《(32)--10-基因工程制药实例-胰岛素生物技术制药.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《(32)--10-基因工程制药实例-胰岛素生物技术制药.ppt（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、基因工程制药实例-胰岛素 学习目标理解胰岛素相关结构知识掌握利用基因工程制药得到临床胰岛素的方法胰岛素相关知识n 胰岛素：胰脏内的胰岛 细胞受内源性或外源性物质的刺激而分泌的一种蛋白质激素l 广泛调节细胞代谢l 促进细胞生长与分化l 调节血糖稳定1921 年，胰岛素首次分离1923 年，世界上第一支动物胰岛素上市1955 年，胰岛素氨基酸残基序列首次被报道1965 年，中国成功合成了牛胰岛素1979 年，胰岛素基因被成功克隆1982 年，第一支重组人胰岛素上市成熟胰岛素结构胰岛素过去生产情况猪 牛胰腺n 胰岛素过去只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100K g胰腺只能提取4-5g 的胰岛素(
2、0.004%)。n 目前重组人胰岛素的生产中应用的主要有两种宿主表达系统l 大肠杆菌表达系统l 酵母表达系统胰岛素过去生产情况大肠杆菌表达系统胰岛素分子加工成熟过程n 大肠杆菌表达系统优点l 表达量高，一般表达产物可以达到大肠杆菌总蛋白的20%30%l 表达产物为不溶解的包含体，经洗涤后表达产物的纯度可以达到90%，易于分离纯化n 大肠杆菌表达系统缺点l 表达出的胰岛素无生物活性，需要复性才能显示其生物活性酵母表达系统n 酵母表达系统优点l 表达产物的二硫键结构位置都是正确的l 不需要复性加工处理，表达产物本身具有活性n 酵母表达系统缺点l 表达量低l 发酵时间长信号肽 前肽序列 KR B 链 连接短肽 A 链引导序列与胰岛素前体嵌合蛋白分子结构连接短肽替换基因重组技术表达胰岛素过程分离纯化及质量控制胰岛素原融合蛋白 无序胰岛素原HBr 裂解胰岛素原纯品纯化胰岛素粗品酶切微小胰岛素原溶液微小胰岛素原羧肽酶、胰酶超滤、离子交换吸附、沉淀等纯化酶切活性胰岛素离子交换层析、分子筛层析、反相层析、结晶大肠杆菌表达酵母菌表达人工合成胰岛素感谢聆听