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1、医学微生物学医学微生物学实验四实验四主要内容：主要内容：录像（肠道杆菌分离与鉴定录像（肠道杆菌分离与鉴定)肠道杆菌形态、培养特性及生化肠道杆菌形态、培养特性及生化 反应反应粪便标本分离与鉴定粪便标本分离与鉴定肥达氏反应肥达氏反应镜检（镜检（G G+球菌）球菌）培养（培养（G G+球菌）球菌）生化反应（生化反应（G G-杆菌）杆菌）血清学诊断血清学诊断动物实验动物实验核酸诊断等快速诊断核酸诊断等快速诊断细菌检查常用的鉴定方法：细菌检查常用的鉴定方法：二、肠道杆菌形态、培养特性及生化 反应 1.形态:大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌 2.培养（中国兰平板）大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆 菌、乙型副伤寒杆菌
2、、痢疾杆菌3.生化反应：（示）双糖铁基培养基 尿素培养基 蛋白胨培养基固体斜面培养基半固体培养基双糖铁基培养基成分：硫酸亚铁铵硫代硫酸钠乳糖酚红H H2 2S S试验试验乳糖发酵试验乳糖发酵试验成分：琼脂(0.35%)(动力观察)蛋白胨水葡萄糖酚红葡萄糖发酵试验葡萄糖发酵试验3.生化反应：（示）双糖铁基培养基 尿素培养基 蛋白胨培养基三、肠道杆菌分离鉴定步骤三、肠道杆菌分离鉴定步骤镜检（镜检（G G+球菌）球菌）培养（培养（G G+球菌）球菌）生化反应（生化反应（G G-杆菌）杆菌）血清学诊断血清学诊断动物实验动物实验核酸诊断等快速诊断核酸诊断等快速诊断细菌检查常用的鉴定方法：细菌检查常用的鉴
3、定方法：三、肠道杆菌分离鉴定步骤三、肠道杆菌分离鉴定步骤 1.1.粪便粪便中国兰平板中国兰平板 兰色、较大、不透明菌落兰色、较大、不透明菌落-大肠菌大肠菌 无色、较小，半透明菌落无色、较小，半透明菌落-致病菌致病菌 2.2.生化试验：生化试验：双糖铁基、尿素、吲哚双糖铁基、尿素、吲哚 3.3.血清诊断血清诊断四、肥达氏反应 1.原理：根据凝集反应的原理，用已知的标准菌液（伤寒杆菌菌体及鞭毛抗原，甲型副伤寒 杆菌鞭毛抗原及乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原）测定病人血清中有无相应抗体存在，以协助伤寒，副伤寒病的诊断。2.抗原：伤寒菌“O”、伤寒菌“H”、副甲“H”、副乙“H”3.凝集效价4.凝集判断（上清液、沉淀）“”：强，完全凝集，液体澄清，轻摇大片凝 集块。“”：大部分凝集，液体轻度浑浊，凝集块 小。“”：中强，部分凝集，液体半澄清，凝集块 颗粒状。“”：弱，少量凝集，液体浑浊。“”：不凝集，液体浑浊，和对照相同。5.结果分析 +3.生化：（示）双糖铁基,尿素,蛋白胨1.双糖铁基:上层 下层含指示剂、蛋白胨水 含指示剂蛋白胨水 琼脂（2）琼脂（0.35）纯乳糖（l）纯葡萄糖（0.2）硫代硫酸钠（0.02）硫酸亚铁铵（0.02）2.尿素3.蛋白胨