人教版高中生物选修3专题二动物细胞培养和核移植技术课件.ppt

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1、专题二专题二 细胞工程细胞工程科技科技 探索探索.多利羊多利羊2.2.12.2.1动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术(第一课时)(第一课时)【学习目标】【学习目标】1 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用、简述动物细胞培养的过程、条件及应用2 2、理解贴壁生长、接触抑制、原代培、理解贴壁生长、接触抑制、原代培养、养、传代培传代培养等基本概念养等基本概念3 3、运用已学知识,、运用已学知识,积极参与小组讨论积极参与小组讨论4 4、区分植物组织培养和动物细胞培养的异同、区分植物组织培养和动物细胞培养的异同5 5、建立起、建立起热爱科学,关爱生命健康的情感热爱科学,关爱生命健康的情感

2、3一、动物细胞工程常用的技术手段一、动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养(技术基础)动物细胞培养(技术基础)动物细胞核移植技术动物细胞核移植技术动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体二、动物细胞培养的概念二、动物细胞培养的概念1.1.从动物机体中取出相关的组织,将它分散成从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_,_,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞_和和_._.2.2.原理:原理:_单个细胞单个细胞生长生长增殖增殖细胞增殖细胞增殖取出动物组织块取出动物组织块动物细胞培养过程示意图动物细胞培养过程示意图剪碎剪碎组织块组织块制成细胞制成细胞悬

3、浮液悬浮液用用胰蛋白酶胰蛋白酶处理分处理分散成单个细胞散成单个细胞转入培养转入培养液中进行液中进行原代培养原代培养贴满瓶壁贴满瓶壁的细胞用的细胞用胰蛋白酶胰蛋白酶处理分处理分散成单个细胞,制成细胞悬浮液散成单个细胞,制成细胞悬浮液转入培转入培养液中养液中进行进行传传代培养代培养放入放入COCO2 2培养箱培养箱中培养中培养放入放入COCO2 2培养箱培养箱中培养中培养三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程1.1.对选取的动物组织材料有要求吗?对选取的动物组织材料有要求吗?2.2.为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?3.3.用胰蛋白酶处理,组织就会分

4、散成单个细胞,说用胰蛋白酶处理,组织就会分散成单个细胞,说明细明细 胞胞之间主要是什么成分?之间主要是什么成分?胰蛋白酶会不会把细胞也胰蛋白酶会不会把细胞也 消化掉消化掉?为什?为什么么?若换若换成胃蛋白酶可以吗?成胃蛋白酶可以吗?4.4.动物细胞培养能体现动物细胞的全能性吗?为什么?动物细胞培养能体现动物细胞的全能性吗?为什么?5.5.多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你据你 所所学的内环境的知识,思考体外培养细胞时需要学的内环境的知识,思考体外培养细胞时需要什么什么 样样的营养物质和环境条件?的营养物质和环境条件?【思维碰撞、展开讨论】【

5、思维碰撞、展开讨论】【思维碰撞、展开讨论】【思维碰撞、展开讨论】1.1.对选取的动物组织材料有要求吗?对选取的动物组织材料有要求吗?2.2.为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?通常取动物通常取动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动物的组织、器官。动物的组织、器官。因为其分化程度低、增殖能力强,更容易培养因为其分化程度低、增殖能力强,更容易培养 成块的组织中细胞与细胞靠在一起,彼此限成块的组织中细胞与细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖,细胞分散开后更制了细胞的生长和增殖,细胞分散开后更有利有利于营养物质的吸收和代谢废物的排出于营养物质的吸收和代谢废物的排出。3.

6、3.用胰蛋白酶处理,组织就会分散成单个细胞,用胰蛋白酶处理,组织就会分散成单个细胞,说明细胞之间是什么?胰蛋白酶会不会把细胞也消说明细胞之间是什么?胰蛋白酶会不会把细胞也消化掉?为什么?化掉?为什么?这个过程中换成胃蛋白酶可以吗这个过程中换成胃蛋白酶可以吗?4.4.从原理的角度分析,动物细胞培养能体现动物细从原理的角度分析,动物细胞培养能体现动物细胞的全能性吗?为什么?胞的全能性吗?为什么?是是蛋白质蛋白质;若长时间作用也会细胞膜蛋白,;若长时间作用也会细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须对细胞有损伤作用,因此必须注意控制时间注意控制时间。不可不可,动物细胞培养适宜的,动物细胞培养适宜的PH

7、PH为为7.2-7.47.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性。胃蛋白酶在此环境中没有活性。不能不能体现,动物细胞培养只是利用体现,动物细胞培养只是利用细胞增殖细胞增殖,未发育形成一个完整的个体。未发育形成一个完整的个体。【抽丝剥茧、名词辨析】【抽丝剥茧、名词辨析】1.1.贴壁生长:贴壁生长:2.2.接触抑制:接触抑制:3.3.原代培养:原代培养:4.4.传代培养传代培养 1010代以内的细胞保持代以内的细胞保持_10501050代代左右的细胞,细胞增殖会逐渐左右的细胞,细胞增殖会逐渐_,_,以至于完全停止,但少数细胞以至于完全停止,但少数细胞_可能发可能发生改变,获得不死性生改变,获得不死

8、性(癌细胞癌细胞)。正常的二倍体核型正常的二倍体核型缓慢缓慢遗传物质遗传物质5.5.多细胞动物和人体的细胞都生活在内多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思环境中,根据你所学的内环境的知识,思考体外培养细胞时需要什么样的考体外培养细胞时需要什么样的营养物质营养物质和和环境条件环境条件?营养物质:营养物质:葡萄糖、氨基酸、无机盐等葡萄糖、氨基酸、无机盐等环境条件:环境条件:无菌无毒、温度、无菌无毒、温度、PHPH、O O2 2等等1 1、无菌、无毒的环境:对、无菌、无毒的环境:对_和所有和所有_进行进行无菌处理,另外需要添加无菌处理,另外需要添加_,_,定期更换培养液

9、。定期更换培养液。2 2、营养:合成培养基中要有糖、营养:合成培养基中要有糖、_、_、无、无机盐、机盐、_等,通常需加入等,通常需加入_、血浆等。、血浆等。3 3、温度和、温度和pHpH:适宜温度:适宜温度:_0.5 0.5 适宜适宜pHpH:_4 4、气体环境:主要是、气体环境:主要是_和和_,O O2 2是是_所必需的,所必需的,COCO2 2主要维持主要维持_ _。四、动物细胞培养的条件四、动物细胞培养的条件培养液培养液培养用具培养用具氨基酸氨基酸 促生长因子促生长因子微量元素微量元素血清血清36.57.27.4O2CO2细胞呼吸细胞呼吸培养液的培养液的PHPH抗生素抗生素注意:通常采用

10、注意:通常采用培养皿或者松盖培养皿或者松盖的培养瓶的培养瓶五、动物细胞培养的应用五、动物细胞培养的应用1 1、生产生物制品、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;2 2、动物基因工程离不开动物细胞的、动物基因工程离不开动物细胞的培养培养3 3、用于检测有毒物质及、用于检测有毒物质及毒性毒性4 4、培养正常或各种病变的细胞,用于生理、培养正常或各种病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的病理、药理等方面的研究研究六六、小、小结结比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理 培养基性质培养基性质固体培养基固体培养基 培养基特有成分

11、培养基特有成分 蔗糖、蔗糖、葡萄糖葡萄糖、培养结果培养结果 培养目的培养目的快速繁殖、培育无快速繁殖、培育无病毒植株病毒植株获得细胞或细胞分获得细胞或细胞分泌蛋白泌蛋白2.2.比较植物组织培养和动物细胞培养的异同比较植物组织培养和动物细胞培养的异同细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖液体培养基液体培养基完整的植株完整的植株细胞数量增加细胞数量增加1.1.本节内容本节内容小结:动物细胞培养的概念、过程及条小结:动物细胞培养的概念、过程及条件、件、应用应用植物激素植物激素动物血清动物血清1.1.某研究性学习小组同学在研究细胞工程时,列表某研究性学习小组同学在研究细胞工程时,列表比较了植物组织培

12、养和动物细胞培养的有关内容,比较了植物组织培养和动物细胞培养的有关内容,其中正确的是其中正确的是()()选项选项比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养A A处理方法处理方法酶解法去除细酶解法去除细胞壁胞壁用胃蛋白酶处理后用胃蛋白酶处理后制成细胞悬浮液制成细胞悬浮液B B原理原理细胞增殖细胞增殖细胞的全能性细胞的全能性C C应用应用快速繁殖技术快速繁殖技术生成干扰素生成干扰素D D结果结果形成完整植株形成完整植株 传至传至10-5010-50代左右代左右时,增殖缓慢,会时,增殖缓慢,会全部衰老死亡全部衰老死亡C【知识巩固、【知识巩固、习题习题作战】作战】2.2.下列与动

13、物细胞培养有关的表述中,不正确的是下列与动物细胞培养有关的表述中,不正确的是()A A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和动物培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和动物血清血清B B传代培养的细胞一般传至传代培养的细胞一般传至1010代左右便会出现生长代左右便会出现生长停滞停滞C C动物细胞培养一般能够传到动物细胞培养一般能够传到40405050代,但其遗传代,但其遗传物质发生了改变物质发生了改变D D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞身健康细胞 C3 3某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞

14、为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。题。(1)(1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是适量血清,其原因是_。细。细胞培养应在含胞培养应在含5%CO5%CO2 2的恒温培养箱中进行,的恒温培养箱中进行,COCO2 2的作的作用是用是_。(2(2)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,)在两种细胞生长

15、过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长其生长_。药物实验需要大量细胞,两种。药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用液,需用_处理。处理。多多胰蛋白酶胰蛋白酶停止停止人们对细胞所需要的营养物质还没有完全搞清楚,人们对细胞所需要的营养物质还没有完全搞清楚,血清中还有蛋白质、氨基酸等天然成分血清中还有蛋白质、氨基酸等天然成分维持培养液的维持培养液的PHPH(3)(3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中

16、加入适量的养液中加入适量的_。(4)(4)已知癌基因已知癌基因X X过量表达与肝肿瘤的发生密切相过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物关,要试验一种抗肿瘤药物Y Y对甲细胞生长的影响,对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为可将甲细胞分为A A、B B两组,两组,A A组细胞培养液中加入组细胞培养液中加入_,B B组细胞培养液中加入等量无菌生理组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从盐水,经培养后,从A A、B B两组收集等量细胞,通两组收集等量细胞,通过分别检测过分别检测X X基因在基因在A A、B B两组细胞中的两组细胞中的_或或_合成水平的差异,确定合成水平的差异,确定Y Y的药效。的药效。YmRNA蛋白质蛋白质抗生素抗生素“我要把人生变成科学的梦,然后把梦我要把人生变成科学的梦,然后把梦变成现实!变成现实!”居里夫人居里夫人细胞的细胞的接触抑制:接触抑制:当贴壁细胞分裂生长当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。殖,这种现象称为细胞的接触抑制。人毛囊干细胞原代培养情况(人毛囊干细胞原代培养情况(40)

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