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1、 蛋白质测定操作方法蛋白质测定操作方法 样品样品消化消化 蒸馏和蒸馏和吸收吸收 滴定滴定一、实验材料（样品消化）一、实验材料（样品消化）试剂：硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸试剂：硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸（1）样品消化样品1g+0.4g硫酸铜+6g硫酸钾+20ml浓硫酸+玻珠数粒先小火炭化，无泡沫后，加大火力，液体变蓝绿透明，继续加热微沸30分钟45度角消化终点瓶口不能对着人盖上小漏斗YOUR SITE HERE 在消化过程中，浓既可使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮；又能将有机物炭化后的碳转化为二氧化碳，而硫酸则被还原成二氧化硫，二氧化硫使氮还原为氨，本身则被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸作用生成硫酸铵留在
2、酸性溶液中 而而氨氨则与则与硫酸硫酸结合成结合成硫酸铵，留硫酸铵，留在溶液中。在溶液中。2NH2(CH2)2COOH+13（浓）（浓）H2SO4 消消 化化 原原 理理(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2OYOUR SITE HERE消化过程中各种试剂发生的反应 A:A:使有机物炭化，生成碳，碳将使有机物炭化，生成碳，碳将H H2 2SOSO4 4还原为还原为SOSO2 2 B B：强氧化剂：强氧化剂 C C：蛋白质与浓：蛋白质与浓H H2 2SOSO4 4生成生成NHNH3 3，COCO2 2，SOSO2 2，H H2 2O O D D：NHNH3 3与与H H2 2SOSO4
3、 4生成硫酸铵生成硫酸铵YOUR SITE HERE硫酸钾硫酸钾作用：作用：提高溶液的沸点提高溶液的沸点，3403400 0C C提高到提高到4004000 0C C，加加快快有有机物分解机物分解。K2SO4+H2SO4=2KHSO4 2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3原因原因:随着消化过程中硫酸不断地被分解随着消化过程中硫酸不断地被分解 ，水，水分不断逸出而使硫酸钾浓度增大分不断逸出而使硫酸钾浓度增大 ，故，故溶液溶液沸点沸点升高升高。但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系温但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系温度过高，又会引起已生成的铵盐发生热分解而造度过高，又会引起已生成的铵盐发生热
4、分解而造成损失：成损失：NHNH4 4）2 2SOSO4 4=NH=NH3 3+(NH+(NH4 4)HSO)HSO4 4 2(NH 2(NH4 4)HSO)HSO4 4=2NH=2NH3 3+2SO+2SO3 3+2H+2H2 2O O除除硫硫酸酸钾钾外外也也可可加加入入硫硫酸酸钠钠，氯氯化化钾钾等等盐盐类类来提高沸点，来提高沸点，但效果不如硫酸钾但效果不如硫酸钾YOUR SITE HERE硫酸硫酸铜的作用：铜的作用：C 2CuSO4 Cu2SO4 SO2 CO2 CuSO4 2H2SO4 2CuSO4 2H2O SO2 A:A:催化剂，加速催化剂，加速氧化分解氧化分解 B:B:指指示示消消化化终终点点：待待有有机机物物全全部部被被消消化化完完后后，这这时时溶溶液液具具有有清清澈澈的的蓝蓝绿绿色色（如如果果还还有有硫硫酸酸亚亚铜铜存存在在，溶溶液液将将是是褐褐色的。）色的。）操作注意事项操作注意事项1.确保凯氏烧瓶的干燥确保凯氏烧瓶的干燥2.注意硫酸的正确使用注意硫酸的正确使用3.在消化过程中不定时观察消化瓶中的变化，在消化过程中不定时观察消化瓶中的变化，调节火候，防止反映过于剧烈，氨气随大量气调节火候，防止反映过于剧烈，氨气随大量气体散出而造成损失。体散出而造成损失。感谢您的聆听！