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1、中医药大学教案课程名称分子生物学教学对象中西医结合、针推 专业教材分子生物学、唐炳华 郑晓珂、中国中医药出版社、第3版授课内容RNA的生物合成课时2教学目的与要求掌握:复制和转录的异同点,大肠杆菌RNA聚合酶的组成,核心酶、全酶的作用。不对称转录、结构基因、模板链、编码链、有意义链、反意义链、断裂基因、外显子、内含子、核酶的概念。熟悉:RNA编辑的概念,RNA合成过程,真核生物mRNA的前体加工。真核启动子的种类和功能,基本转录因子,转录因子特异的DNA结合域(锌指、亮氨酸拉链、螺旋-环-螺旋)的结构特点。重点、 难点重点:原核生物转录起始和转录延长中的RNA聚合酶的变化;转录的基本特征及与转
2、录有关的调控元件难点:转录延长中的转录空泡形成原因;原核生物转录终止的两种机制。课型新授课教学方法讲授法、互动法、演示法、讨论法教学过程设计第一节 转录的基本特征一、真核基因转录基本条件:特异性基因转录的基本条件包括:启动子(特别是核心启动子)转录模板(转录起始点(+1)-终止点)RNA Pol普通转录因子(GTFs)(一)启动子(promoter)与基因转录启动有关的一组DNA序列,一般位于RNA poII转录起始点上游100-200bp以内,其功能是决定转录的起始点和调控转录频率启动子区域包括核心启动子和启动子上游近侧序列:1、核心启动子(core promoter)是决定转录起始位置的关
3、键序列,也是普通转录因子TFD的结合位点,TATA盒(TATA box) 位于转录起始点上游-25-30bp起始子(initiator,Inr) Inr是与转录起始位点重叠的短的较保守序列注:不是所有基因都含有TATA盒或Inr序列有的只有其中之一,有的两者都无这些核心启动子的序列和它们之间的间隔多变2、上游启动子元件(Upstream Promoter element,UPE)位于较上游(-30一-110bp),能较强影响转录起始的频率,如CAAT 盒和GC盒其中GC盒是转录因子SPl的结合位点。(二)RNA聚合酶负责真核生物蛋白编码基因的转录(产物mRNA),有7-10个亚基,最大亚基的羧
4、基末端结构域(CTD)具有7个氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser -Pro-Set)的重复序列,其中有多个磷酸化位点CTD磷酸化对调控基因转录有重要作用教学过程设计(三)基础转录因子(basal transcription factor)真核基因转录除RNA聚合酶外还需要许多蛋白因子转录因子参加,其中一些转录因子是RNA聚合酶转录起始必需的,并且可以维持基础水平的转录,因此称为基础转录因子或普通转录因子(general transcription factor)1RNA聚合酶 II的普通转录因子(TF II)包括TFIID,TFB,TFIIF,TFIIE,TFIIH,TFIIA等T
5、FIID是由TATA盒结合蛋白(TATA binding protein,TBP)和8种TBP协同因子(TBP associated factor,TAF)组成的复合物,TFIID可识别和结合核心启动子(TATA盒和Inr);TFB的C端与TFIID和DNA的复合物结合,N-端与TFF协同作用募集RNA聚合酶II,再加上TFIIE,TFIIH形成完整的转录复合物TFIIH有蛋白激酶活性,可使RNA Pol最大亚基CTD磷酸化,使转录起始过渡到转录延伸 TFIIA有助于TFIID与TATA盒核心启动子结合复习思考题1. 什么是转录、转录与复制的区别在于?2. 什么是启动子,启动子的结构是怎样的?
6、3. 什么是转录因子,转录因子的作用是?参考文献1. 唐炳华、王继峰主编的医学分子生物学(规划教材第九版,中国中医药出版社,2016年2. 查锡良主编. 医学分子生物学. 第1版. 出版地:人民卫生出版社,20053. 药立波主编. 医学分子生物学. 第3版. 出版地:人民卫生出版社,20084. Wei C, Li M, Qin J, Xu Y,et al. Transcriptome analysis reveals the effects of grafting on sweetpotato scions during the full blooming stages. Genes Genomics. 2019 Apr 27. doi: 10.1007/5. Lin G, Weiss S, Vergara S,et al. Transcriptionwith a Laser: Radiation-Damage-Free Diffraction ofRNAPolymerase II Crystals. Methods. 2019 Apr 25. pii: S1046-2023(18)30310-4.课后记