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1、目录第章第二早第三早第 四 章第 五 章第 六 章第 七早第 八早第 九茕第 十第H 章第十二章第十三章第十四章第十五章第十六章第十七章第十八章第十九章参考文献蛋白质酶与辅酶核酸激素维生素糖代谢脂类代谢生物氧化与氧化磷酸化氨基酸代谢核甘酸代谢物质代谢的联系与调节DNA的生物合成RNA的生物合成蛋白质的生物合成基因表达调控基因重组与基因工程糖蛋白、蛋白聚糖和细胞外基质基因与生长因子基因诊断与基因治疗第 一 章 蛋 白 质一、单选题1.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的p l分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.30 电泳时欲使其中4 种泳向正极，缓冲液的pH应该是（D）A.5.0 B.4.0
2、C.6.0 D.7.0 E.8.02.下 列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是（B）A.血清清蛋白（分子量68 500）B.马肝过氧化物酶（分子量247 500）C.肌红蛋白（分子量16900）D.牛胰岛素（分子量5 700）E.牛6 乳球蛋白（分子量35000）3.蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是（D）A.肽键B.半胱氨酸的-SH基C.苯丙氨酸的苯环D.色氨酸的口那朵环E.组氨酸的咪哇环4.含芳香环的氨基酸是（B）A.Lys B.Tyr C.Vai D.He E.Asp5.下列各类氨基酸中不含必需氨基酸的是（A）A.酸性氨基酸 B.含硫氨基酸 C.支链氨基酸D.芳香族氨基酸
3、 E.碱性氨基6.变性蛋白质的特点是（B）A.黏度下降 B.丧失原有的生物活性C.颜色反应减弱D.溶解度增加 E.不易被胃蛋白酶水解7.蛋白质变性是由于（B）A.蛋白质一级结构改变 B.蛋白质空间构象的改变C.辅基的脱落D.蛋白质水解E.以上都不是8.以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子（A）A.甘 氨 酸B.丝 氨 酸C.半胱氨酸 D.苏 氨 酸E.丙氨酸9.下列有关蛋白质B折叠结构的叙述正确的是（E）A.B折叠结构为二级结构B.肽单元折叠成锯齿状C.B折叠结构的肽链较伸展D.若干肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系E.以上都正确10.可用于蛋白质定量的测定方法有（B）A.盐析法 B.紫外
4、吸收法 C.层析法 D.透析法 E.以上都可以11.镰状红细胞贫血病患者未发生改变的是（E）A.H b的一级结构 B.H b的基因 C.Hb的空间结构D.红细胞形态 E.H b的辅基结构12.维系蛋白质一级结构的化学键是（B）A.氢 键B.肽 键C.盐 键D.疏 水 键E.范德华力13.天然蛋白质中不存在的氨基酸是（B）A.半 胱 氨 酸B.瓜 氨 酸C.羟脯氨酸 D.蛋 氨 酸E.丝氨酸14.蛋白质多肽链书写方向是（D）A.从3，端 到5,端 B.从5,端 到3，端 C.从C端 到N端D.从N端 到C端 E.以上都不是15.血浆蛋白质的p l大多为pH56,它们在血液中的主要存在形式是（B）
5、A.兼 性 离 子B.带负电荷 C.带正电荷 D.非极性分子 E.疏水分子16.蛋白质分子中的a螺旋和B片 层 都 属 于（B）A.一级结构 B.二级结构 C.三级结构 D.域结构 E.四级结构17.a螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是（B）A.4.5 B.3.6 C.3.0 D.2.7 E.2.518.下列含有两个竣基的氨基酸是（E）A.缀氨酸 B.色氨酸 C.赖氨酸 D.甘氨酸 E.谷氨酸19.组成蛋白质的基本单位是（A）A.L-a-氨基酸 B.D-a-氨基酸 C.L,B -氨基酸D.L,D-a氨基酸 E.D-B-氨基酸20.维持蛋白质二级结构的主要化学键是（D）A.疏 水 键B.盐键
6、 C.肽 键 D.氢 键E.二硫键21.蛋白质分子的B转角属于蛋白质的（B）A.一级 结 构B.二级结构 C.结构域 D.三级 结 构E.四级结构22.关于蛋白质分子三级结构的描述错误的是（A）A.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性B.天然蛋白质分子均有这种结构C.三级结构的稳定性主要由次级键维系D.亲水基团多聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列23.有关血红蛋白（Hb）和肌红蛋白（Mb）的叙述不正确的是（D）A.都可以与氧结合 B.Hb 和 Mb 都含铁C.都是含辅基的结合蛋白 D.都具有四级结构形式E.都属于色蛋白类24.具有四级结构的蛋白质特征是（E）A.分子中必定含
7、有辅基B.四级结构在三级结构的基础上，多肽链进一步折叠、盘曲形成C.依赖肽键维系四级结构的稳定性D.每条多肽链都具有独立的生物学活性E.由两条或两条以上的多肽链组成25.关于蛋白质的四级结构正确的是（E）A.一定有多个不同的亚基B.定有多个相同的亚基C.一定有种类相同，而数目不同的亚基数D.一定有种类不同，而数目相同的亚基E.亚基的种类，数目都不一定相同26.蛋白质的一级结构及高级结构决定于（C）A.亚基 B.分子中盐键 C.氨基酸组成和顺序D.分子内部疏水键 E.分子中氢27.蛋白质形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定（E）A.溶液pH大于pl B.溶液pH小于plC.溶液PH等于pl D
8、.在水溶液中E.溶液pH等于7.428.蛋白质的等电点是（E）A.蛋白质溶液的pH等于7时溶液的pHB.蛋白质溶液的PH等于7.4时溶液的pHC.蛋白质分子呈负离子状态时溶液的pHD.蛋白质分子呈正离子状态时溶液的pHE.蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的pH29.蛋白质溶液的主要稳定因素是（C）A.蛋白质溶液的黏度大B.蛋白质在溶液中有“布朗运动”C.蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷D.蛋白质溶液有分子扩散现象E.蛋白质分子带有电荷30.蛋白质分子中存在的含筑基氨基酸是（C）A.亮 氨 酸 B.胱 氨 酸 C.蛋 氨 酸 D.半 胱 氨 酸 E.苏氨酸31.维持血浆胶体渗透压的主要蛋白质是
9、（A）A.清 蛋 白 B.5球 蛋 白 C.B球蛋白 D.Y球 蛋 白 E.纤维蛋白原3 2.血清在饱和硫酸筱状态下析出的蛋白质是（D）A.纤维蛋白原B.球 蛋 白 C.拟 球 蛋 白 D.清蛋白 E.B球蛋白3 3.胰岛素分子A 链与B 链交联是靠（D）A.疏水键 B.盐键 C.氢键 D.二硫键 E.范德华力34.蛋白质中含量恒定的元素是（A）A.N B.C C.O D.H E.Fe35.下列哪项与蛋白质的变性无关？（A）A.肽键断裂 B.氢键被破坏C.离子键被破坏 D.疏水键被破坏36.氨基酸在等电点时具有的特点是：（E）A.不带正电荷 B.不带负电荷C.A 和B D.溶解度最大E.在电场
10、中不泳动37.在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？（D）A.凯氏定氮法 B.双缩尿反应 C.紫外吸收法 D.玮三酮法二、多选题1.关于蛋白质的组成正确的有（ABCD）A.由C,H,O,N 等多种元素组成 B.含氮量约为16%C.可水解成肽或氨基酸 D.由a-氨基酸组成 E.含磷量约为10%2.蛋白质在280nm波长处的最大光吸收是由下列哪些结构引起的（BC）A.半胱氨酸的疏基 B.酪氨酸的酚基C.色氨酸的叫口朵基D.组氨酸的异毗隆基E.精氨酸的胭基3.关于蛋白质中的肽键哪些叙述是正确的（ABC）A.比一般CN 单键短B.具有部分双键性质C.与肽键相连的氢原子和氧原子呈反式结构D.
11、肽键可自由旋转E.比一般CN 单键长4.谷胱甘肽（BCE）A.是一种低分子量蛋白质 B.在氨基酸吸收过程中起作用C.可进行氧化还原反应 D.由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成E.其还原型有活性5.蛋白质的a 螺旋结构（ACD）A.多肽链主链骨架C=0基氧原子与N-H基氢原子形成氢键B.脯氨酸和甘氨酸对a螺旋的形成无影响C.为右手螺旋D.每 隔3.6个氨基酸残基上升一圈E.侧 链R基团出现在螺旋圈内6.关于蛋白质结构的叙述正确的有（ABCD）A.蛋白质的一级结构是空间结构的基础B.亲水氨基酸侧链伸向蛋白质分子的表面C.蛋白质的空间结构由次级键维持D.有的蛋白质有多个不同结构和功能的结构域E.所有蛋白质
12、都有一、二、三、四级结构7.关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的（BD）A.尿素引起蛋白质变性是由于特定的肽键断裂B.变性是由于二硫键和非共价键破坏引起的C.变性都是可逆的D.变性蛋白质的理化性质发生改变E.变性蛋白质的空间结构并无改变8.下 列哪些蛋白质含有铁（ABCD）A.细 胞 色 素 氧 化 酶B.肌 红 蛋 白C.血 红 蛋 白D.过 氧 化 酶E.卵清蛋白9.下列哪些方法基于蛋白质的带电性质（AC）A.电 泳B.透 析 和 超 滤C.离 子 交 换 层 析D.凝 胶 过 滤E.超速离心10.蛋白质的a螺旋结构十分牢固，但如果在多肽链中出现下列哪些情况，将会妨碍a螺旋形成？（ABC）A.
13、连续的天冬氨酸 B.连续的碱性氨基酸 C.脯氨酸D.丙氨酸 E.苏氨酸11.已知卵清蛋白pl=4.6,B乳球蛋白pl=5.2,糜蛋白酶原pl=9.1,上述蛋白质在电场中的移动情况为（BC）A.缓冲液pH为7.0时，糜蛋白酶原向阳极移动，其他两种向阴极移动B.缓冲液pH为5。时，卵清蛋白向阳极移动，其他两种向阴极移动C.缓冲液pH为9.1时，糜蛋白酶原在原地不动，其他两种向阳极移动D.缓冲液pH为5.2时，B乳球蛋白在原地不动，卵清蛋白向阴极移动，糜蛋白酶原移向阳极E.缓冲液pH为5.0时，卵清蛋白向阴极移动，其他两种向阳极移动1 2.蛋白质处于pH等于其p l的溶液时，蛋白质分子解离状态可为（
14、AB）A.蛋白质分子解离为正、负离子的趋势相等，为兼性离子B.蛋白质的净电荷为零C.具有相等量的正离子和负离子D.蛋白质分子处于不解离状态E.蛋白质分子解离带同一种电荷1 3 .组成人体蛋白质的氨基酸（AD）A.都是a-氨基酸 B.都 是 氨 基 酸C.除甘氨酸外都是D系氨基酸 D.除甘氨酸外都是L系氨基酸E.L系和D系氨基酸各半1 4 .属于蛋白质二级结构的有（A B C E）A.a螺旋 B.B折叠 C.B转角 D.亚基 E.无规卷曲1 5.含羟基的氨基酸有（A B D）A.苏 氨 酸B.丝 氨 酸C.赖氨酸 D.酪 氨 酸E.半胱氨酸三、填空题1 .组 成 蛋 白 质 的 元 素 有、o含
15、量恒定的元素是其 平 均 含 量 为。【C、H、O、N；N；1 6%2 .酸 性 氨 基 酸 基 酸 有、；碱 性 氨 基 酸 有、o含貌基的 氨 基 酸 是。【谷氨酸、天冬氨酸；精氨酸、赖氨酸、组氨酸；半胱氨酸】3 .蛋 白 质 的 二 级 结 构 形 式 有、o i -螺旋、B-折叠、（3-转角、无规卷曲】4 .维 持 蛋 白 质 空 间 构 象 的 非 共 价 键 有、。【疏水作用、盐键、氢键、V an d er W aal s力）】5.分 离 纯 化 蛋 白 质 的 方 法 有、等。【透析、超滤、盐析、有机溶剂沉淀、层析、电泳、超速离心等任填】6 .在蛋白质分子中，-个氨基酸的a碳原子
16、上的 与另一个氨基酸a碳原子上的脱 去 一 分 子 水 形 成 的 键 叫,它是蛋白质分子中的基本结构键。7 .蛋白质颗粒表面的 和 是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。【电荷层 水化膜】8.蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种 键，使天然蛋白质原有的 与 性质改变。【次级键物理化学生物学】9 .按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为_ _ _ _ _,蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为 0按照组成分分类，分子组成中仅含氨基酸的称_ 分子组成中除了蛋白质部分还分非蛋白质部分的称 其中非蛋白质部分称 o【球状蛋白质纤维状蛋白质单纯蛋白质结合蛋白质辅基】1 0
17、.蛋白质具有两性电离性质，大多数在酸性溶液中带 电荷，在碱性溶液中带电荷。当蛋白质处在某一 pH值溶液中时，它所带的正负电荷数相待，此时的蛋白质成为 该溶液的p H值称为蛋白质的一。【正 负两性离子（兼性离子）等电点】四、名词解释题1.蛋白质的等电点（i so el ectr i c p o i n t o f p r o tei n）：【蛋白质所带正负电荷相等时的溶液pH值。2.蛋白质的二级结构(secondary structure of protein)【蛋白质多肽链局部主链原子的空间排布】3.变构效应(allosteric effect)【效应剂与蛋白质结合引起蛋白质构象改变的同时蛋白
18、质功能发生改变的现象。】4.协同效应(cooperative effect)【一亚基结合配体后影响该寡聚体另一亚基与配体的结合能力。】5.蛋白质的变性作用(denaturation of protein)【在某些理化因素作用下，蛋白质的空间结构破坏，理化性质改变，生物活性丧失。】6.亚基(sub unit)【寡聚蛋白中独立具有三级结构的多肽链。】7.结构域(domain)【分子量大的蛋白中含有1到数个具有一定功能的结构紧密区。】8.模体(motif)【某些蛋白质分子中，2到3个具有二级结构的肽段在空间上互相靠近形成的特殊空间构象。有特征性氨基酸序列。】10.分子伴侣(molecular cha
19、perone)【细胞内的类促进蛋白质折叠形成天然空间构象的蛋白质。】11.辅基(prosthetic group)【结合蛋白质中与蛋白质结合紧密的非蛋白质部分。】五、问答题1.试举例说明什么是分子病。【由于基因突变，蛋白质的结构、功能发生改变导致的疾病。】2.蛋白质含氮量平均为多少？为何能用蛋白质的含氮量表示蛋白质的相对含量?如何计算？【16%。各种来源的蛋白质含氮量基本恒定。每可样品含氮克数X6.25X100=100克样品蛋白质含量(g%)3.自然界中组成蛋白质的氨基酸有多少种?如何进行分类？【20种。根据侧链的结构和性质分为4类：极性、中性氨基酸；酸性氨基酸碱性氨基酸非极性、疏水性氨基酸。
20、】4.何谓蛋白质的一级结构?简述蛋白质的一级结构测定方法。【指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。一级结构测定方法：水解纯化蛋白质，测定各种氨基酸的百分含量；测定多肽链N端 与C端的氨基酸；多肽链水解为肽段，分离纯化各肽段，用Edman降解法等测定各肽段氨基酸的排列顺序；经组合排列对比得出完整肽链氨基酸的排列顺序。】5.蛋白质的二级结构?蛋白质的二级结构主要有哪些形式?各有何结构特征？【蛋白质分子中某段肽链局部主链原子的空间排布。主要形式和特征有：a-螺 旋：多肽链盘绕形成右手螺旋，每 圈 含3.6氨基酸残基，螺距 0.54nm,相邻两圈螺旋间形成氢键且与螺旋长轴平行。杼-折叠：多肽链相对伸展，肽
21、单元折叠成锯齿状，两条以上肽链顺向或反向平行排列，通过氢键联系成片层结构。-转 角：发生在多肽链进行180度转折处，由4 个氨基酸构成，氢键维系。无规卷曲；无确定规律的肽段。】7.何谓蛋白质的三级机构?维系蛋白质三级结构的化学键有哪些？【多肽链中所有原子的空间排部。通过疏水作用、盐键、氢键、Vander Waals力维系。】六.本章要点总结：1.蛋白质的结构蛋白质是具有特定构象的大分子，为研究方便，将蛋白质结构分为四个结构水平，包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。一般将二级结构、三级结构和四级结构称为三维构象或高级结构。一级结构指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。肽键是蛋白质中氨基酸之间
22、的主要连接方式，即由一个氨基酸的a-氨基和另一个氨基酸的a-之间脱去一分子水相互连接。肽键具有部分双键的性质，所以整个肽单位是一个刚性的平面结构。在多肽链的含有游离氨基的一端称为肽链的氨基端或N 端，而另一端含有一个游离竣基的一端称为肽链的竣基端或 C 端。蛋白质的二级结构是指多肽链骨架盘绕折叠所形成的有规律性的结构。最基本的二级结构类型有a-螺 旋 结 构 和 折 叠 结 构，此外还有B-转角和自由回转。右手a-螺旋结构是在纤维蛋白和球蛋白中发现的最常见的二级结构,每圈螺旋含有3.6个氨基酸残基，螺距为 0.54nm,螺旋中的每个肽键均参与氢键的形成以维持螺旋的稳定。B-折叠结构也是一种常见
23、的二级结构，在此结构中，多肽链以较伸展的曲折形式存在，肽 链（或肽段）的排列可以有平行和反平行两种方式。氨基酸之间的轴心距为0.35nm,相邻肽链之间借助氢键彼此连成片层结构。结构域是介于二级结构和三级结构之间的一种结构层次，是指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域。超二级结构是指蛋白质分子中的多肽链在三维折叠中形成有规则的三级结构聚集体。蛋白质的三级结构是整个多肽链的三维构象，它是在二级结构的基础上，多肽链进一步折叠卷曲形成复杂的球状分子结构。具有三级结构的蛋白质一般都是球蛋白，这类蛋白质的多肽链在三维空间中沿多个方向进行盘绕折叠，形成十分紧密的近似球形的结构，分子内部的空间只能容纳少
24、数水分子，几乎所有的极性R 基都分布在分子外表面，形成亲水的分子外壳，而非极性的基团则被埋在分子内部，不与水接触。蛋白质分子中侧链R 基团的相互作用对稳定球状蛋白质的三级结构起着重要作用。蛋白质的四级结构指数条具有独立的三级结构的多肽链通过非共价键相互连接而成的聚合体结构。在具有四级结构的蛋白质中，每一条具有三级结构的皑链称为亚基或亚单位，缺少一个亚基或亚基单独存在都不具有活性。四级结构涉及亚基在整个分子中的空间排布以及亚基之间的相互关系。维持蛋白质空间结构的作用力主要是氢键、离子键、疏水作用力和范德华力等非共价键，又称次级键。此外，在某些蛋白质中还有二硫键，二硫键在维持蛋白质构象方面也起着重
25、要作用。蛋白质的空间结构取决于它的一级结构，多肽离岸主链上的氨基酸排列顺序包含了形成复杂的三维结构(即正确的空间结构)所需要的全部信息。2.蛋白质结构与功能的关系不同的蛋白质，由于结构不同而具有不同的生物学功能。蛋白质的生物学功能是蛋白质分子的天然构象所具有的性质，功能与结构密切相关。2.1.一级结构与功能的关系蛋白质的一级结构与蛋白质功能有相适应性和统一性，可从以下几个方面说明：(1)一级结构的变异与分子病蛋白质中的氨基酸序列与生物功能密切相关，一级结构的变化往往导致蛋白质生物功能的变化。如镰刀型细胞贫血症，其病因是血红蛋白基因中的一个核甘酸的突变导致该蛋白分子中B-链 第 6 位谷氨酸被缴
26、氨酸取代。这个一级结构上的细微差别使患者的血红蛋白分子容易发生凝聚，导致红细胞变成镰刀状，容易破裂引起贫血，即血红蛋白的功能发生了变化。(2)一级结构与生物进化研究发现，同源蛋白质中有许多位置的氨基酸是相同的，而其它氨基酸差异较大。如比较不同生物的细胞色素C 的一级结构，发现与人类亲缘关系接近，其氨基酸组成的差异越小，亲缘关系越远差异越大。(3)蛋白质的激活作用在生物体内，有些蛋白质常以前体的形式合成，只有按一定方式裂解除去部分肽链之后才具有生物活性，如酶原的激活。2.2.蛋白质空间结构与功能的关系蛋白质的空间结构与功能之间有密切相关性，其特定的空间结构是行使生物功能的基础。以下两方面均可说明
27、这种相关性。(1).核糖核酸腋的变性与复性及其功能的丧失与恢复核糖核酸酶是由124个氨基酸组成的一条多肽链，含有四对二硫键，空间构象为球状分子。将天然核糖核酸酶在8moi/L服中用B-毓基乙醇处理，则分子内的四对二硫键断裂,分子变成一条松散的肽链，此时酶活性完全丧失。但用透析法除去8-疏基乙醇和胭后，此酶经氧化又自发地折叠成原有的天然构象，同时酶活性又恢复。(2)血红蛋白的变构现象血红蛋白是一个四聚体蛋白质，具有氧合功能，可在血液中运输氧。研究发现，脱氧血红蛋白与氧的亲和力很低，不易与氧结合。一旦血红蛋白分子中的一个亚基与。2结合，就会引起该亚基构象发生改变，并引起其它三个亚基的构象相继发生变
28、化，使它们易于和氧结合，说明变化后的构象最适合与氧结合。从以上例子可以看出，只有当蛋白质以特定的适当空间构象存在时才具有生物活性。3.蛋白质的重要性质蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质取决于肽链上的可解离的R基团。不同蛋白质所含有的氨基酸的种类、数目不同，所以具有不同的等电点。当蛋白质所处环境的pH大于p l时，蛋白质分子带负电荷，pH小 于p l时，蛋白质带正电荷，pH等 于p l时，蛋白质所带净电荷为零，此时溶解度最小。蛋白质分子表面带有许多亲水基团，使蛋白质成为亲水的胶体溶液。蛋白质颗粒周围的 水 化 膜（水化层）以及非等电状态时蛋白质颗粒所带的同性电荷的互相排斥是使蛋白质胶体系统稳定的主
29、要因素。当这些稳定因素被破坏时，蛋白质会产生沉淀。高浓度中性盐可使蛋白质分子脱水并中和其所带电荷，从而降低蛋白质的溶解度并沉淀析出，即盐析。但这种作用并不引起蛋白质的变性。这个性质可用于蛋白质的分离。蛋白质受到某些物理或化学因素作用时，引起生物活性的丧失，溶解度的降低以及其它性质的改变，这种现象称为蛋白质的变性作用。变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而造成天然构象的解体，但未涉及共价键的断裂。有些变性是可逆的，有些变性是不可逆的。当变性条件不剧烈时，变性是可逆的，除去变性因素后，变性蛋白又可从新回复到原有的天然构象，恢复或部分恢复其原有的生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。
30、4.测定蛋白质分子量的方法4.1.凝胶过滤法凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。耒知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积，从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量。4.2.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS（十二烷基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白
31、质变性并解离成亚基。当蛋白质样品中加入SDS后,SDS与蛋白质分子结合，使蛋白质分子带上大量的强负电荷,并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量。4.3.沉 降 法（超速离心法）沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时 一，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉
32、降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。第 二 章 酶一、单选题1.下列对酶的叙述，哪一项是正确的（E）A.所有的蛋白质都是酶C.所有的酶均需特异的辅助因子E.所有的酶均由活细胞产生2.以下哪项不是能的特点（A）A.酶只能在细胞内催化反应C.只能加速反应，不改变反应平衡点E.有高度特异性3.结合酶在下列那种情况下才有活性（D）A.酶蛋白单独存在 B.辅酶单独存在D.全酶形式存在 E.有激活剂存在B.所有的酶均以有机化合物作为作用物D.所有的酶对其作用物都有绝对特
33、异性B.活性易受pH、温度影响D.催化效率极高C.亚基单独存在4.下 列哪种辅酶中不含核甘酸（C）A.FAD B.FMN C.FH45.下列哪种辅酶中不含维生素（D）A.CoA-SH B.FAD C.NAD+6.酶的辅助因子的作用不 包 括（E）A.稳定酶的空间构象D.NADP+E.CoA-SHD.CoQ E.FMNB.参与构成酶的活性中心C.在酶与作用物的结合中起桥梁作用 D.传递电子、质子E.决定酶的特异性7.酶的必需基团是指（B）A.维持醐一级结构所必需的基团B.位于活性中心以内或以外，与酶活性密切相关的基团C.酶的亚基聚合所必需的基团D.维持醐分子构象的所有基团E.构成全能分子的所有基
34、团8.酶分子中使作用物转为变为产物的基团称为（B）A.结合基团 B.催化基团 C.碱性基团 D.酸性基团 E.疏水基团9.有关同工酶的正确叙述是（A）A.不同组织中同工醐谱不同 B.同工酶对同种作用物亲和力相同C.同工酶的基因相同 D.组成同工酶的亚基一定相同E.同工酶是同一多肽链经翻译后加工产生的10.含LDH5丰富的组织是（A）A,肝组织 B.心肌 C.红细胞 D.肾组织 E.脑组织11.关于酶原激活，正 确 的 是（B）A.酶原与酶一级结构相同 B.随原与酶空间结构不同C.所有酶都由酶原生成 D.酶原有活性中心E.激活剂使酶原激活12.关于变构酶的结构特点的错误叙述是（D）A.常有多个亚
35、基组成 B.有与作用物结合的部位C.有与变构剂结合的部位 D.催化部位与别构部位都处于同一亚基上E.催化部位与别构部位既可处于同一亚基，也可处于不同亚基上13.关于变构剂的错误叙述是（B）A.可与酶分子上别构部位结合 B.可使酶蛋白与辅基结合C.可使酶与作用物亲和力降低 D.可使酶分子的空间构象改变E.有激活或抑制作用14.国际酶学委员会将酶分为六大类的主要根据是（D）A.酶的来源 B.能的结构 C.酶的理化性质D.酶促反应性质 E.酶催化的作用物结构15.关于酶促反应特点的错误描述是（B）A.酶能加速化学反应 B.酶在生物体内催化的反应都是不可逆的C.酶在反应前后无质和量的变化 D.酶对所催
36、化的反应有选择性E.能缩短化学反应到达反应平衡的时间16.关于诱导契合学正确的是（E）A.发生在酶原激活时 B.发生在变构调节时C.诱导契合时仅发生酶构象改变 D.诱导契合时仅发生底物构象改变E.诱导契合有利于形成酶与底物复合物17.其他因素不变，改变作用物的浓度时（A）A.在低底物浓度下反应速度与底物浓度成正比B.反应速度随底物浓度增加而下降C.反应速度随底物浓度增加持续增加D.反应速度先慢后快E.反应速度不变18.在酶浓度不变的条件下，以反应速度v-对作用物S作图，其图象为（C）A.直线 B.S 形曲线 C.矩形双曲线 D.抛物线 E.钟罩形曲线19.作用物浓度达到饱和后，再增加作用物浓度
37、（C）A.反应速度随作用物增加而加快C.反应速度不再增加E.形成前-作用物复合体增加20.Michaelis-Menten 方程式是（C）A.i）=Km+SVmax+SJC.u=VmaxFSlB.随着作用物浓度的增加酶逐渐失活D.如增加抑制剂反应速度反而加快B.u=Vmax+|SK m+SD.v=Km+fSlKm+SJ V ma xSJE.u=KmSV ma x+S2 1.K m 是（D）A.作用物浓度饱和时的反应速度B.是最大反应速度时的作用物浓度C.作用物浓度达5 0%饱和时的反应速度D.反应速度达最大反应速度5 0%时的作用物浓度E.降低反应速度一半时的作用物浓度2 2 .酶 的K m值
38、 大 小 与（A）A.酶性质有关 B.酶浓度有关 C.酶作用温度有关D.酶作用时间有关 E,酶的最适p H有关2 3 .己糖激酶以葡萄糖为作用物时，Km=l/2 SJ,其反应速度。是V的（A）A.6 7%B.5 0%C.3 3%D.15%E.9%2 4 .酶促反应速度u达到最大反应速度V的8 0%时，作用物浓度S为（D）A.1 K m B.2 K m C.3 K m D.4 Km E.5 Km2 5 .为了防止酶失活，酶制剂存放最好（A）A.在低温 B.在室温 C.最适温度 D.加入抑制剂 E.不避光2 6 .含唾液淀粉酶的唾液经透析后，水解淀粉的能力显著降解，其 原 因 是（B）A.酶变性失
39、活 B.失去激活剂 C.酶一级结构破坏D.失去辅酶 E.失去酶蛋白2 7 .能使唾液淀粉酶活性增强的离子是（A）A.氯离子 B.锌离子 C.碳酸氢根离子 D.铜离子 E.镒离子2 8 .各种酶都具有最适p H,其 特 点 是（B）A.最 适p H 一般即为该酶的等电点B.最 适p H时酶的活性中心的可解离基团都处于最适反应状态C.最 适p H时酶分子的活性通常较低D.大多数酶活性的最适pH曲线为抛物线形E.在生理条件下同一个体酶的最适p H均相同2 9 .属于不可逆性抑制作用的抑制剂是（B）A.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用B.有机磷化合物对胆碱酯酶的抑制作用C.磺胺药类对细菌二氢叶酸还原酶的
40、抑制作用D.A T P对糖酵解的抑制作用 E.反应产物对酶的反馈抑制3 0 .对可逆性抑制剂的描述，哪项是正确的（C）A.使酶变性失活的抑制剂B.抑制剂与酶是共价键相结合C.抑制剂与酶是非共价键结合D.抑制剂与酶结合后用透析等物理方法不能解除抑制E.可逆性抑制剂即指竞争性抑制31.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用是属于（C）A.反馈抑制 B.非竞争抑制 C.竞争性抑制D.非特异性抑制 E.反竞争性抑制32.反竞争性抑制剂具有下列哪一种动力学效应（E）A.使 Km值升高，V不变 B.使 Km值降低，V 不变C.使 Km值不变，V 升高 D.使 Km值不变，V 降低E.使 Km值和V 均降低33.存
41、在下列那种物质的情况下，酶促反应速度不变、Km值减少（D）A.无抑制剂存在 B.有竞争性抑制剂存在C.有反竞争性抑制剂存在 D.有非竞争性抑制剂存在E.有不可逆抑制剂存在34.纯化酶制剂时;酶纯度的主要指标是（D）A.蛋白质浓度 B.酶量 C.酶的总活性D.酶的比活性 E.酶的理化性质35.有关酶的以下描述哪项是正确的（E）A.同工酶是一组功能与结构相同的酶B.诱导酶是指细胞中固有而含量又多的酶C.在前的活性中心中只有侧链带电荷的氨基酸直接参与酶的催化反应D.酶催化反应处速度取决于酶的浓度E.竞争性抑制剂只能改变Km值，而不改变Vmax36.组织损伤后，血浆特异酶的活性变化主要依赖于（D）A.
42、损伤前酶在该组织中的浓度 B.损伤前酶在血液中的浓度C.损伤前能在组织中的合成速率 D.损伤时损害的面积与程度E.损伤后采集血标本的时间37.下列关于rib zyme的叙述哪一个是正确的（C）A.即核酸酶 B.本质是蛋白质 C.本质是核糖核酸D.最早发现的一种酶 E.其辅酶是辅酶A二、多选题1.关于酶的叙述哪些是正确的（ABCD）A.酶的化学本质是蛋白质 B.所有的酶都是催化剂C.酶可以降低反应活化能 D.酶能加速反应速度，不改变平衡点2.酶与一般催化剂相比有以下特点（ACD）A.反应条件温和，可在常温，常压下进行B.加速化学反应速度，可改变反应平衡点C.专一性强，一种酶只作用一种或一类物质，
43、产生一定的产物D.酶的催化效率极高3.证明多数酶是蛋白质的证据是（ABCD）A.水解产物是氨基酸 B.有和蛋白质一致的颜色反应C.可被蛋白酶水解 D.可使蛋白质变性的因素，也使酶变性4.蛋白与辅酶（辅基）的 关 系 有（ABCD）A.一种酶只有一种辅酶（辅基）B.不同的酶可有相同的辅酶（辅基）C.只有全酶才有活性 D.酶蛋白决定特异性，辅酶参与反应5.对全酶的正确描述指（BD）A.所有的酶都有全酶和蛋白质两种形式 B.由蛋白质和非蛋白质部分构成C.酶蛋白-辅酶-激动剂-作用物聚合物 D.由酶蛋白和辅酶（辅基）组成的酶6.酶的辅助因子可以是（ABC）A.金属离子B.某些小分子有机化合物C.维生素
44、或其衍生物 D.各种有机和无机化合物7.可提供酶必需基团的氨基酸有（ABC）A.丝氨酸 B.半胱氨酸 C.组氨酸 D.甘氨酸8.一种醐的活性有赖于酶蛋白的筑基，能有效地保护这种酶，防止氧化的物质是（ABC）A.维生素C B.维生素E C.还原型谷胱甘肽 D.过氧化氢9.成酶活性中心的功能基团，常 见 的 有（ABC）A.-COOH B.-SH 及-OH C.咪隆基 D.甲基10.酶分子上必需基团的作用是（ABC）A.与作用物结合C.维持酶分子空间构象11.变构酶的动力学特点是（AD）A.u对 S作图呈S型C.u对 S作图呈距形双曲线12.pH对酶促反应速度影响主要是由于A.影响酶必需基团的游离
45、状态B.参与作用物进行化学反应D.决定随结构B.u对 S作图呈抛物线型D.表明有协同效应（ABCD）B.影响酶活性中心的空间构象C.影响辅酶的游离状态D.影响底物分子的解离状态13.不可逆性抑制剂（ACD）A.是使酶变性失活的抑制剂B.是抑制剂与酶结合后用透析等方法不能除去的抑制剂C.是特异的与酶活性中心结合的抑制剂D.是与酶分子以共价键结合的抑制剂14.非竞争性抑制作用中，抑制剂的作用方式是（I：抑 制 剂E：酶S：作用物）（ACD）A.E+I-k El B.I+S-k SI C.El+S-k EIS D.ES+I-k ESI15.竞争性抑制剂存在时：（BD）A.Km降低 B.Km增加 C.
46、Vmax降低 D.Vmax不变三、填空题1 .酶 促 反 应 的 特 点 有、。【高效率催化活性、高度特异性、可调节性】2 .列 辅 基（酶）分别含维生素是N A D；C o A；T P P；F A D；F H4 o P P；泛酸；B l；B 2；叶 酸】3 .响 酶 促 反 应 的 因 素 有、o【酶浓度、底物浓度、温度、p H、激活剂和抑制剂】4 .的特异性有、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 三类。【绝对特异性、相对特异性、立体异构特异性】5 .逆 性 抑 制 作 用 的 类 型 可 分 为、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 三种。【竞争性抑制、非竞争性抑制、反竞争性抑制
47、。】6 .单位时间内作用物的消耗量，或产物的生成量表示；在标准条件下，在1 分钟内能催化1。微摩尔的作用物转变为产物的能量为 O【酶的反应速度；1 个国际单位I U】7 .酶的活性中心包括 和 两个功能部位，其中_ _ _ _ _ _ _ _ _直接与底物结合，决定酶的专-性，是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。【结合部位；催化部位；结合部位；催化部位】8 .酶活力是指，-般用 表示。【酶催化化学反应的能力；一定条件下，酶催化某一化学反应的反应速度】9 .通常讨论酶促反应的反应速度时一，指的是反应的 速度，即 时测得的反应速度。【初；底物消耗量5%1 0 .解释别构酶作用机理的假说有 模
48、型和 模型两种。【齐变；序变】1 1 .固定化酶的优点包括，等。【稳定性好；可反复使用；易于与反应液分离】1 2 .p H 值影响酶活力的原因可能有以下几方面：影响,影响,影响o 底物分子的解离状态；酶分子的解离状态；中间复合物的解离状态】1 3 .温度对酶活力影响有以下两方面：一方面,另一方面。【温度升高，可使反应速度加快；温度太高，会使酶蛋白变性而失活】1 4 .丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的 抑制剂。【竞争性】1 5 .变构酶的特点是：（1）,（2）,它不符合一般的，当以V 对凶作图时，它表现出 型曲线，而非 曲线。它是酶。【由多个亚基组成；除活性中心外还有变构中心；米氏方程；S；双；
49、寡聚酶】1 6 .转 氨 酶 的 辅 因 子 为 即 维 生 素 o其 有 三 种 形 式，分别为、,其中 在氨基酸代谢中非常重要，是、和 的辅酶。【磷酸毗哆醛；VB6；磷酸毗哆醛；磷酸毗哆胺；磷酸毗哆醇；磷酸毗哆醛；转氨酶；脱竣酶；消旋酶】17.叶酸以其 起辅酶的作用，它有 和 两种还原形式，后者的功能作为载体。【还原性产物；DHFA：THFA；一碳单位】18.全酶由 和 组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中 决定酶的专一性和高效率，起传递电子、原子或化学基团的作用。【酶蛋白；辅助因子；酶蛋白；辅助因子】19.辅 助 因 子 包 括、和 等。其中 与酶蛋白结合紧密，需要 除去，与酶蛋
50、白结合疏松，可以用 除去。【辅酶；辅基；金属离子；辅基；化学方法处理；辅酶；透析法】20.T.R.Cech和S.Alman因各自发现了 而共同获得1989年的诺贝尔奖(化学奖)。【核酶(具有催化能力的R N A)四、名词解释题1.变构酶【由于变构调节物在酶上结合的位点，有别于作用物在酶上结合的位点;旦当变构调节物与酶结合时，前的构象变化，故称为别构酶(allostericenzyme)或变构酶。】2.抗体酶【一类象酶一样具有催化活性的抗体。】3.酶的特异性4.活性中心5.酶原激活6.同工酶7.最适温度8.可逆抑制【一种酶只作用于一种或类化合物，进行一种类型的化学反应，以得到一定结构的产物，这种