菌体的杂交和重组值的计算选用的选用的选用的选用的T2T2噬菌体为噬菌体为噬菌体为噬菌体为 hrhr+和和和和 h h+r r选用的选用的选用的选用的E.cliE.cli为为为为TtoTtos s(E.coli(E.coli B1)B1)、TtoTtor r(E.coli(E.coli B
36、2)B2)苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新hrhr+h h+r rh h+r r+hrhr苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物
37、系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新第四节第四节第四节第四节 转化与转导作图转化与转导作图转化与转导作图转化与转导作图一、细菌的转化与作图一、细菌的转化与作图一、细菌的转化与作图一、细菌的转化与作图转化(转化(转化(转化(transformationtransformation):是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的来自另一基因型细胞的来自另一基因型细胞的来自另
38、一基因型细胞的DNADNA片段,从而使其基因型和表现型发生片段,从而使其基因型和表现型发生片段,从而使其基因型和表现型发生片段,从而使其基因型和表现型发生相应变化的现象。相应变化的现象。相应变化的现象。相应变化的现象。转化的过程:转化的过程:转化的过程:转化的过程:双链双链双链双链DNADNA分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合 供体供体供体供体DNADNA片段被吸入受体细胞,并要防止受体片段被吸入受体细胞,并要防止受体片段被吸入受体细胞,并要防止受体片段被吸入受体细胞,并要防止受体DN
39、ADNA酶的破坏酶的破坏酶的破坏酶的破坏 供体供体供体供体DNADNA进入受体后,立即从双链进入受体后,立即从双链进入受体后,立即从双链进入受体后,立即从双链DNADNA变为单链变为单链变为单链变为单链DNADNA,其中一条其中一条其中一条其中一条单链被降解单链被降解单链被降解单链被降解 未被降解的一条单链未被降解的一条单链未被降解的一条单链未被降解的一条单链DNADNA部分或整个地插入受体细胞的部分或整个地插入受体细胞的部分或整个地插入受体细胞的部分或整个地插入受体细胞的DNADNA链中,链中,链中,链中,与同源区段形成杂合的与同源区段形成杂合的与同源区段形成杂合的与同源区段形成杂合的DNA
40、DNA分子分子分子分子 杂合杂合杂合杂合DNADNA经复制、分离后,形成杂和双链经复制、分离后,形成杂和双链经复制、分离后,形成杂和双链经复制、分离后,形成杂和双链DNADNA,从而导致基因重从而导致基因重从而导致基因重从而导致基因重组形成各种类型的转化子(组形成各种类型的转化子(组形成各种类型的转化子(组形成各种类型的转化子(transformanttransformant)苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科
41、技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新利利用用转转化化确确定定未未知知基基因因苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新转化作图转化作图转化作图转化作图苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新二、转导与作图二、转导与作图二、转导与作图二、转导与作图转导(转导(转导(转导(transductiontransduction):是指通过噬菌体把细菌的基因从
42、一个细菌转是指通过噬菌体把细菌的基因从一个细菌转是指通过噬菌体把细菌的基因从一个细菌转是指通过噬菌体把细菌的基因从一个细菌转入另一个细菌的过程。入另一个细菌的过程。入另一个细菌的过程。入另一个细菌的过程。转导分为:普遍性转导和局限性转导转导分为:普遍性转导和局限性转导转导分为:普遍性转导和局限性转导转导分为:普遍性转导和局限性转导(一)普遍性转导(一)普遍性转导(一)普遍性转导(一)普遍性转导(general transductiongeneral transduction)与作图与作图与作图与作图普遍性转导:普遍性转导:普遍性转导:普遍性转导:供体细菌的基因组的所有基因都有同等机会转导到受供
43、体细菌的基因组的所有基因都有同等机会转导到受供体细菌的基因组的所有基因都有同等机会转导到受供体细菌的基因组的所有基因都有同等机会转导到受体细菌中的现象。如体细菌中的现象。如体细菌中的现象。如体细菌中的现象。如P1P1、P22P22噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新转导作图转导作图转导作图转导作图用用用用 E.col
44、iE.coliE.coliE.coli 的的的的 P1P1P1P1噬菌体作转导试验噬菌体作转导试验噬菌体作转导试验噬菌体作转导试验供体:供体:供体:供体:thrthrthrthr+leuleuleuleu+araaraaraara+受体:受体:受体:受体:thrthrthrthr-leuleuleuleu-araaraaraara-ara+thr+leu+苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新供体:trptrpA+supsupC+pyrp
45、yrF+受体:trptrpA-supsupC-pyrpyrF-苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新共共转导绘图转导绘图苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新(二)(二)(二)(二)局限性转导局限性转导局限性转导局限性转导 局限性转导局限性转导局限性转导局限性转导(restricte
46、d(restricted transduction):transduction):是指噬菌是指噬菌是指噬菌是指噬菌体只把细菌基因组中特体只把细菌基因组中特体只把细菌基因组中特体只把细菌基因组中特定部分的基因整合到自定部分的基因整合到自定部分的基因整合到自定部分的基因整合到自己的己的己的己的DNADNA中,然后转移中,然后转移中,然后转移中,然后转移给受体细菌的过程。如给受体细菌的过程。如给受体细菌的过程。如给受体细菌的过程。如K12K12()苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新 局限性转导局限性转导局限性转导局限性转导(restricted transduction)(restricted transduction)苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系苏州科技学院生物系 叶亚新叶亚新叶亚新叶亚新