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1、基因工程菌的构建-基因工程载体 学习目标理解并识记基因工程制药技术中常见载体的类型可复述不同种类载体的特点利用所学知识，分析使用载体1基因工程常见载体概述2克隆载体3表达载体目录CONTENTS01-基因工程常见载体概述l 可供插入或携带外源DNA，实现外源DNA在受体细胞中的扩增或表达编码蛋白质所采用的一些DNA分子质粒plasmid 噬菌体-phage病毒DNAvirus DNA01-基因工程常见载体概述复制子选择标记MCS多克隆位点pGEM-T载体质粒图谱02-克隆载体l 用于外源DNA的扩增pUC 系列克隆载体 pBR322 克隆载体l 用于表达外源蛋白 03表达载体按来源分类原核表达
2、载体 真核表达载体 原核表达载体原核表达载体的基本结构调节序列R 启动子P SD序列 编码序列 TT转录出目标基因的mRNA强启动子弱启动子包含于核糖体结合位点l 位于起始密码子AUG上游l 与核糖体结合程度l 核苷酸组成l 与AUG距离l AUG两侧核苷酸组成l mRNA 5-端二级结构外源基因表达效率影响因素转录终止序列起始密码子 终止密码子非融合型表达载体融合型表达载体分泌型表达载体 真核表达载体真核表达载体的基本结构真核选择标记 P 编码序列 TT 增强子 polyT ori启动子加强基因转录作用转录终止序列保证新转录mRNA加上polyA的尾巴真核复制起始序列根据实验目的选择克隆或表达载体表达蛋白的方式宿主细胞种类表达产品结构和活性要求基因工程载体选择依据 总结基因片段大小是否含有合适多克隆位点感谢聆听