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1、羧肽酶第7章 生物催化剂酶Enzymes本章主要内容：酶的一般概念酶的组成与维生素酶的结构与功能的关系酶的催化机理酶反应的动力学酶活性的调节1.酶的概述酶是由活细胞产生的，能在体内或体外起同样催化作用的一类具有活性中心和特殊构象的生物大分子，包括蛋白质和核酸。绝大部分酶是蛋白质，还有一些核糖核酸R N A 具有催化作用，称为核酶（ribozym e）。1.1 定义细胞的代谢由成千上万的化学反应组成，几乎所有的反应都是由酶（enzym e）催化的。酶对于动物机体的生理活动有重要意义，不可或缺。酶在生产实践中有广泛应用。高效性酶的催化作用可使反应速度比非催化反应提高108-1020倍。比其他催化反
2、应高106-1013倍专一性即对底物的选择性或特异性。一种酶只催化一种或一类底物转变成相应的产物。1.酶的概述1.2 酶的催化特性绝对专一性 相对专一性立体专一性绝对专一性一种酶只催化一种底物转变为相应的产物。例如，脲酶只催化尿素水解成 CO2 和NH3。相对专一性一种酶作用于一类化合物或一类化学键。不同的例如，不同的蛋白水解酶对于所水解的肽键两侧的基团有要求。立体专一性指酶对其所催化底物的立体构型有特定的要求。例如，乳酸脱氢酶专一地催化 L-乳酸转变为丙酮酸，延胡索酸只作用于反式的延胡索酸（反丁烯二酸）。立体专一性保证了反应的定向进行。R1:Lys,ArgR2:不是ProR3:Tyr,Trp
3、,PheR4:不是 Pro 酶容易变性这是酶的化学本质（蛋白质）所决定的。酶的可调节性抑制和激活（activation and inhibition）反馈控制(feed back)酶原激活(activation of proenzyme)变构酶(allosteric enzyme)化学修饰(chemical modification)多酶复合体(multienzyme complex)酶在细胞中的区室化(enzyme compartmentalization)1.酶的概述已知的上千种酶绝大部分是蛋白质。单纯酶：仅由蛋白质组成的酶。少数，例如：溶菌酶结合酶：除蛋白质外，还有非蛋白质成分。大多数。
4、全酶=酶蛋白+辅助因子辅助因子包括:十几种辅酶、辅基，还有一些 金属离子。2.酶的组成与维生素2.1 酶的化学本质酶蛋白的作用：与特定的底物结合，决定反应的专一性。辅酶、辅基的作用：参与电子的传递、基团的转移等，决定了酶所催化反应的性质。辅酶与辅基都是耐热的有机小分子，结构上常与维生素和核苷酸有关。辅酶与酶蛋白结合不紧，容易经透析除去，而辅基与酶蛋白共价相连。金属离子的作用：它们是酶和底物联系的“桥梁”；稳定酶蛋白的构象；酶的“活性中心”的部分。2.酶的组成与维生素2.1 酶的化学本质（Vitamin）是动物和人类生理活动所必需的，从食物中获得的一类有机小分子。它们并不是机体的能量来源，也不是
5、结构成分，大多数以辅酶、辅基的形式参与调节代谢活动。A视黄醇（维生素 A脂溶性维生素：原胡萝卜素）DEK钙化醇生育酚凝血维生素2.酶的组成与维生素2.2 维生素与辅酶和辅基的关系维生素B B族维生素族维生素辅酶形式辅酶形式酶促反应中的主要作用酶促反应中的主要作用硫胺素素硫胺素素(B(B(B(B1 1)硫胺素焦磷酸酯酯硫胺素焦磷酸酯酯(TPP)(TPP)(TPP)(TPP)-酮酸氧化脱羧酮基转移作酮酸氧化脱羧酮基转移作用用核黄素素核黄素素(B(B(B(B2 2)黄素单核苷酸酸黄素单核苷酸酸(FMN)(FMN)(FMN)(FMN)黄素腺嘌呤二核苷酸酸黄素腺嘌呤二核苷酸酸(FAD)(FAD)(FAD
6、)(FAD)氢原子转移氢原子转移氢原子转移氢原子转移尼克酰胺胺尼克酰胺胺(PP)(PP)(PP)(PP)+尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸酸尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸酸(NAD(NAD)(NAD(NAD)尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸+(NADP)(NADP)氢原子转移氢原子转移氢原子转移氢原子转移吡哆醇醇吡哆醇醇(醛、胺醛、胺胺胺)(B(B6 6)磷酸吡哆醛磷酸吡哆醛氨基转移氨基转移泛酸泛酸辅酶酶辅酶酶A(CoAA(CoA)A(CoAA(CoAA(CoA)A(CoA)酰基转移酰基转移叶酸叶酸四氢叶酸四氢叶酸 一碳基团团一碳基团团转移转移生物素素生物素素(H)(H)(H)(H)生物素生
7、物素羧化作用羧化作用钴胺素素钴胺素素(B(B(B(B1212)甲基钴胺素甲基钴胺素5 5-脱氧腺苷钴胺脱氧腺苷钴胺素素甲基转移甲基转移B族维生素及其辅酶形式族维生素及其辅酶形式含2-60个亚基，有复杂的高级结构。常通过变构效应在代谢途径中发挥重要的调节作用。多酶复合体由多个功能上相关的酶彼此嵌合而形成的复合体。它可以促进某个阶段的代谢反应高效、定向和有序地进行。串联酶或多功能酶催化相关代谢反应的酶蛋白基因在进化过程中融合，使遗传信息表达后生成一条多肽链，却具有多种不同催化功能。3.酶的分子结构根据酶蛋白分子结构的特点，可将其分为：单体酶只有三级结构，一条多肽链的酶。如 129个氨基酸的溶菌酶，
8、分子量14600。寡聚酶A CP蛋白组成。大肠杆菌的丙酮酸脱氢酶系模型3.酶的分子结构功能上相关的几个酶在空间上组织在一起，定向有序地催化一系列反应。例如，丙酮酸脱氢酶系由3个酶组成，脂肪酸合成酶系由6个酶和1个指酶分子中直接和底物结合，并和酶催化作用直接有关的部位。（1 1）酶活性中心的组成：）酶活性中心的组成：必需基团：对酶发挥活性所必需的基团。对于结合酶，辅助因子常常是活性中心的组成部分。这些基团在一级结构上可能相距很远，甚至可能不在一条肽链上，但在蛋白质空间结构上彼此靠近，形成具有一定空间结构的区域。3.酶的分子结构3.1 酶的活性中心酶的活性中心（2 2）酶活性中心的特点）酶活性中心
9、的特点不是刚性的，而具有一定的柔性。不是刚性的，而具有一定的柔性。（约（约1%2%），相当于），相当于2 3个氨基酸残基。个氨基酸残基。活性中心在酶分子总体积中只占相当小的部分活性中心在酶分子总体积中只占相当小的部分 都是酶分子表面的一个凹穴，有一定的大小和形状，但都是酶分子表面的一个凹穴，有一定的大小和形状，但 活性中心为非极性的微环境，有利于与底物结合。活性中心为非极性的微环境，有利于与底物结合。的活性中心。的活性中心。底物与酶通过形成较弱键力的次级键相互作用并结合到酶底物与酶通过形成较弱键力的次级键相互作用并结合到酶 酶与底物结合的过程中，底物分子或酶分子或它们两者的构酶与底物结合的过程
10、中，底物分子或酶分子或它们两者的构象同时发生一定变化后才相互契合，这时催化基团的位置也象同时发生一定变化后才相互契合，这时催化基团的位置也正好处于所催化底物的敏感化学键部位。正好处于所催化底物的敏感化学键部位。结合基团：底物在此与酶分子结合。一个酶的结合部位又可以分为各种亚位点，分别与底物的不同部位结合。催化基团：底物的敏感键在此被打断或形成新的键，从而发生一定的化学反应。一个酶的催化部位可以不止一个。必需基团按其作用可分为：Substrates typically lose waters(of hydration水合作用)in the formation of the ES complex酶
11、的活性中心示意图活性中心是酶分子上由催化基团和结合基团构成的一个微区。活性中心是酶分子上由催化基团和结合基团构成的一个微区。多肽链底物分子酶活性中心催化基团结合基团活性中心必需基团活性中心以外必需基团e），在特定的条件下，通过部分肽段的有限水解，转变成有活性的酶。如，动物的消化酶。3.酶的分子结构3.2 酶原激活无活性的酶原（pr oe nz ym指催化相同的化学反应，但是理化性质不同的一组酶。如，氨基酸组成、电泳行为、免疫原性、米氏常数等不同。3.3 同工酶（isozyme）3.酶的分子结构以乳酸脱氢酶（LDH）为例LDH是是1959年发现的年发现的第一个同工酶。第一个同工酶。由由4个个亚基
12、组成的寡聚酶，亚基分为亚基组成的寡聚酶，亚基分为M型型和和H型型。因此可以装配成五种四聚体：因此可以装配成五种四聚体：H4(LDH1)、H3M(LDH2)、H2M2(LDH3)、HM3(LDH4)、M4(LDH5)不同的不同的LDH分布在分布在不同组织中。例如，脊椎动物不同组织中。例如，脊椎动物心脏中主要是心脏中主要是 LDH1，而骨骼肌的则是，而骨骼肌的则是LDH5。LDH1(H4)LDH2(H3M)LDH3(H2M2)LDH4(HM3)LDH5(M4)不同组织中的LDH同工酶的电泳图谱化学反应是由具有一定能量的活化分子相互碰撞发生的。分子从初态转变为激活态所需的能量称为活化能。无论何种催化
13、剂，其作用都在于降低化学反应的活化能，加快化学反应的速度。4.酶的催化机理4.1 活化能非催化反应和酶催化反应活化能的比较Ea，活化能；G，自由能变化S+EESP+E中间产物后人进一步发展了中间产物学说：S+EESES*EPP+E过渡态复合物4.酶的催化机理4.2 催化机理目前较满意的解释是中间产物学说酶介入了反应过程。通过形成不稳定的过渡态中间复合物，使原本一步进行的反应分为两步进行，而两步反应都只需较少的能量活化。从而使整个反应的活化能降低。酸碱催化：活性中心的一些基团，如 Hi s，Asp作为质子的受体或供体，参与传递质子。共价催化：酶与底物形成过渡性的共价中间体，限制底物的活动，使反应
14、易于进行。疏水效应：活性中心的疏水区域对水分子的排除、排斥，有利于酶与底物的接触。4.酶的催化机理在一个化学反应中，过渡态的形成和活化能的降低是反应进行的关键步骤，任何有助于过渡态形成与稳定的因素都有利于酶行使其高效性。现在认为，与酶作用高效性有关的重要因素有以下五个方面。邻近与定向效应：增加了酶与底物的接触机会和有效碰撞。张力效应：诱导底物变形，扭曲，促进了化学键的断裂。4.3 锁钥学说(Lock and key Hypothesis)酶和底物的结合状如钥匙与锁的关系。底物分子或其一部分象钥匙一样，专一地楔入到酶的活性中心部位，即底物分子进行化学反应的部位与酶分子活性中心具有紧密互补的关系。
15、4.酶的催化机理4.酶的催化机理4.3 诱导契合学说（induced fit）1958年 D.E.Koshland提出酶分子活性中心的结构原来并非和底物的结构互相吻合，但酶的活性中心是柔性的而非刚性的。当底物与酶相遇时，可诱导酶活性中心的当底物与酶相遇时，可诱导酶活性中心的构象发生相应的变化，其上有关的各个基团达构象发生相应的变化，其上有关的各个基团达到正确的排列和定向，因而使底物和酶能完全到正确的排列和定向，因而使底物和酶能完全契合。契合。当反应结束产物从酶分子上脱落下来后，当反应结束产物从酶分子上脱落下来后，酶的活性中心又恢复成原来的构象。酶的活性中心又恢复成原来的构象。酶促反应动力学：研
16、究酶促反应速度及其影响因素。反应速度：单位时间内底物减少或产物增加的速度，常用初速度来衡量。5.酶促反应的动力学概念：影响酶促反应速度的因素：反应温度pH 值酶浓度E底物浓度S抑制剂I激活剂A最适温度（optimum T）：使酶促反应速度达到最大时的温度。最适温度因不同的酶而异，动物体内的酶的最适温度在37400C左右。酶的最适温度并非酶的特征性常数，它与底物、作用时间等因素有关。5.1 温度对酶促反应速度的影响5.酶促反应的动力学酶反应的温度曲线和最适温度5.2 溶液pH值对酶促反应速度的影响5.酶促反应的动力学最适pH（optimum pH）：使酶促反应速度达到最大时溶液的pH。pH影响酶
17、分子解离状态。影响酶分子解离状态。pH影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。极度极度pH的条的条件引起酶蛋白的变性。件引起酶蛋白的变性。酶的最适酶的最适pH 一般在一般在7 左右。也有很多例外，左右。也有很多例外，如胃蛋白如胃蛋白酶的最适酶的最适pH只有只有1.5，胰蛋白酶，胰蛋白酶(7.8)。酶的最适酶的最适pH并非酶的并非酶的特征性常数，它与底物的种类、特征性常数，它与底物的种类、浓度等因素有关。浓度等因素有关。在其他条件确定时，当底物浓度大大超过酶浓度时，反应速度与酶的浓度成正比。5.3 酶浓度对酶促反应速度的影响5.酶促反应的动力学0.2Vm2
18、0.1例例-变变-SS与与v v关系：关系：当当SS很低时，很低时，SS 与与v v 成比例成比例-一级反应一级反应当当SS较高时，较高时，SS 与与v v 不成比例不成比例当当SS很高时，很高时，SS，v v不变不变-零级反应零级反应012345678S5.酶促反应的动力学5.4 底物浓度对酶促反应速度的影响vVm0.3米-曼氏方程式（Michaelis-Menten equation）V=Vmax SKm+S米米-曼曼氏方程解释：氏方程解释：当当SKm时，时，v=(Vmax/Km)S,即即v 正比于正比于S当当SKm时，时，v Vmax,即即S 而而v不变不变V=Vmax SKm+SKm的
19、意义米氏常数Km=(k2+k3)/k1Km等于酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度。所以Km的单位为浓度单位。Km是酶的特征性常数，可表示酶与底物的亲和力。在反应的起始阶段，kk，mkk1平解离m越大，说明和之间的亲和力越小，复合物越不稳定。m越小，说明和的亲和力越大，复合物越稳定，也越有利于反应。E +SESE +PK3K4K1K2Vmax2Vmax SKm SKm=S所以采用双倒数作图法：即1/v-1/S作图1V max1SKmVmax1vKm值与 Vmax值的测定v-S作图法：Vmax难以测定，不能从vV/2处求得，从而导致Km也难确定。1V max1SKmVmax1v5.5 抑制剂对
20、酶促反应速度的影响5.酶促反应的动力学酶的抑制剂（inhibitor）:凡能使酶的活性下降而不引起酶蛋白变性的物质。抑制作用可分为：可逆抑制作用和不可逆抑制作用两大类。（一）可逆抑制作用（reversible inhibition）抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析、超滤等物理方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与酶结合的情况，又可以分为竞争性抑制、非竞争性抑制等。1、竞争性抑制作用（competitive inhibitor）某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的结合，因而降低酶反应速度。这
21、种作用称为竞争性抑制作用。竞争性抑制的动力学特点是竞争性抑制的动力学特点是 Vmax不变，而不变，而 Km增大增大竞争性抑制的特点：I与S分子结构相似；Vmax 不变，Km增大；抑制程度取决于I与E的亲和力，以及I和S的相对浓度比例；增大S可减轻或消除抑制作用.例1：丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。这种抑制作用可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这种抑制作用。琥珀酸延胡索酸丙二酸例2：磺胺类药物的抑菌作用H2NH2NCOOH对氨基苯甲酸SO2NHR磺胺类药物对氨基苯甲酸二氢喋呤啶谷氨酸二氢叶酸合成酶二氢叶酸还原酶二氢叶酸四氢叶酸2.非竞争性抑制（non-
22、competitive inhibition）某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。E +SESE +P+IEI +S+IIES在可逆的非竞争性抑制作用中：抑制剂结合在活性中心以外；抑制剂的结合阻断了反应的发生。非竞争性抑制作用的动力学特点是非竞争性抑制作用的动力学特点是 Vmax变小，而变小，而 Km不变。不变。非竞争性抑制的特点：1、I与S分子结构不同；2、Vmax 减小，Km不变；3、抑制程度
23、取决于I大小。4、这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除SHSE+Hg2+EHg +2H+SHSH ClSSE +As-CH=CHClEAs-CH=CHCl +2HClSSH Cl巯基酶路易士气(二)不可逆抑制（irreversible inhibition）抑制剂与酶的必需基团以牢固的共价键结合,不能用透析超滤等物理方法除去抑制剂使酶恢复活性。例例1 1：巯基酶的抑制巯基酶的抑制EHg+SSCOONaCHSHCHSHCOONaSHCHSE +HgCHSSHCOONaCOONa二巯基丁二酸钠SCH2OHSHCH2OHE +CHS As-CH=CHClSH CH2SE As-CH=CHCl+
24、CHSHS CH2SH二巯基丙醇解毒方法：可使-OH磷酯化，所以它是活性中心有Ser残基的酶的抑制剂。常见的有机磷农药，如敌敌畏、敌百虫，它们杀灭昆虫的机理就在于可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，该酶的作用是将神经递质乙酰胆碱水解，若它被抑制，会导致乙酰胆碱的积累，使神经过度兴奋，引起昆虫的神经系统功能失调而中毒致死。例2：羟基酶的抑制金属离子：Mg 2+、K+、Mn2+阴离子：有机物：Cl-胆汁酸盐2、分类：必需激活剂非必需激活剂Mg 2+对己糖激酶Cl-对淀粉酶5.酶促反应的动力学5.6 激活剂对酶促反应速度的影响1、激活剂:凡能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。如：6.酶活性的调节主要
25、调节方式:酶活性的调节变构调节共价修饰调节酶含量的调节6.1 变构调节概念：变构调节：生物体内一些代谢物可与酶分子的调节部位进行非共价可逆性结合，改变酶分子构象，从而改变酶的活性。变构酶：受变构调节的酶。变构剂：导致变构效应的代谢物。催化部位：调节部位：The three-dimensional subunit architecture of the regulatory enzymeaspartatetranscarbamoylase;two different views.This allosteric regulatory enzyme has twocatalytic clusters
26、,each with three catalytic polypeptide chains,and three regulatoryclusters,each with two regulatory polypeptide chains.The catalytic polypeptides ineach cluster are shown in shades of blue and purple.Binding sites forallostericmodulators are found on the regulatory subunits(shown in white and red).M
27、odulator binding produces large changes in enzyme conformation and activity.变构酶模型米氏双曲线与 S形变构曲线6.酶活性的调节0.110.11ATP、柠檬酸（）AMP、ADP2,6-二磷酸果糖1,6-二磷酸果糖(+)6-磷酸果糖激酶-1的变构调节生理意义：变构酶有特征性的S形动力学曲线。变构剂或底物浓度，在一定的范围里，一个比较小的变化就会导致反应速度显著的改变，因此更具可调节性。变构酶通常是关键酶，催化代谢途径中的非平衡反应，或称不可逆反应。这些酶一般处在途径的开始阶段或分支点上，通过反馈控制来调节。6.酶活性的调
28、节6.2 共价修饰调节酶的共价修饰调节：概念：酶蛋白分子上的某些氨基酸残基的基团，在另一组酶的催化下发生可逆的共价修饰，从而改变酶的活性。常见修饰方式：磷酸化和去磷酸化EATPADPPH2O蛋白激酶磷蛋白磷酸酶肌肉中磷酸化酶的磷酸化和去磷酸化过程：E磷酸化酶-bP磷酸化酶-a无活性无活性有活性有活性7.酶的命名与分类7.1 酶的命名(1)习惯命名：由发现者命名，常以底物名、反习惯命名：由发现者命名，常以底物名、反应性质以及酶的来源命名；应性质以及酶的来源命名；(2)系统命名（系统命名（1961年国际酶学委员会年国际酶学委员会确定）确定）每一个酶由下列三种表示：每一个酶由下列三种表示：1、系统名
29、称：底物名、系统名称：底物名+反应性质反应性质2、分类编号、分类编号：E.C.+四个数字四个数字3、推荐名：选一个习惯名（实用、简单）、推荐名：选一个习惯名（实用、简单）1961年酶学委员会（年酶学委员会（Enzyme Commission，EC）规定酶的表示法：规定酶的表示法：EC.X.X.X.X例如：例如：乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶7.2 酶的分类酶的分类氧化还原酶氧化还原酶AH2+BA+BH2 转移酶转移酶 水解酶水解酶 裂解酶裂解酶 异构酶异构酶 合成酶合成酶Ax+CAB+H2OAAA+BA+CxAH+BOHB+CBC，需要需要ATPP OHOOHN 3 2 N HVB1，硫，硫胺素经胺素经
30、焦磷酸化转变为焦磷酸化转变为TPP，焦磷酸硫，焦磷酸硫胺素胺素。它是酮酸。它是酮酸脱氢酶的辅酶。脱氢酶的辅酶。以以VB2，核黄素为基础形成两种辅基，核黄素为基础形成两种辅基FMN黄素单核苷酸黄素单核苷酸 和和FAD黄素黄素 腺嘌呤腺嘌呤二核苷酸二核苷酸。作用是传递氢和电子。作用是传递氢和电子。SC H3NC H3NOOHHOOP硫胺素焦磷酸硫胺素TPPN+H H 2N87965N14ON10OHOHNOHN5OHNONNNNNH 2OOHOHP OOO-O P OOO-FMNFADH10R2e-+2H+O N2 e-+2H+NNNNH2NOOHOHOO P O P OOHOOOH OHNNH
31、2OHOHO P OONAD+NADP+尼尼克酸，烟酸（维生素克酸，烟酸（维生素 Vpp）NAD+/NADH，烟酰胺腺嘌，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸呤二核苷酸 （氧化（氧化/还原）还原）NADP+/NADPH，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸磷酸（氧化（氧化/还原）。烟酰胺衍生物还原）。烟酰胺衍生物 ，传递氢和电子，传递氢和电子，氧化还原酶的辅酶。氧化还原酶的辅酶。NNH2ORHH2e-+H+2e-+H+O OH泛酸（维生素泛酸（维生素 B3）是是CoA（辅酶辅酶A）的组成成分。的组成成分。CoA是脂酰基的载体是脂酰基的载体。吡哆醛和吡哆胺（吡哆素），吡哆醛和吡哆胺（吡哆素），维生素维
32、生素B6。磷酸吡哆醛磷酸吡哆醛 是氨是氨基酸转氨酶、脱羧基酸转氨酶、脱羧酶等的辅酶。酶等的辅酶。NOHOHH2NOO P OOH磷酸吡哆醛OO P O NOH磷酸吡哆胺ONNNOOOHO POHOHNHNOSHOHNOHHO P OOO P O巯基乙胺泛酸3-磷酸腺苷酸NH 2叶酸，其还原衍生物叶酸，其还原衍生物 四氢叶酸四氢叶酸是一碳基团转移酶的辅酶。是一碳基团转移酶的辅酶。一碳基团，如甲基、乙烯基、一碳基团，如甲基、乙烯基、甲酰基等甲酰基等。OHNHOHNSOOHNHONSOHO生物素羧 基生物素HOOHNO10HN965H2 N1N2HN3NO847NOHO2-氨基-4羟基-6甲基蝶呤对
33、氨基苯甲酸谷氨酸蝶酸叶酸（蝶酰谷氨酸）生物素生物素，维生素，维生素H。噻吩和脲缩组成，噻吩和脲缩组成，CO2 的载体，的载体，羧化酶的辅酶，且羧化酶的辅酶，且有戊酸侧链有戊酸侧链 。ONN Co N硫辛酸硫辛酸，含硫脂肪酸，有氧化，含硫脂肪酸，有氧化和还原两种形式，既可以和还原两种形式，既可以传递氢和电子，又能转移传递氢和电子，又能转移脂酰基。脂酰基。NH2 NONH 2N H2ON H2 OHH 2 NOO维生素维生素B12中心钴原中心钴原子结合子结合 5-脱氧腺苷基称脱氧腺苷基称 辅酶辅酶B12，为一些变位酶和转甲基酶的辅酶。为一些变位酶和转甲基酶的辅酶。ROO-ONNNHHOOPONH
34、2OHHHOHOH氰钴胺酸：R=-CN羟钴胺酸：R=-OH甲钴胺酸：R=-CH 35-脱氧腺苷 钴胺酸：R=5-脱氧腺 苷3+课堂提问1.Isoenzyme2.酶促反应中决定酶的专一性的是（）A.酶蛋白B.辅酶C.辅基D.活性中心以外的必需基团3.全酶由（）和（）组成。4.酶的活性中心包括（）和（）两个功能部位。5.辅酶与辅基的区别在于前者与酶蛋白（），后者与酶蛋白（）。2、米米-曼氏方曼氏方程成立条件：程成立条件：初速度为标准初速度为标准 单底物单底物 稳态（稳态（steady state）3、推导、推导方程方程:游离酶浓度游离酶浓度=E-ESES生成速度生成速度=k1（E-ES）SES分解速度分解速度=k2ES+k3ES当稳态时：当稳态时：ES生成速度生成速度=ES分解速度分解速度k1（E-ES）S=k2ES+k3ESk2+k3k 1因因v=k3ES,当所有当所有E被被S饱和时，即达到最大速饱和时，即达到最大速度，此时度，此时ES=E，Vmax=k3 E代入上式：代入上式：=Km（E-ES）SESES ES=Km+Sv=k3ESKm+SVmax SKm+S=