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1、项目六 无菌和无菌操作技术1PPT课件无菌：没有活的微生物存在的状态。无菌操作技术：用于防止微生物进入无菌范围造成污染的操作技术。2PPT课件一、无菌的环境二、无菌的器具、培养基三、无菌操作技术四、基本规则3PPT课件一、无菌的环境1、无菌室2、超净工作台3、生物安全柜4、火焰周围4PPT课件1、无菌室标准无菌室的要求：房间设置（外面有缓冲室）、空气过滤、墙面、墙角、微生物操作相关设备、紫外灯等。无菌室布局5PPT课件如条件有限，可在微生物实验室内专辟一个小房间作为无菌室。可以用板材和玻璃建造，面积4-5 平方米即可。板材和玻璃隔出的无菌室6PPT课件2、超净工作台超净工作台是一种提供局部无尘
2、无菌工作环境的垂直单向流型空气净化设备。超净工作台7PPT课件3、生物安全柜生物安全柜外形与超净台类似，也提供局部无尘无菌工作环境。但它设置了风槽，气流不会吹向使用者，可以有效保护使用者。生物安全柜8PPT课件4、火焰周围通常使用酒精灯、煤气灯，其火焰周围是无菌区域（直径10cm左右）。这并不是利用高温杀死细菌，而是利用向上的单向气流形成一个无菌区域。火焰周围是无菌区域9PPT课件二、无菌的器具、培养基1、玻璃、金属等器具 干热灭菌法2、玻璃、金属、含水物品 高压蒸汽灭菌法3、金属、玻璃器具 火焰灭菌法4、液体或水溶性物质 过滤除菌法10PPT课件1、玻璃、金属等器具-干热灭菌法设备：电烘箱用
3、途：用于玻璃器皿、金属器具等耐热物品的烤干和灭菌。条件：160-165，灭菌 1-2小时。11PPT课件2、玻璃、金属、含水物品等-高压蒸汽灭菌法设备：高压蒸汽灭菌锅用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。条件：121 水蒸气 15分钟 培养基一般使用高压蒸汽灭菌法12PPT课件3、一些金属、玻璃器具-火焰灭菌法即在火焰外焰上灼烧进行灭菌。用途：接种环、接种针；涂布器；试管管口、锥形瓶瓶口等的灭菌。13PPT课件4、液体或水溶性物质-过滤除菌法器具：细菌过滤器用途：不耐高温的液体、水溶性物质的除菌。细菌过滤器14PPT课件三、无菌操作技术我们通过一定的技术来保证目的微生物、培
4、养基不被环境微生物污染，这些技术就是无菌操作技术。包括手部清洁消毒，用接种针、接种环、吸量管、涂布棒等工具进行各种操作等等。15PPT课件1、手部清洁消毒洗手：手部有可见灰尘时、饭前、便后，用水和肥皂洗手；Handrub（揉手）：手部较清洁时，75%乙醇或者醇基消毒剂揉手。16PPT课件动作：手掌-手背-指缝-手指-拇指-指尖-手腕17PPT课件2、培养皿操作培养皿开合：单手打开和盖上皿盖，包括持皿法和皿加法两种。此操作用于制作培养基平板、接种等。持皿法18PPT课件皿加法19PPT课件3、接种环操作包括灼烧接种环、接种、划线等。20PPT课件灼烧接种环先斜放外焰灼烧接种环，然后垂直放置后继续
5、灼烧，再斜烧金属杆。现在红外接种环灭菌器使用也比较广泛。红外接种环灭菌器21PPT课件用接种环进行接种22PPT课件用接种环进行划线23PPT课件4、涂布棒操作灼烧灭菌：可以沾酒精然后灼烧，灼烧范围要包括其杆部。24PPT课件涂布：将菌液滴在培养基表面中央。右手拿涂布棒将菌液沿一条直线来回推动，然后沿一垂直线来回推动，平板边缘处可改变方向再涂几次。涂布25PPT课件5、试管操作单试管操作（注意左右手的使用）26PPT课件双试管操作27PPT课件四、基本规则不得留长指甲，头发需扎好；无菌操作中不要大声笑、说话、打喷嚏、打闹。28PPT课件手不要在无菌物上方越过；要了解拿无菌物的位置，不触碰其之外的位置；不要将无菌物移出无菌范围。29PPT课件