《实验实训指导书》(药理学).docx
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1、试验一药理学试验根本学问和技术试验目的:1、把握根本操作,熬炼动手、动脑力气;2、更好地把握药理学根本理论学问;3、培育科学思维。试验内容:一、药理试验的根本目的与要求二、试验动物:1、动物的选择;2、动物的标记与捉拿、固定方法;3、动物的取血方法尾尖、眼眶静脉丛、摘眼球、断头;4、动物的给药方法灌胃、腹腔、皮下、尾静脉;5、动物的麻醉方法;6、动物的处死方法。三、试验设计根本原则。试验步骤:一、药理学试验的根本目的与要求药理学试验课在药理学教学中占有格外重要的地位。药理学试验课的目的在于通过试验验证药理学的根本理论,加深理解与把握药理学的根本学问和规律;也是了解获得药 理学学问的科学途径。同
2、时,培育学生独立思考,独立工作,科学思维的力气;培育学生动手操作、分析问题和解决问题的力气;还应培育学生对科学工作的严峻的态度、严格的要求、 严密的工作方法及实事求是的工作作风。为了到达上述目的,要求做到以下事项:1. 试验前:预习试验内容并复习相关理论学问;2. 试验时:(1) 试验分小组进展,试验前分工明确,试验时亲热协作;(2) 确定试验仪器、药品、动物与试验指导相符时,将试验器材妥当安排,正确装置、保管;(3) 试验操作按步骤进展,认真观看试验中消灭的现象,实事求是地做好记录;(4) 留意疼惜动物、节约试验药品;(5) 试验过程中保持 试验室安静、清洁。3. 试验后: 各组同学将试验动
3、物处死,试验台擦干净,将试验方盘送回预备室; 值日生搞好试验室卫生,将死亡动物送至指定场所; 整理试验结果,经分析思考作出结论,按要求写出试验报告,按时交给指导教师。试验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料:试验动物,器材,药品5. 方法:用自己的语言简洁扼要描述出来;6. 结果:要求真实、清楚;7. 争论:将试验结果进展比较、分析;试验中有哪些缺乏之处;结果特别或失败的缘由;8. 结论:将试验结果进展归纳总结,应带有提示性质。二、试验动物1、动物的选择:药理学试验中常用的动物有青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫、狗、猴等。动物对药物的反响具有种属差异性,可依据试验目的和要求
4、选用不同的试验动物。例如:1 小白鼠:适用于需大量动物的试验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。也较适用于避孕药试验、抗炎镇痛药试验、中枢神经系统药试验、抗肿瘤药及抗年轻药试验等。(2) 大白鼠:比较适用于抗炎药物试验,血压测定、利胆、利尿药试验,也可用于进展亚急性和慢性毒性试验。(3) 豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的试验。也常用于离体心脏、心房、肠管试验。又因它对结核敏感,常用于抗结核病药的试验。(4) 家兔:常用于观看争论脑电生理作用,药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感, 也常用于体温试验,用于热原检查。(5) 狗:狗是记录血压,呼吸最常用
5、的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观看药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进展慢性毒性试验时,也常承受狗。(6) 猴 是接近于人类的高级动物。神经系统比较兴盛,常用于观看药物对行为的影响。猕猴的月经周期和人一样,是争论生殖课题的首选动物。另外,药临床前毒性评价,也需 要使用猴。2、动物的标记与捉拿、固定方法1动物的标记狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠和家兔多用染色法,一般用 1的苦味酸溶液黄色或 5中性红溶液红色涂于动物体表不同部位的皮毛处,代表不同号码。编号原则是先左后右,自前到后。2动物捉拿、固定方法小白鼠右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上,用左手拇指及食指沿
6、其背部向前抓起颈背部皮肤,并以左手的小指、无名指固定其尾部,便可将小鼠固定在手上。大白鼠用右手提起尾部,放在粗糙面上,左手的拇指和食指捉其头部,其余三指夹住背腹部即可固定。 豚鼠豚鼠性情温存不咬人,用手握住躯干即可。家兔可用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提起,另一手托其臀部,使兔呈坐位姿势。在进展仰位手术操作时,可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。3、动物的取血方法(1) 小鼠和大鼠颈静脉或颈动脉取血:麻醉动物,背部固定,颈部去毛,碘酒消毒,切开皮肤,分别 出动脉或静脉,将注射针平行刺入血管,渐渐回抽针栓即可取血。动脉取血时,亦可将远心 端结扎,用动脉夹夹住近心端,在动脉
7、中心剪一小口,插入聚乙烯管,然后放开动脉夹,血液可自动流出。兔和豚鼠也常用此方法取血,手术操作与大鼠相像。尾尖取血:将鼠固定在铁丝笼或特别筒内,使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾小鼠1mm 2mm;大鼠 5mm10mm,用拇指和食指由尾根向尾尖按捏,血液即从尾尖流出。小鼠每次可采血 0.1ml,大鼠每次可采血0.5ml。留意:只剪去尾尖,如剪去过多组织,反而流血少。下次取血时,只需将尾尖血痂剪掉即可。眼球取血:左手持鼠,使眼球突出,并使头向下。右手持弯曲镊,钳夹一侧眼球根部, 将眼球摘除。血液即可从断裂的眼眶动物、静脉涌出,血量约为鼠体重的45,适用 于一次性取血。眼眶后静脉丛取血:固定鼠头部皮肤,轻轻
8、向后压迫颈部两侧,使头部静脉回流受阻, 眼球充格外突,用内径 11.5mm 的毛细血管 刺入下眼睑与眼球之间,轻轻向眼底部方向移动,血即可流入玻璃管内,一般两眼可各取一次。断头取血:用剪子剪断鼠头,马上将鼠颈部向下,提起动物,并对准已预备好的容器, 可接取所需血液。小鼠可取血约 1ml,大鼠可取血约 8ml。(2) 家兔心脏取血:将家兔背位固定,在胸骨左缘 3mm,第 34 肋间隙,触及心跳最明显部位, 以 8 号针头刺入,即可有血流入注射器内,亦可抽取,如没刺入心脏,确定要将针提到 皮下转变方向,再重刺入。耳缘静脉取血:将耳根部压紧,拔去耳缘毛,用酒精涂擦使血管扩张明显,以67 号针头,针尖
9、向离心方向刺入,缓慢抽取血液。股动脉、静脉取血:将家兔麻醉、背位固定,手术分别出股动脉或静脉,插入套管即可依据需要量取血。4、动物的给药方法1小鼠、大鼠灌胃法(i.g.):以左手固定鼠后,使其腹部朝上,颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,再从舌面沿上腭进入食道。腹腔注射(i.p.):以左手固定鼠,方法同灌胃,右手持注射器,取 30 度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高,刺入不宜太深,以免伤及内脏。皮下注射(s.c.):用左手固定鼠后,右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。静脉注射(i.v.):将鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下,让其尾部露出。用酒精或
10、二甲苯涂擦尾部,或将鼠尾在 50热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端,右手持注射器将针头刺入尾静脉,推入药液。2家兔灌胃:需两人合作进展。一人取坐位用两腿夹持兔身,左手握家兔双耳,右手抓住两前 肢。另一人将木制开口器横插家兔口内,压住舌头并固定之。取 8 号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会消灭动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水 中,如有气泡吹出,表示插在气管内,此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后,用注射器接通导尿管将药液推入。 皮下、腹腔注射:给药方法根本上同小鼠,唯针头可稍大,给药量可稍多。皮下与肌内为 0.51.0/mg,腹腔为 1.05.0ml/mg
11、。静脉注射:将家兔置固定箱内,拨去耳壳外缘的毛,选择一条比较明显的耳缘静脉,用酒精棉球涂擦皮肤,使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部,食指垫在兔耳注射处的下面,右手持注射器,将针头从近耳尖处刺入,当确认针头在血管中后,将药液推入。 5、动物的麻醉方法(1) 局部麻醉:常承受 2普鲁卡因做皮下浸润注射,可用于局部手术。(2) 全身麻醉:吸入麻醉:可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内,利用乙醚挥发的性质,经肺泡吸取,作用较快,适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。注射麻醉:常用戌巴比妥钠和乌拉坦。留意事项:配制注射用麻醉剂,一般用蒸馏水,也可用生理盐水。静脉麻醉时,剂量要准确、浓度要适中,注射速度要缓慢,均
12、匀。冬季作试验时,应将药液加温到动物体温水平。亲热观看动物眼睑,角膜及趾反射,避开麻醉过深引起动死亡。一旦麻醉过量,尽早实行人工呼吸等措施。6、动物的处死方法(1) 小鼠和大鼠常承受颈椎脱臼法,即用左手拇指和食指将其头部紧按在硬的物体上,右手捏住鼠尾, 用力向后牵拉,使颈椎脱位,鼠可瞬间死亡。大鼠也常用断头法处死。(2) 家兔空气栓塞法:用 50100ml 注射器,往静脉内快速注入空气,动物因血管气栓致死。家兔注射空气量为 1020ml。三、试验设计根本原则1、随机原则使每一试验对象都有同等的时机抽到试验组或比照组中,除处理因素外其他因素尽可能均衡全都,从而抵消非试验因素的影响。2、 比照原则
13、(1) 组间比照:指在试验中设立假设干平行组,如空白比照等量的生理盐水和标准品比照等量典型药物。试验时留意试验组和比照组例数相等。(2) 自身前后比照:指在同一个体观看给药前后某些指标的变化,或者两种药物一前一后的穿插比较,这样既可削减个体差异,还节约了动物尤其是大动物,两种药物穿插比较时,间隔时间应参考药物的半衰期。3、重复原则即试验过程需屡次重复进展。它包含二个含义,即重复数和重现性。重复数即动物的个数, 统计学上叫“样本数”;重现性即在动物、药品、器材及环境因素等一样条件下,试验结果牢靠稳定地重复出来。试验提示:学生通过本次试验学习要求生疏、把握药理学试验中动物的选择、标记、捉拿、固定以
14、及常用取血、给药、麻醉、处死的方法。为后续的试验操作打下良好的根底。试验思考:如何设计试验可以削减试验误差。试验二不同给药途径对药物作用的影响试验目的:观看不同给药途径对硫酸镁作用的影响。 试验内容: 试验器材、药品和动物的预备器材:鼠笼、天平、lml 注射器、小鼠灌胃针头。药品:15%硫酸镁含水溶液。动物:小白鼠 2 只,体重 1822g,雌雄不拘。试验步骤:取小鼠 2 只,分别称重并标记。一只小鼠腹腔注射15%硫酸镁溶 0.1ml/l0g; 另一只小鼠用同样剂量的硫酸镁灌胃。分别将小鼠置小笼中,观看其在15 分钟内表现有何区分。将结果填入下表:不同给药途径对硫酸镁作用的影响鼠号 体重g 药
15、量ml/10g 给药途径给药前表现给药后表现【留意事项】1、把握正确的灌胃操作技术,不要误插气管或插破食管,前者可致窒息,后者可消灭如同腹腔注射时的吸取病症,重则死亡。2、注射后作用发生较快,需留心观看。试验提示:不同给药途径,吸取速度有差异,药物反响程度亦有差异。通过本试验使学生验证理论学问。试验思考:给药途径不同时,药物的作用为什么有的会消灭质的差异?试验三药物剂量对药物作用的影响试验目的:观看不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。试验内容: 试验器材、药品和动物的预备器材:鼠笼、粗天平、lml 注射器、小鼠灌胃针头。药品:0.1%、0.2%、0.4%戊巴比妥钠溶液。动物:小白鼠 3 只,体
16、重 1822g,雌雄不拘。试验步骤:取小鼠 3 只编号并以苦味酸溶液涂毛作不同记号。分别称其体重及观看小鼠正常活动状况。各鼠经腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠溶液0.2m1/l0 g,分别置于小笼中,亲热留意先后消灭的反响。将试验结果记录于下表:不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异鼠号体重g 剂量ml/10g 埋伏期给药前表现给药后表现123【留意事项】1、小鼠对戊巴比妥钠可能消灭的反响,按由轻到重程度有:活动增加、呼吸抑制、翻正反射减弱、消逝、反射亢进、麻醉、死亡等。2、比较各鼠所消灭反响的严峻程度和发生快慢。试验提示:同一药物给药剂量不同,药物反响程度亦有差异。通过本试验使学生验证理论学问和培育
17、学生观看力气。试验思考:了解药物的剂量和作用的关系对于进展药理试验和临床用药有何重要意义?试验四 苯巴比妥钠的抗惊厥作用试验目的:学习动物惊厥模型的复制方法;观看大剂量尼可刹米的中毒反响;把握苯巴比妥钠的抗惊厥作用。试验内容: 试验器材、药品和动物的预备器材:鼠笼、粗天平、lml 注射器 3 支、小鼠灌胃针头、大烧杯。药品:2.5%尼可刹米,0.5%苯巴比妥钠,生理盐水。动物:小白鼠 4 只,体重 1822g,雌雄不拘。试验步骤:1. 取体重相近的小白鼠 4 只,称重,编号,随机分组,分为试验组和比照组。2. 试验组小鼠腹腔注射 0.5苯巴比妥钠 0.5mg/10g(0.1ml/10g);比照
18、组腹腔注射等体积生理盐水。3.15min 后试验组和比照组分别腹腔注射 2.5%尼可刹米溶液 0.20.3ml/10g,连续观看 20min,具体记录两组小鼠的反响状况。4.观看用药后小鼠的反响:有无兴奋、惊厥以后脚伸直为惊厥指标和死亡。将试验结果填入下表:鼠号体重药物剂量给药途径中毒量尼可刹米反响gml兴奋惊厥死亡1 号2 号3 号4 号苯巴比妥钠苯巴比妥钠生理盐水生理盐水ip ip ipip【留意事项】l.留意观看小鼠给药后的反响,如消灭竖尾、洗脸、猛烈地奔驰、撞笼、跳动等反响即为惊厥前兆。2. 腹腔注射部位要准确,否则会影响试验结果。3. 给药后应保持室内安静,避开刺激试验动物。试验提示
19、: 尼可刹米为常用的呼吸中枢兴奋药。主要作用是直接兴奋延脑呼吸中枢,对大脑皮层、血管运动中枢和脊髓也有兴奋作用。过大剂量可引起惊厥,继而发生中枢抑制而死亡。苯巴比妥钠是一种普遍性中枢抑制药,具有良好的抗惊厥作用。通过本试验使学生验证理论 学问、培育学生观看和对试验根本机能的把握程度。试验思考:简述苯巴比妥钠的药理作用及临床应用。试验五 镇痛试验一热板法试验目的:学习镇痛的试验方法,把握吗啡或哌替啶的镇痛作用。试验内容: 试验器材、药品和动物的预备器材:智能热板仪,小动物电子秤,玻璃罩,小鼠鼠笼,lml 注射器,秒表 。药品:0.1%盐酸吗啡,生理盐水 。动物:雌性小鼠,1822g。试验步骤:1
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