第七章动物实验概论优秀课件.ppt

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1、第七章 动物实验概论第1 页，本讲稿共46 页第一节实验动物生产供应管理及使用的特点 一、.实验动物繁殖生产的特点1、难以控制的繁殖规律 2、对生活环境的高度依赖3、生产成本高4、管理要求高 第2 页，本讲稿共46 页二、实验动物供应使用的特点 11、可供使用时间短、可供使用时间短 22、供应使用的规格要求千变万化、供应使用的规格要求千变万化3 3、供应使用量的峰谷落差大、供应使用量的峰谷落差大第3 页，本讲稿共46 页三、实验动物生产供应的特殊管理要求 1、与国际接轨的要求 2、国家、地方管理法规的要求 3、质量管理要求 第4 页，本讲稿共46 页四、医学研究使用实验动物的特点 医学院校科研

2、使用实验动物的通常特点是：规格严，要求高，品种多，范围广，有诸多制约因素影响动物实验的顺利开展；实验所需要的动物、品种、数量、规格、质量要求不一；实验目的、要求、方法不一；实验人员成份(有教师、医生、研究生、技术人员)不一；操作技能参差不齐；急性实验少，慢性实验多，使用时间或集中或分散，无规律可循；第5 页，本讲稿共46 页主要表现：1、使用时间的不确定性2、临时计划多 3、计划可塑性大4、科研经费不足 5、多因素的制约 第6 页，本讲稿共46 页第二节 实验动物的使用计划编制 凡涉及使用实验动物的课题，课题申报者在申报前应主动与实验动物中心取得联系，提出拟用实验动物的品种、等级、数量、规格要

3、求等的预计划，待课题正式立项后应及时编制实验动物详细使用计划，确定使用实验动物的日期，交由实验动物中心安排生产及供应。第7 页，本讲稿共46 页 报送计划的时间为：使用小鼠前3个月，使用大鼠前4个月，使用狗、兔等非自繁动物之前1个月。这样才能使实验动物生产供应部门有充裕的时间进行选种选配、繁殖生产或外出采购并按程序进行检疫和检验。计划一旦落实就必须严格执行，任何变动都将造成经济损失和时间的浪费。第8 页，本讲稿共46 页第三节 实验动物的领取或外购 一、实验动物的领取1、发放实验动物在每天规定的时间段内进行 2、根据事先所造计划提前一天通知饲养员，自觉遵守领取时间。3、领取动物必须遵守有关制度

4、，履行登记、付款手续。第9 页，本讲稿共46 页二、实验动物的购买 1、提出外购申请，经实验动物中心负责人同意；2、事先与供应单位联系并确认能够提供，并问清楚等级、价格、包装、供应方式，可供应日期；3、如果系慢性实验，则必须首先与实验动物中心签订好动物实验室的使用和代养观察协议，办妥有关手续；第10 页，本讲稿共46 页4、购 买 时 要 索 取 实 验 动 物 质 量 合 格 证、许 可 证 复印件和其他相关资料；5、选择最快、最安全、最有效的运输方式；6、遵守动物运输检验检疫法；7、如 需 要 实 验 动 物 中 心 协 助，应 事 先 支 付 足 额 费用。第11 页，本讲稿共46 页三

5、、实验动物的运输 1、运输容器 运输容器应能防止微生物污染及承受短暂性的挤压，保证实验动物的健康与安全，并能防止动物逃逸 运输无特定病原体（SPF）动物，运输箱更要加上一层特殊滤帽，以防止外界微生物的污染。运输笼盒应考虑实验动物的生理、生态和习性等因素，要特别注意，在同一运输箱内不能混合不同品种、不同性别或不同等级的动物。第12 页，本讲稿共46 页2、动物运输箱的标签 1）、收件人姓名、地址、单位及电话。2）、寄 件 人 姓 名、地 址、单 位 及 电 话（以 及 紧 急 联 络电话号码）。3）、装箱时间，运输日期、时间。4）、动物数量、性别、品种、品系、年龄等相关资料。5）、运输箱件数。6

6、）、动物健康证明或相关资料。第13 页，本讲稿共46 页3、运输工具 运输工具需要有通风和空调设备，以防运输中出现过热或过冷引起动物的反应与不适。第14 页，本讲稿共46 页4、验收动物 主管兽医或动物饲养管理人员应在对外包装消毒后小心地打开运输箱，检查动物是否有任何死亡或异样。第15 页，本讲稿共46 页四、进出口检疫 动物出入境必须取得国家出口或进口许可证，来自特定疾病疫区的动物，不能进口。依国际规范，野生猎捕灵长类动物需测试肺结核、疱疹B 病毒和其他相关传染病，确认不携带有规定的病原微生物才能引进。每当引进其他国家的实验动物（啮齿类）进入国内时，必须经国家检验检疫机构批准，确定符合要求的

7、专门场所进行饲养、检疫，且要求有健康证明文件（health certificate）。动物于检疫后，必须作定期微生物监测,确认动物健康后，才能用于繁殖生产或长期研究。第16 页，本讲稿共46 页第四节 动物实验准备与实施 第17 页，本讲稿共46 页一、动物实验的概念 动物实验是根据研究目的，恰当地选用标准的符合实验要求的实验动物，在设计的条件下，进行各种科学实验、观察、记录动物的反应过程或反应结果，以探讨或检验生命科学中未知因素的专门活动。动物实验是人类生存和发展的必要手段。第18 页，本讲稿共46 页二、实验人员的资质认定 动物实验人员应掌握实验动物科学基本知识，必须了解国家、省、市及所在

8、单位实验动物机构有关实验动物和动物实验的管理法规和制度，并能够切实遵照执行。参与动物实验的人员都必须通过所在省、市科技主管部门组织的实验动物从业人员上岗考试，并取得科技主管部门统一颁发的上岗资格证书。第19 页，本讲稿共46 页三、动物实验设计、选题的一般原则：科 学 性。即 选 题 应 具 有 明 确 的 理 论 意 义 和 实 践 意 义，符 合 科 学性 的 原 则。应 当 在 理 论 学 习、技 能 掌 握、文 献 检 索、研 究 积 累 的基础上提出假说，设计新的实验。创 新 性。创 新 性 是 科 学 的 灵 魂，选 题 能 够 探 索 生 命 科 学 中 的 未 知 事 物 或未

9、 知 过 程，或 能 揭 示 已 知 事 物 中 的 未 知 规 律，或 提 出 新 见 解、新 技 术、新方法。可行性。指选题应切合研究者的学术水平、技术水平，具备开展实验的条件，能够顺利得以实施。第20 页，本讲稿共46 页伦理原则。实 验 动 物 同 样 是 生 命 体，同 样 需 要 考 虑 伦 理 问 题。动 物实 验 设 计 应 按 照“R”原 则 进 行 评 估 和 设 计。在 满 足 研 究需 要 的 前 提 下，尽 可 能 少 用 实 验 动 物，或 寻 找 替 代 方 法；实 验 应 当 在 动 物 没 有 痛 苦 的 条 件 下 进 行，需 要 手 术 或 其他 损 伤

10、性 实 验 时，应 当 给 动 物 麻 醉 或 镇 静。实 验 后 的 动物应给予很好的护理。第21 页，本讲稿共46 页统计学考虑。动物实验设计时应充分考虑统计学原则，即对照、随机、重复的原则。在分组、例数、采用的指标等方面，都应事先考虑研究结束后的数据统计方法，以及采用这些方法在设计时需要注意的问题。第22 页，本讲稿共46 页、实验设计的几个要素（1）处理因素 人为施加不同试验条件（给受试对象以各种物理、化学或生物学刺激），以揭示生物体的内在规律。控制处理水平（如剂量、时间、强度、频率等）在合理的范围。第23 页，本讲稿共46 页（2）试验对象 选择合适的实验动物或动物组织和细胞等。必须

11、保证试验对象的一致性，试验对象应当对处理因素敏感，并且反应稳定。（3）试验效应的观察 采用适当的观察指标，包括定量指标、定性指标和半定量指标，观察动物对各种试验施加因子的反应。选择指标时应当考虑到指标的关联性、客观性、灵敏度和可用性，以提高效应观察的敏感性和特异性。第24 页，本讲稿共46 页、实验设计的原则(1)对照性原则 同体对照，即同一动物在施加实验因素前后所获得的不同结果和数据各成一组，作为前后对照，或同一动物在施加实验因素的一侧与不施加实验因素的另一侧作左右对照；异体对照，即实验动物均分为两组或多组，一组不施加实验因素，另一组或几组施加实验因素。没有对照组的实验结果往往是难以令人信服

12、的。对照应在同时同地同条件下进行。第25 页，本讲稿共46 页（2）一致性原则 一致性原则是指在实验中，实验组与对照组除了处理因素不同外，非处理因素基本保证均衡一致。这是处理因素具有可比性的前提。（3）重 复 性 原 则 重 复 性 原 则 是 指 同 一 处 理 要 设 置 多 个 样 本 例 数。重复 的 作 用 是 估 计 试 验 误 差，降 低 试 验 误 差，增 强 代 表 性，提 高 精 确 度。重 复 的 目 的 就 是 要 保 证 实 验 结 果 能 在 同 一 个 体 或 不 同 个 体 中 稳 定 地 再 现。为 此，必 须 有 足 够 的 样 本 数。样 本 数 过 少，

13、实 验 处 理 效 应 将 不 能 充 分 显示；样本数过多，又会增加工作量，也不符减少实验动物用量的原则。第26 页，本讲稿共46 页（4）随 机 性 原 则 随 机 性 原 则 就 是 按 照 机 遇 均 等 的 原则 来 进 行 分 组。其 目 的 是 使 一 切 干 扰 因 素 造 成 的 实 验 误差 尽 量 减 少，防 止 实 验 者 的 主 观 因 素 或 其 他 偏 性 误 差 造成的影响。（5）客观性原则 客观性原则是指所选择的观测指标尽可能不带有主观成分。所有观测指标尽可能便于定性定量，结果判断要以客观数据为依据。第27 页，本讲稿共46 页四、动物实验条件的准备 1、实验

14、场所 必须持有实验动物使用许可证 必须是标准化的条件，规范化的管理。第28 页，本讲稿共46 页 2、仪器、药品、试剂 仪器要校准，好用、会用；药品、试剂要提前预定，按照说明书进行配制，特别注意的是，生物试剂要在确认有合格的实验动物和其它条件都具备的情况下才可配制；各种实验器械要消毒、配套。第29 页，本讲稿共46 页 3、实验动物 实 验 动 物 是 特 殊 的 材 料，是 有 生 命 的 物 质。实 验前 应 了 解 实 验 动 物 品 种、品 系、等 级、许 可 证、动 物 质量合格证情况，进一步提交详细的使用计划。对 本 单 位 不 能 提 供 的 实 验 动 物，则 必 须 联 系

15、购买，购买的程序、要求、运输等都要认真考虑第30 页，本讲稿共46 页4、实验人员 实验人员是实验成败的关键因素。是否取得动物实验上岗资格证书 对实验内容是否熟悉 实验操作是否熟练 时间安排是否有保证第31 页，本讲稿共46 页五、预实验 检查各项准备工作是否完备 实验方法和步骤是否切实可行 测试指标是否稳定可靠 可初步了解实验结果与预期结果的距离，从而为正式实验提供补充、修正、完善的意见和经验第32 页，本讲稿共46 页六、动物实验的实施 动物实验的实施就是动物实验按照整个实验设计的技术路线付诸行动的过程。应对相关人员作出合理分工，明确职责 实验技术人员要认真履行职责，对实验过程中出现的各种

16、问题要认真分析，及时汇报，提出处理方案。实验过程中的观察结果与预期不符时，要及时作出分析和调整，避免人、财、物力的不必要浪费。在实验过程中，要敢于舍弃原设计中不尽合理的部分，仍要不断修正和完善实验方案。要对手术后的动物勤加观察，精心护理.第33 页，本讲稿共46 页七、实验记录与资料整理 1、检查资料：完整性、准确性、及时性、真实性2、设计分组：合理分组、科学分组（质量、数量分组）3、表格整理：整理、归纳 4、统计分析：统计学原理、应用软件第34 页，本讲稿共46 页八、动物实验报告与论文撰写 1、实验动物种系名称 实验动物品种、品系名称必须准确、规范，避免使用通俗称谓，如SD 大鼠不要写成S

17、D 大白鼠，昆明种小鼠应写成“KM 小鼠”（已获国际认可），BALB/c 小鼠不能写成Balb/c 小鼠，更不能写成B 小鼠。2、背景资料 动物从何处获得，遗传学分类属于哪一类，微生物等级属于哪一级，必须交代清楚。实验动物供应单位的生产许可证编号及合格证情况。避免使用模糊的描述，如将封闭群日本大耳白兔描述成纯种大白兔或纯种兔等错误概念。第35 页，本讲稿共46 页 3、性 别 和 规 格 应 准 确 描 述 实 验 所 使 用 实 验 动 物 的 雌 雄 性 别 数 量、年龄、体重等。4、动物实验条件 实验动物使用许可证编号，实验动物饲养方式（饲料来源、质量标准、饲喂方式、饮水方式、饲养密度、

18、笼具与垫料种类等），实验观察环境的级别，都应作出详尽的描述。5、动物的处理方式 动物实验使用的麻醉剂的种类、剂量与方法、给药途径与方法、动物的标本采集方式、动物的处死方式等都要尽可能注明。第36 页，本讲稿共46 页例题：综合题 u 小张已经完成动物实验，论文初稿也写好了，这是其中的部分内容：u 材料和方法u 实验动物：ICR 小白鼠共40只，体重20g，购自南通大学实验动物中心。实验鼠饲养在本实验室内，饲喂全价小鼠颗粒饲料，自由采食和饮用自来水。u 实验方法：将40只小白鼠分成4组，每组10只*。实验第7天，处死动物，*。u 请你运用所学的实验动物学知识帮助分析并进行修改。第37 页，本讲稿

19、共46 页例题：简答题u 若大鼠表现为情绪暴躁、易咬人，可能的原因是什么？u D2FVBF1 是哪一类动物？其含义是什么？u 在做动物实验时，一定要在领取实验动物后，再配制生物试剂，理由是什么？第38 页，本讲稿共46 页第五节 影响动物实验结果的因素 第39 页，本讲稿共46 页一、动物因素（一）、种属 不 同 种 属 的 哺 乳 动 物 的 生 命 现 象，特 别 是 一 些 最 基 本 的 生 命 过 程，有 一 定共 性，这 是 医 学 研 究 中 应 用 动 物 实 验 的 基 础。但 不 同 种 属 的 动 物 在 对 各 种 实验施加因子的反应上，又各有不同：1不同种属动物对同一

20、致病因素的易感性不同。2不同种属动物的基础代谢率相差很大。3不同种属动物对药物的反应有明显差异。4不同种属动物所进行的实验结果有较大的差异。第40 页，本讲稿共46 页（二）、品种、品系（三）、年龄、体重及性别（四）、生理状态（五）、健康状况 第41 页，本讲稿共46 页二、环境因素（一）温、湿度（二）气流和清洁度（三）光照（四）噪音（五）动物饲养密度（六）动物营养（七）饲喂环节（八）环境微生物 第42 页，本讲稿共46 页三、技术因素（一）、动物选择（二）、实验季节（三）、昼夜过程（四）、麻醉深度（五）、手术技巧（六）、实验用药（特性、剂型、剂量、途径、技能）（七）、对照问题（八）、实验准备

21、和实验重复 第43 页，本讲稿共46 页第六节 动物实验人员的健康与安全防护一、动物实验室内的过敏原及其防护二、物理、化学性危害及其防护三、动物实验中的生物危害及其防护四、人兽共患病的防护五、职业防护与职业道德第44 页，本讲稿共46 页第七节 实验观察动物的饲养管理 一、普通级动物实验过程中的饲养管理二、清洁级动物实验过程中的饲养管理三、SPF 级动物实验过程中的饲养管理四、无菌级动物实验过程中的饲养管理 第45 页，本讲稿共46 页饲养管理的共同要求1、来源清楚，质量合格2、实验条件、饲养观察条件与级别标准一致3、细心观察，认真记录4、精心护理、合理饮食5、防止自残、互残第46 页，本讲稿共46 页