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1、ZHONGGUOYIXUEZHUANGBEI 2学术论著Improvement of Widals test/Sun Mingjie,Zhao Dong,Pan Ji,Wang Ke,Gao Yan/China Medical Equipment,2009,6(5):25-27.首都医科大学 病原生物与免疫学实验室 北京 100069Abstract Widals test is a traditional experiment in teaching of Medical Immunology.It has been conducted using test tubes for a long
2、 time.We designed the experiment to improve the program by carrying out microdilution dye incorporation.Consequently,the experimental method simpler and more time-saving.Key words Widals test;Experiment improvement;Trace hemagglutination plateFirst-authors address Laboratory of Pathogic Biology and
3、Immunology,Capital University of Medical Sciences,Beijing 100069,China.肥达氏反应试验的改进摘要 肥达氏反应试验是医学免疫学学生实验课中的一个传统实验，长期以来大多采用试管法来观察结果。针对该法存在的一些问题，我们设计改进了实验方案，用微量染液掺入法，使实验方法更简便，结果观察更清晰，同时又节省了大量的实验费用。关键词 肥达氏反应；实验改进；微量血凝板法尽量采用Ghost6等专门克隆软件对硬盘进行克隆。恢复数据时，一般采用专门的一套可引导系统，根据情况尽量在DOS环境下操作。操作过程中一定避免对磁盘的写入操作，选择的恢复软件
4、，要确保每一步操作都可逆或对故障硬盘是只读的。要预先计划好恢复后数据存放的位置，并且硬盘空间足够。6 结束语数据恢复技术是一门新兴学科，在解决硬盘数据丢失问题方面是行之有效的，能将用户的损失降到最低，在医院数字化建设中起到了数据安全底线的作用。虽然恢复数据有这么多有效的方法，但数据恢复在工作中仍是迫不得已的办法。因为数据一旦被破坏很难在第一时间完成正确的数据恢复，数据恢复的完整性和正确性很难100保证。其实做好备份是解决数据丢失的最根本、最有效的方法，数据恢复也是最简单和最成功的。最好的数据恢复手段就是及时计划备份数据库和日志、文件文档等重要数据，才能真正做到有备无患。张喜雨,季克峰,徐红.医
5、院数字化建设之探讨J.医疗设备信息,2004,19(12):39-40.戴士剑,涂彦晖.数据恢复技术M.第2版.北京:电子工业出版社.2005.王晓燕.浅析计算机数据恢复技术J.太原大学学报,2007,8(3):140-143.甄 保 社,马 骏 涛,陈 庚 云.数 据 恢 复软 件 的 应 用 J .中 华 医 学 图 书 情 报 杂志.2004,13(1):54-56.范 丽 雅,王 万 森,关 永.数 据 库 中 数据 恢 复 的 研 究 J .计 算 机 工 程 与 设计,2008,29(3):563-565.汪兆来.Ghost软件在医学工程领域中的应用J.医疗卫生装备,2008,29
6、(12):81-83.参考文献 1 23 4 5 6 收稿日期：2009-01-24中国医学装备2009年5月第6卷第5期 China Medical Equipment 2009 May Vol.6 NO.52 ZHONGGUOYIXUEZHUANGBEI学术论著1 实验原理肥达氏反应试验是根据凝集反应的原理，用已知的伤寒杆菌鞭毛抗原（H）及菌体抗原（O）、甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原（A）、乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原（B）与病人血清作定量凝集试验，以协助诊断肠热症。12 改进前的方法2.1 材料与仪器材料：伤寒杆菌鞭毛抗原（H）、伤寒杆菌菌体抗原（O）、甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原（A）、乙型副伤寒杆菌鞭
7、毛抗原（B），来源于中国生物技术集团公司兰州生物制品研究所，血清来源于首都医科大学病原生物与免疫学实验室自制，0.9%生理盐水来源于石家庄四平有限公司，洁净试管，吸量管，皮头，试管架。仪器：HPX-9162MBE型电热恒温培养箱。2.2 方法标记：将试管架上放的4排小试管，每排9支，共36支分别作好标记。稀释待检血清：取一中试管，加生理盐水3.8 ml和血清0.2 ml，充分混匀，此时血清稀释度为1:20，吸此血清2 ml分别加入每排的第1支试管中，每管0.5 ml。此时中试管内剩余稀释血清2 ml，再加入生理盐水2 ml，使之稀释成1:40。再加入每排的第2支试管中，每管0.5 ml。以此类
8、推，将中试管内剩余血清依次做倍比稀释，并依次将稀释血清加至每排38支试管中，从第8支试管中弃去0.5 ml稀释血清，则每排各管的血清稀释度为1:20，1:40，1:80，1:160，1:320，1:640，1:1280，1:2560。每排第9支试管不加血清，只加0.5 ml生理盐水作为对照。加入抗原：由第9管开始向前加入抗原：第1排各管加入伤寒杆菌鞭毛抗原(H)稀释菌液0.5 ml。第2排各管加入伤寒杆菌菌体抗原(O)稀释菌液0.5 ml，第3排各管加入甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原(A)稀释菌液0.5 ml，第4排各管加入乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原(B)稀释菌液0.5 ml。此时各管的血清稀释度又各增加
9、一倍，依次为1:40，1:80，1:160，1:320，1:640，1:1280，1:2560，1:5120。每管总量1 ml。孵育：振荡混匀，置37电热恒温培养箱中1824 h后取出。22.3 结果要注意轻拿轻放，否则会影响结果的观察。从试管架中逐个取出观察试管底部的结果并记录，见图1所示。图1 改进前的肥达反应试验3 改进后的方法3.1 材料与仪器材料：伤寒杆菌鞭毛抗原（H）、伤寒杆菌菌体抗原（O）、甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原（A）、乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原（B），来源于中国生物技术集团公司兰州生物制品研究所，血清和染液（革兰染液第一液），均来源于首都医科大学病原生物与免疫学实验室自制，0.9%
10、生理盐水来源于石家庄四平有限公司，一次性U型96孔血凝板来源于欣经科生物技术有限公司，微量加样器。仪器：HPX-9162MBE型电热恒温培养箱。3.2 方法标记：在试验的每排第1孔前分别标上H、O、甲、乙即可。稀释血清：先将生理盐水分别加入每排28孔各50l，然后将已稀释成1:20的血清分别加入每排的12孔各50l，作倍比稀释各排均从第2孔中吸取50l稀释血清加入第3孔混匀，再从第三孔中取50l稀释血清加入第4孔混匀，依次稀释至第7孔。从第7中国医学装备2009年5月第6卷第5期 肥达氏反应试验的改进-孙明洁等ZHONGGUOYIXUEZHUANGBEI 2学术论著朱立平，陈学清.免疫学常用实
11、验方法M.北京:人民军医出版社,2000.管远志，王爱琳，李坚.医学微生物学实验技术M.北京:化学工业出版社，2006.刘水平，邬国军.医学微生物学实验指导M.北京:世界图书出版公司，2002.霍立新.肥达反应试验的快速法检验医学与临床论文J.检验医学与临床，2007(5):431.刘凤云，常世勤.快速微量法测定肥达氏反应J.洛阳医专学报,2001,19(4):333.熊琛，孙各琴，杨靖,等.快速肥达反应的实验研究与临床应用J.中国实验诊断学，2002(6):58-59.陈桂凤,张文平,胡雅琼,等.肥达氏反应教学实验新方法J.微生物学通报，2005,32(2):138.参考文献 1 23 4
12、5 6 7 收稿日期：2009-02-17孔弃去50l稀释血清，第8孔不加血清，留作抗原菌液对照。加入抗原：各排18孔分别加入与标记相应的含有染液的抗原菌液每孔50l，此时各孔液体总量为100l，第17孔血清最终稀释度为1:40、1:80、1：160、1:320、1:640、1:1280、1:2560。孵育：振荡混匀，放入塑料袋中，置37电热恒温培养箱中1824 h后取出。3-43.3 结果 阳性结果表现为液体澄清，有紫色细颗粒，均匀平滩于整个孔底；阴性表现为紫色菌体沉积于孔底呈圆点状，与菌液对照相同。见图2所示。图2 改进后的肥达反应试验特性试验改进前试验改进后方法试管法微量染液掺入法试剂用
13、量每支试管用量1000l每孔用量100l试验用具所用洁净试管课前准备课后洗刷工作量较大，试验前要每管都作标记一次性微型板用后扔掉，只在试验的每排前作标记即可结果观察需要1管1管的轻拿轻放观察试管底部的结果并记录结果清晰，一目了然，便于记录试验时间30 min10 min表1 试验改进前后的对比4 结论肥达氏反应采用微量染液掺入法取代传统的试管法，具有如下优点，见表1所示。方法，从上表可见改进前后的变化，通过从方法上的改进使试剂的用量较以往节省了10倍，解决了需大量试剂的问题，节省了教学经费。试验用具从烦琐到简便，解决了需大量洁净试管和大量标记的问题，减少了大量的课前准备和课后洗刷工作。结果观察
14、直观清晰可见易于判断结果，解决了试管法易摇动而影响结果观察的问题。整个试验操作简便时间大幅度缩减。4-5此试验已试用于部分本科生实验课教学中，受到了师生们的一致好评。准备正式开进实验课中，每年要有1000多学生做此试验，它的效果是可想而知的。本试验的改进，使学生们也从理论课的学习到走进实验室懂得了只要学好基础理论，试验方法是可以不断进行更新改进的，举一反三灵活运用，为以后的学习研究打下良好的基础。除此之外，本试验也可用于临床检验，它可通过试剂费用的下降来降低病人的费用，通过方法的改进减轻检验人员的工作量和缩短实验时间等6-7。总之，通过试验方法的改进使试验向前提了一大步，要想再提高可向结果观察上更规范更科学化发展，来取代肉眼观察容易产生的误差问题。5 讨论采用微量染料掺入法代替传统的肥达氏反应实验中国医学装备2009年5月第6卷第5期 肥达氏反应试验的改进-孙明洁等