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1、离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响第1页,本讲稿共11页实验目的实验目的(Objectives):1.学习Straub法灌流蟾蜍离体心脏的方法。2.掌握K+、Ca2+离子浓度变化以及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对蟾蜍离体心脏的影响。第2页,本讲稿共11页1.1.材料与方法材料与方法(materials and methods):):1.1 1.1 实验动物实验动物 蟾蜍1.2 1.2 药品与试剂药品与试剂 任氏液、0.650.65NaClNaCl、2%CaCl2%CaCl2 2、1%KCl1%KCl、1:10000 1:10000 肾上腺素、1:10000 1:10000 乙酰胆碱、0.1%0.1
2、%阿托品、3%3%心得安。任氏液:用于维持离体蛙心长时间搏动的生理盐溶液,由氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、磷酸二氢钠和蒸馏水配置而成,其电解质、晶体渗透压、PH值与蛙的组织液相近。用于蛙类离体组织、器官的营养和湿润。第3页,本讲稿共11页1.3 1.3 仪器和装置仪器和装置1.3.1 1.3.1 器材器材张力换能器RM6240C微机生物信号处理系统第4页,本讲稿共11页1.3 1.3 仪器和装置仪器和装置1.3.1 1.3.1 仪器连接仪器连接第5页,本讲稿共11页1.4 1.4 离体蟾蜍心脏标本制备离体蟾蜍心脏标本制备1)蟾蜍毁脑毁脊髓2)仰卧位固定蟾蜍四肢3)打开蟾蜍胸腔,暴露心脏。4
3、)插管:在主动脉根部剪一斜口,将插管插入动脉圆锥,在心室收缩时将插管插入心室,结扎固定。第6页,本讲稿共11页1.4 1.4 离体蟾蜍心脏标本制备离体蟾蜍心脏标本制备 蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。蛙心脏没有营养性血管,斯氏蛙心灌流法,插管直接插入心室,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透获得的。第7页,本讲稿共11页2.2.观察项目观察项目2.1 2.1 观察正常蛙心搏动曲线,记录心率、心室收缩的幅度观察正常蛙心搏动曲线,记录心率、心室收缩的幅度2.2 2.2 更换任氏液为更换任氏
4、液为0.650.65NaClNaCl溶液,记录心率和收缩幅度。冲洗。溶液,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.3 2.3 滴加滴加2 2CaClCaCl2 2 溶液溶液1 12 2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.4 2.4 滴加滴加1%KCl 1%KCl 溶液溶液1 12 2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.5 2.5 滴加滴加1:100001:10000肾上腺素溶液肾上腺素溶液1 12 2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.6 2.6 滴加心得安溶液滴加心得安溶液1 12 2滴,观察心跳变化。滴加滴,观察心跳
5、变化。滴加1:100001:10000肾上腺素肾上腺素 溶液溶液1 12 2滴记录心率和收缩幅度。冲洗。滴记录心率和收缩幅度。冲洗。2.7 2.7 滴加滴加1:100001:10000乙酰胆碱溶液乙酰胆碱溶液1 12 2滴,记录心率和收缩幅度,冲洗。滴,记录心率和收缩幅度,冲洗。2.8 2.8 滴加阿托品溶液滴加阿托品溶液1 12 2滴,观察心跳变化。滴加滴,观察心跳变化。滴加1:100001:10000乙酰胆碱乙酰胆碱 溶液溶液1 12 2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。第8页,本讲稿共11页2.2.观察项目观察项目数据测量:数据测量:舒张期张力、张力、收缩期张力
6、、心率张力、心率收缩期张力舒张期张力第9页,本讲稿共11页3.3.结果(结果(ResultResult):):3.1 3.1 正常离体蛙心的舒张期张力为正常离体蛙心的舒张期张力为1.1g1.1g、收缩期张力为、收缩期张力为2.5g2.5g,心率为心率为34bpm34bpm。3.2 3.2 用用0.650.65NaClNaCl溶液后灌流,蛙心舒张期张力为溶液后灌流,蛙心舒张期张力为1.1g1.1g,收缩,收缩期张力为期张力为1.5g1.5g,心率为,心率为35bpm.35bpm.3.2 3.2 滴加滴加2 2CaClCaCl2 2溶液溶液1 12 2滴前蛙心蛙舒张期张力为滴前蛙心蛙舒张期张力为1
7、.1g1.1g,心,心收缩期张力为收缩期张力为2.5g2.5g,心率为,心率为34bpm34bpm,滴加后蛙心舒张期张,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为力和收缩期张力均为3.5g3.5g,心率为,心率为0bpm0bpm。3.3 3.3 滴加滴加1%KCl1%KCl溶液溶液1 12 2滴前心静止张力为滴前心静止张力为1.1g1.1g,心发展张力,心发展张力为为1.5g1.5g,心率为,心率为34bpm34bpm,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为张力均为1.0g1.0g,心率为,心率为0bpm0bpm。3.4 3.4 第10页,本讲稿共11页表表1 离子与药物对蟾蜍离体心脏活动的影响离子与药物对蟾蜍离体心脏活动的影响实验项目实验项目舒张期张力(舒张期张力(g g)收缩期张力(收缩期张力(g g)心率(心率(bpmbpm)处理前处理前处理后处理后处理前处理前处理后处理后处理前处理前处理后处理后0.65%NaCl0.65%NaCl2%CaCl2%CaCl2 21%KCl1%KCl肾上腺素肾上腺素心得安心得安+肾上腺素肾上腺素乙酰胆碱乙酰胆碱阿托品阿托品+乙酰胆碱乙酰胆碱第11页,本讲稿共11页