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1、第 1 页 共 5 页222 动物细胞融合与单克隆抗体导学案编写人:谢建审核人:审批人:【学习目标】(1)掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别与联系。(2)简述动物细胞融合与单克隆抗体制备的过程。(3)了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说出应用的实例。【重点难点】1.教学重点(1)动物细胞融合的原理和过程。(2)单克隆抗体制备的原理和过程。2.教学难点单克隆抗体制备的原理和过程。【自主学习】、动物细胞融合1、概念:_ 或_ 动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交。2、结果:形成_。3、过程:两个或多个细胞PEG灭活的病毒或_。4、意义:克服了_ 的不亲和性,成为研究_、_、肿瘤和_培育
2、的重要手段。、单克隆抗体1、抗体产生细胞:_。成分:_。特点:从 _ 中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程杂交瘤细胞的特点:_、_。单克隆抗体的优点:_、_、_。、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂,具有_、_、_、_ 的优点。给小鼠注射特定的抗原蛋白培养骨髓瘤细胞从_ 中分离 B 淋巴细胞骨髓瘤细胞灭活病毒融合未融合细胞_ _ 选择培养基_ 克隆检测小鼠体内培养体外培养_ 抗体第 2 页 共 5 页2、用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗_、可制成 _。【课内探究】探究一:动物细胞的融合1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原
3、理细胞膜的流动性融合过程先使细胞分散开诱导方法电激、振动、离心、聚乙二醇结果应用培育植物新品种意义相同点原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相似2 植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么?3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合?4、不灭活的病毒能作为诱导剂吗?知识阅读:阅读课本P52 中的小字,了解一下动物细胞融合技术的发展简史。(二)单克隆抗体探究二:单克隆抗体制备的原理1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么?抗体是从何来的?2、B 淋巴细胞有什么特点?3、若要想获得大量的单一抗体,如何做呢?4、在体外培养的条件下,一个B 淋巴细胞是不可能无限增殖的,那么,怎样解决这一问题的呢?
4、5、小结以下内容:第 3 页 共 5 页 利用 _产生特异性抗体的功能。利用 _无限增殖的特性。利用 _技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。利用 _技术大量培养杂交瘤细胞。探究三:单克隆抗体制备的过程1、如何获得B 淋巴细胞?2、如果把B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时,会有几种融合方式(类型)?3、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?融合后的细胞经选择性培养基培养后,能存活的细胞就是杂交瘤细胞,但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞,通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释,用多孔细胞培养板培养,使每孔不超过一个细胞,通过培养让其增殖
5、。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行34 次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。探究四:单克隆抗体的应用1、单克隆抗体的应用有哪些?2、生物导弹的组成及优点【当堂检测】1、基因型为Aa 与基因型为Bb 的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,不可能获得下列哪种基因型的细胞第 4 页 共 5 页()AAAaa BAaBb CAabb DBBbb 2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是 ()诱导融合的方法完全相同所用
6、的技术手段不相同所采用的原理完全相同都能形成杂种细胞A.B.C.D.3、关于单克隆抗体,下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B、可以与药物结合,用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产,不能体外生产4、“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B 淋巴细胞【课后练习与提高】1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较,在动物细胞融合中有特殊性的是()A、融合的原理B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程2、下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中1 过程注射的物质和A细胞的名称为()A、抗体、T 淋巴细胞
7、B、抗原、T 淋巴细胞C、抗体、B 淋巴细胞D、抗原、效应B 淋巴细胞3、单克隆抗体和血清抗体相比,其优越性在于()A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单4、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是()A特异性强、灵敏度高 B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C体外培养B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D由效应 B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌5、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其生物学原理及技术的叙
8、述正确的是()A都属于无性生殖,能保持母本性状B都是细胞工程的技术范围C都充分体现了体细胞的全能性 D都不会发生基因重组和变异6、右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:(1)若 A、B 是植物细胞,在细胞融合之前已用_ _ _ 处理,除去了_;由 A、B 到细胞 C 的过程中,常用的物理方法是_。融合完成的标志是_。第 5 页 共 5 页(2)若 A、B 是植物细胞,则形成的D 细胞还要应用 _ _技术把 D培养成植株。(3)若 A、B 是动物细胞,一般取自_,然后用 _使其分散开来;由A、B 到 C 的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段是_,所形成的D称为 _,A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有_。(4)若该过程是制备单克隆抗体,A 为小鼠效应B 细胞,那么,在获得此细胞之前,小鼠已 经 被 注 射 了。注 射 后 小 鼠 身 体 发 生 了 相 应 的 免 疫 反 应,生 成 了_ _,图中 B 为。(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B 到 C 的过程中,所形成的C 有_ 种,用来培养的 D 细胞应该是 _。从中选择出它的方法是_培养,获得 D 后,常用的培养方法是培养液中培养和_。