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1、 721721分光光度计分光光度计的校准与维护的校准与维护了解了解721721分光光度计的原理和结构分光光度计的原理和结构掌握掌握721721分光光度计的正确使用方法分光光度计的正确使用方法熟悉熟悉721721分光光度计的波长调校方法分光光度计的波长调校方法目目 的的 要要 求求 可见分光光度计,是依据物质在不同光区可见分光光度计,是依据物质在不同光区吸收光谱的特性,根据光吸收定律即朗伯吸收光谱的特性,根据光吸收定律即朗伯-比尔比尔定律,对物质进行定性鉴别和定量分析的仪器。定律,对物质进行定性鉴别和定量分析的仪器。A=kLcA A 吸光度吸光度(absorbance)(absorbance)L
2、 L 介质厚度介质厚度(length/cm)(length/cm)c c 浓度浓度(concentration)(concentration)K K 吸光系数吸光系数(absorptivity)(absorptivity)实实 验验 原原 理理721721分光光度计一台分光光度计一台螺丝刀一套螺丝刀一套镨钕滤光片一块。镨钕滤光片一块。实实 验验 器器 材材光源:钨灯光源:钨灯(360(360800 nm)800 nm),提供入射光;,提供入射光;聚焦透镜聚焦透镜:将分散光聚焦;将分散光聚焦;反射镜:将入射光转成反射镜:将入射光转成;入射狭缝:光源的光由此进入单色器;入射狭缝:光源的光由此进入单
3、色器;光源光源 单色器单色器 吸收池吸收池 检测器检测器 显示系统显示系统仪器的基本结构仪器的基本结构准直透镜:使入射光成为平行光束;准直透镜:使入射光成为平行光束;棱镜:折射率的不同将复合光分解成单色光;棱镜:折射率的不同将复合光分解成单色光;出射狭缝:聚焦后的单色光从出射狭缝射出;出射狭缝:聚焦后的单色光从出射狭缝射出;比色池:盛放待测溶液;比色池:盛放待测溶液;光门:控制通光量;光门:控制通光量;光栏:透光,密闭光电暗室。光栏:透光,密闭光电暗室。光电管:将光信号转化成电信号。光电管:将光信号转化成电信号。仪器的基本结构仪器的基本结构1.1.打开比色皿盖子打开比色皿盖子,选定所需波长,按
4、下电选定所需波长,按下电源开关源开关,调节调节 “0 0”透光率透光率旋钮使指针指向旋钮使指针指向 “0 0”刻度上,合上盖子刻度上,合上盖子,调节透光率大约调节透光率大约在在9090左右预热左右预热20min20min。2.2.测量前打开比色皿盖子,用测量前打开比色皿盖子,用“0 0”透光率透光率旋旋钮把指针调到钮把指针调到透光率透光率“0 0”处,处,将装有将装有参比参比溶液溶液的比色皿放入比色皿架中,盖上比色的比色皿放入比色皿架中,盖上比色皿暗盒盖,用皿暗盒盖,用“100100透光率旋钮透光率旋钮”调节使调节使指针置于指针置于透光率透光率“100100”。(一)正确使用方法(一)正确使用
5、方法(二)波(二)波 长长 调调 校校 调整波长时使用镨钕滤光片来做标准。本仪器镨钕滤光片是粉红色的,实际波长为529nm。将镨钕滤光片装到仪器的附件上放到一比色皿座中,空白为空气,待仪器稳定后进行以下步骤:(1 1)打开比色皿盖子,调节)打开比色皿盖子,调节“0 0”旋钮校准仪器旋钮校准仪器“0 0”点,即调至点,即调至透光率透光率“0 0”刻度刻度 .(2 2)将比色皿盖合上,使光电管受光,用)将比色皿盖合上,使光电管受光,用“100100透光率旋钮透光率旋钮”调节使指针置于透光率调节使指针置于透光率“100100”,反复几次调整反复几次调整透光率透光率“0 0”和和 “100100”才能
6、调好。才能调好。(3 3)将镨钕滤光片置于光路中,读下电表读数,)将镨钕滤光片置于光路中,读下电表读数,然后在然后在529 nm529 nm左右分别测其透射比。左右分别测其透射比。(4 4)每变一次波长必须重新校对)每变一次波长必须重新校对“0 0”和和 “100100”,找出透射比最小的波长即最大吸收波长。,找出透射比最小的波长即最大吸收波长。1 1开机开机必须合上盖子必须合上盖子,调节透光率大约在调节透光率大约在90 左右预热左右预热20min;2 2测试过程每次改变波长必须调测试过程每次改变波长必须调0 0和调和调100%100%;3.3.拆装中,拆和上螺丝对角线,各部件放拆装中,拆和上螺丝对角线,各部件放好;装完以后检查仪器完好方可离开。好;装完以后检查仪器完好方可离开。注注 意意 事事 项项再再 见!见!