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1、 ICS 65.020.01 CCS B 16 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 30362023 向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术规程 Technical code of practice for indoor identification of sunflower resistance to sunflower black stem 2023-05-11 发布 2023-06-11 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 30362023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农
2、牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口。本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业技术推广中心、内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古自治区农业标准化技术委员会。本文件主要起草人：张键、融晓君、张之为、张文兵、贾瑞芳、田晓燕、萨其仍贵、吕明举、张智芳、赵素梅、王颖、高红宇、仇凯、孔祥久、曹春玲、邬雪瑞、张丽艳。DB15/T 30362023 1 向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了室内向日葵黑茎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。本文件适用于室内抗向日葵黑茎病品种水平鉴定。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下
3、列术语和定义适用于本文件。向日葵黑茎病 black stem of sunflower 由黑茎病菌（Phoma macdonaldii）引起的向日葵真菌病害。注：向日葵黑斑病症状见附录A。4 病原菌制备 菌株选择 接种菌株选用当地向日葵主栽区发病株上分离到的优势病原菌（Phoma macdonaldii）菌株。培养基 PDA 培养基。病原菌培养 将保存在甘油中的黑茎病菌菌丝体接种在PDA平板上，置于20 培养箱中培养。待菌落形成后，在菌落边缘打取直径为4 mm菌丝块，接于新的PDA培养基中央进行活化培养。待菌落长到培养皿直径的80%时，打取菌落边缘的菌丝块用于接种。5 向日葵黑茎病抗性鉴定 对
4、照品种 以向日葵品种LD5009等感病品种作为对照品种。DB15/T 30362023 2 向日葵种植 将向日葵种子播种在装有无菌土13 cm13 cm的营养钵中，每个品种播种5钵，每钵播种5粒，25 2，16 h光照/8 h黑暗条件下培养，待向日葵有4片真叶时开始进行茎杆接种。接种方法 幼苗4片真叶时，在幼茎离地5 cm处，用牙签划一伤口，取黑茎病菌菌落边缘菌块（约0.5 cm）覆盖于伤口，用保鲜膜缠绕接种处保湿，每个品种接种20株，以接种PDA培养基的作为对照。25 2，16 h光照/8 h黑暗条件下培养，接种后第15 d测量茎秆上病斑长度。向日葵品种对黑茎病抗性的鉴定标准 基于被鉴定品种
5、病斑长度，按照以下公式计算相对抗性指数，以相对抗性指数评定品种的抗性级别，抗性划分标准见表 1。K=Ly-Lck X=1-K 式中：K 相对抗性指数；Ly 鉴定品种平均病斑长度；Lck对照品种平均病斑长度；X 相对抗性指数。表1 向日葵品种抗黑斑病级别的划分标准 抗病型 相对抗性指数 免疫（I）X=1 高抗（HR）0.8 X1 中抗（MR）0.4 X 0.8 中感（MS）0.2 X 0.4 高感（HS）X 0.2 DB15/T 30362023 3 A A 附录A （资料性）向日葵黑茎病症状 向日葵黑茎病首先从植株下部茎秆的叶柄基部开始发病。发病初期主要在茎秆和叶柄交界处的外表皮形成黑斑小的病斑，然后沿茎纵向扩展形成梭形或椭圆形的黑色病斑（见图A.1）。病斑水渍状，无油性。发病后期，发病处茎秆横切面韧皮部维管束全部发黑，然后病菌继续向内扩展到茎秆中的髓部，导致整个茎秆的髓部变黑，整个木质髓部呈空洞化。发病重的年份，病斑可环绕整个茎秆，造成植株的干枯和倒伏）。图A.1 向日葵黑茎病症状及危害