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1、凝胶过滤层析分离蛋白质1.掌握凝胶过滤层析的工作原理及操作方法。2.熟悉层析的基本概念和分类。实验目的实验原理层析（chromatography）是利用待分离物质中各组分的理化性质差异，使各组分集中分布在在支持物的不同区域，从而达到各组分分离的目的。又称色谱技术。层析系统的基本组成流动相流动相液体液体气体气体固定相固定相液体液体液液液层析法液层析法气气液层析法液层析法固体固体液液固层析法固层析法气气固层析法固层析法根据层析机制分为吸附层析分配层析离子交换层析凝胶过滤层析亲和层析吸附能力分配系数离子亲和力分子大小亲和力大小又名分子筛过滤、排阻层析 凝胶过滤层析（gel filtration ch
2、romatography）是利用具有一定孔径范围的多孔凝胶做固定相，对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。凝胶颗粒出样口阀门尼龙网进样口分子量大的物质 流程短、速度快、先流出分子量小的物质 流程长、速度慢、后流出实验原理凝胶过滤层析的主要应用脱盐大分子物质的分离提纯分子量测定凝胶介质的分类A.葡聚糖凝胶（商品名：Sephadex、Dextran）型号：G-10、15、25、50、75、100、150、200B.琼脂糖凝胶（商品名：Sepharsoe、Bio-gel-A）C.聚丙烯酰胺凝胶（商品名：Bio-gel-P）G后的阿拉伯数字表示吸水能力，每克干胶吸水量的10倍工艺流程图11 Page实验材料待分离蛋白混合液：蛋白血红蛋白：红色，分子量64500 二硝苯-鱼精蛋白：黄色，分子量2000-12000葡聚糖凝胶 G-50实验器材层析柱、铁架台、螺旋夹、胶头滴管、烧杯、玻璃棒、量筒等实验步骤凝胶制备装柱加样洗脱与柱清洗凝胶回收感 谢 聆 听