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1、兽医药理学实验教案1.兽医药理学实验基本规定1 .1明确药理学实验课的目的兽医药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。其目的为：（1）通过实验，使学生掌握药理学实验的基本技能，进一步获得药理学知识和科学的方法；（2）验证药理学和中药药理学中某些重要的基本理论,更牢固地掌握药理学的基本概念。通过实验，培养学生对科学工作的严厉态度、严格的规定、严密的工作方法和实事求是的作风，并训练学生能客观地对事物进行观测、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。1 .2药理学实验课的规定药理学实验课涉及实验操作、整理实验结果、写实验报告等环节。为了提高实验效果，达成上述目的，规定作到下列事项：（1）重视预习
2、实验前应仔细阅读实验指导，了解实验的目的和规定、方法和操作环节，领略其设计原理，以做到心中有数，避免实验中出现忙乱和差错。（2）加强基本技能训练 实验时要在教师指导下，培养独立操作能力，克服依耐性和怕脏、怕动手等不良现象；并认真细致地观测实验过程中出现的现象，随时记录药物反映出现的时间、表现以及最后恢复情况，联系理论进行思考分析。（3）客观地记录和整理实验结果 药理学实验结果有记录仪描记的曲线，测量资料（如血压、心率、瞳孔大小、睡眠时间等数据）和记数资料（如动物死活数、阳性或阴性反映等）。要如实准确地对观测到的数据及时加以记录，决不能凭主观想象或书本理论知识代替实验观测到的客观事实。实验完毕，
3、对结果分别加以整理，记录的曲线要加以剪裁或复制，并注明动物的种类、体重、性别、日期、实验题目、给药剂量和途径。测量和记数资料应酌情列表和画图，以便比较，使结果一目了然。（4）认真书写实验报告写实验报告可以培养同学分析和综合概括问题的能力，亦是训练用文字表达的一种重要手段。每次实验后规定用统一的实验报告本写报告，交负责老师评阅。在实验报告中规定列出实验题目、实验方法和实验结果。有时可对实验结果产生的机理或异常的因素加以分析，但不可离开实验去抄书。最后把实验结果加以概括性总结，并写成结论。要注意科学性和逻辑性，不要单纯地反复实验结果，也不要超过验证范围任意扩大。文字要简练、工整。1.3遵守实验室规
4、则(1)保持肃静、整洁，以发明良好的学习环境。(2)分工合作，认真、仔细、有条不紊地进行实验。实验前、后应清点仪器，必须了解器材的性能后才使用，不得任意拨动仪器的开关和旋扭。(3)厉行节约。按实验需要取用动物，不得多拿；对动物要爱惜，用毕放回指定的笼内，死亡动物和废物丢入指定场合；玻璃仪器应轻取轻放；药品按使用量吸取，不得污染。实验完毕要整理器材，洗净擦干，妥善放置；如有破损应报告指导老师，以酌情解决。(4)注意安全，严防触电、火灾、动物咬伤及中毒等事故的发生。(5)搞好清洁卫生，关好门窗、水电后才干离开实验室。2.常用实验动物的捉持和给药方法实验一、小白鼠的捉持和给药方法一、捉持方法右手提起
5、鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻向后拉其尾,此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定.腾出右手，可以给药(图1)。此外，也可单手捉持，难度较大，但速度快。先用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定(图2)。图1图2图8-1 小白鼠的捉持法二、给药方法1.灌胃法 小鼠固定后，使腹部朝上，颈部拉直，右手用带灌胃针头的注射器吸取药液(或事先将药液吸好)，将针头从口交插入口腔，再从舌背进沿上腭进入食道(图3)。若遇阻力，应退出后再插，切不可用力过猛，防
6、止损伤或误入气管导致动物死亡。灌胃量一般不超过0.25ml/10g。2.腹腔注射法 抓鼠方法同上，右手持注射器（5 6号针头），从耻骨联合上一侧向头端以3 0。角刺入腹 腔（应避开膀胱）。可先刺入皮下2 3 m m,再刺入腹腔，以防药液外漏（图4）。针头刺入部位不宜太高太深，以免刺破内脏。注射量一般为0.1 0.2 5 m l/1 0 g。图3 小白鼠的灌胃法 图4 小白鼠的腹腔注射法3.皮下注射法 一般两人合作。一人左手抓住小鼠头部皮肤，右手拉住鼠尾；另一人左手提高背部皮肤，右手持住注射器（针头号同上），将针头刺入提起的皮下（图5）。若一人操作，左手小指和手掌夹住鼠尾，拇指和食指提起背部皮肤
7、，右手持注射器给药。一般用量为0.0 5 0.2 5 m l/1 0 g。图5小白鼠的皮下注射法 图6小白鼠的尾静脉注射法4.肌肉注射法 两人合作时，一人抓鼠方法同上，另一人左手拉直一侧后肢，右手持注射器，注射部位多选后腿上部外侧（针头号同上）。如一人操作，抓鼠方法类似腹腔注射，只是药液注射在肌肉内。每腿的注射量不宜超过0.1 m L5.尾静脉注射法 将小鼠置于待置的固定筒内，使鼠尾外露，并用酒精或二甲苯棉球涂擦，或插入5 0 C温水中浸泡半晌，使尾部血管扩张。左手拉尾，选择扩张最明显的血管；右手持注射器（4 5号针头），将针头刺入血管，缓慢给药。如推注有阻力并且局部变白，说明针头不在血管内，
8、应重新插入。穿刺时宜从近为尖部1/3处静脉开始，以便反复向上移位注射（图6）。一般用药量为0.1 0.2 m l/1 0 g,不宜超过0.5 m l y 1 0 g。实验二、家兔的捉持和给药方法一、捉持方法一般左手抓住兔颈背部皮肤，将其提起，右手托住臀部称坐位姿态。不要抓两耳，以防兔挣扎。二、给药方法1.耳缘静脉注射法 一人操作时，将兔放入固定箱或实验台上,选好耳缘静脉（在耳背的下缘），拔除局部的毛,用酒精棉球涂擦,并用食指轻弹耳壳,使血管扩张.用左手的食指和中指夹住耳根部,拇指和无名指夹住耳尖部拉直右手将抽好药液的注射器（6-7号针头）阵头刺入血管,用拇指和食指使针头和兔耳固定,将药液推入.
9、如针头在血管内,推注轻松,并可见血液被药液冲走如不在血管内，则推注有阻力,耳局部变白或肿胀，应立即拔除重新注射.注射完毕,则用手指或棉球压在针眼上,再拔出针头，并继续按压半晌,防止出血（图1）如两人操作，-人夹住兔子，右手暴露血管，压住耳根部使血管充盈，另一人注射给药。图 1图 22.灌胃法 两人合作，一人坐下，两腿夹住兔身，左手固定兔耳，右手抓住前肢；另一人将开口器从嘴角插入口腔，压在舌上，并向后翻转几下，使兔舍伸直。取 8 号导尿管由开口器中部的小孔插入食道约15cm。如插入气管，兔子则剧烈挣扎、呼吸困难。也可将导尿管外端浸入水中，不见气泡则表达插在胃中。插好后，把注射器接在导尿管上，将药
10、液推入。再注入少量空气，使导尿管中所有药液进入胃内（图 2）。灌完药液后，先慢慢抽出导尿管，再取出开口器。一般用药量为520ml/kg。3.腹腔、肌肉、皮下注射法 基本同小白鼠，唯针头可稍大（6 7 号），给药量可稍多，一般腹腔为1.0 5.Oml/kg,肌肉、皮下为 0.51.Oml/kg。4.眼结合膜内给药法 将兔固定在兔箱内或夹在腋下，左手拇指和食指拉开兔下眼睑成杯状，中指压住眼内眦，以防药液由鼻泪管流入鼻腔内而被吸取。滴入药液12 滴，将下眼睑向上合拢，使眼球充足接触药液。约 Imin后将手放开，让药液自然流出。实验三、大白鼠的捉持和给药方法一、捉持方法大白鼠比小白鼠袭击性强，不要忽然
11、袭击去抓它，以免被咬伤。捉持前先戴上手套，右手夹住尾巴，放在粗糙面上；左手拇指和食指捏住颈及前颈部，其余三指握住整个身体。有力适当，过松容易挣脱而被咬伤,但用力过大会使其窒息死亡。二、给药方法类似于小白鼠，只是工具和用药量大点，静脉给药除尾静脉注射外还可舌下静脉给药。3.药理学总论实验实验一、药物的基本作用【目的】1.了解药物的兴奋作用和克制作用；局部作用和吸取作用等。2.观测硫喷妥钠的抗惊厥作用。【材 料】器材：5、1 0 m l注射器、普通剪药品：5%普鲁卡因溶液、2.5%的硫喷妥钠溶液动物：家 兔1只【方法】取家兔1只，称体重。先观测正常活动情况，如四肢站立和行走姿态；并用针刺其后肢，测
12、其有无痛觉反射。然后于一侧坐骨神经周边（使家兔作自然俯卧式，在尾部坐骨喳与股骨头间摸到一凹陷处）注入5%普鲁卡因溶液l m l/kg（5 0 m g/kg）,观测同侧后肢有无运动和感觉障碍；待局部作用明显后（2-3分钟），在 将l m l/kg5%普鲁卡因溶液注入肌肉。待出现中毒症状（惊厥），立即由耳缘静脉缓慢注射2.5%的硫喷妥钠溶液至肌肉松弛为止（约0.5 m l/kg）【注意事项】1 .测试痛觉反射针刺后肢踝关节处，轻度适中。2.定坐骨神经部位时后肢拉直，在坐骨崎与股骨头间摸到一凹陷处即是。注射部位尽量靠近股骨头，针尖插到骼骨稍回退一点。3,普鲁卡因注于坐骨神经周边，可产生传导阻滞，剂量
13、过大或误入血管可致中毒，重要表现有中枢先兴奋后克制，如不安、惊厥、昏迷、呼吸克制等。【思考题】根据实验观测，分析药物的基本作用：1 .药物的兴奋作用和克制作用表现有那些？2.哪些表现是药物的局部作用？哪些表现是药物的吸取作用？3 .普鲁卡因的选择作用表现在哪些方面？4.哪些是治疗作用？哪些是不良反映？5.有没有观测到药物的拮抗作用？实验二、剂量对药物作用的影响【目的】观测不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。【材料】器材：天平、1 m l注射器药品：0.1%、0.2%、0.4%戊巴比妥钠溶液动物：小白鼠3只【方法】取小鼠3只，以苦味酸溶液涂毛作不同记号。称其体重及观测小鼠正常时的活动情况。各鼠经
14、腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠溶液0.2m l/1 0 g,分别置于小笼中，密切观测先后出现的反映。【结果】鼠号 标记 体重 剂量现 给药后表现(g)(m g/k g)(S)潜伏期 给药前表123【注意事项】1 .小鼠对戊巴比妥钠也许出现的反映，按由轻到重限度有：活动增长、呼吸克制、翻正反射消失、反射亢进、麻醉、死亡等。2.比较各鼠所出现反映的限度和发生快慢。【思考题】r 解药物的剂量和作用的关系对于进行药理学实验和临床用药有何重要意义？实验三、不同给药途径对药物作用的影响【目的】观测不同给药途径对硫酸镁作用的影响【材料】器材：天平、1 m l 注射器、小鼠灌胃针头药品：1 5%的硫酸镁水溶液动
15、物：体重相近的小白鼠2 只【方法】取小白鼠2 只，一只由腹腔注射1 5%的硫酸镁水溶液0.2m l/1 0 g (3.0 g/k g)；另一只用同样剂量的硫酸镁水溶液灌胃。分别置小笼中，观测两鼠的表现，并记录结果。【结果】(g)(m l)鼠号 标记 体重 剂量现 给药后表现给药途径 给药前表12【注意事项】1 .掌握对的的灌胃操作技术，不要误入气管或插破食管，前者可致窒息，后者可出现如同腹腔注射的吸取症状，重则死亡。2.注射后作用发生较快，需留心观测。【思考题】给药途径不同时，药物的作用为什么有的会出现质的差异，有的会出现量的不同？实验四、肝脏功能状态对药物作用的影响【目的】观测肝功能损伤对戊
16、巴比妥钠作用的影响【材 料】器材：天平、1 m l注射器、小鼠观测木盒或鼠笼药物：5%四氯化碳油溶液、0.3%戊巴比妥钠溶液动物：小 白 鼠4只【方法】取正常小鼠和肝功能已破坏的(实验前48小时皮下注射5%四氯化碳油溶液0.l m l/1 0 g)小鼠各2只，称其体重。分别由腹腔注射0.3%戊巴比妥钠溶液0.1 5 m l/1 0 g (45m g/k g),比较小鼠麻醉时间(以翻正反射消失为指标)。实验结束时将小鼠拉断颈椎处死，剖取肝脏，比较两组动物肝脏外观的不同。【结果】组别鼠号 体 重(g)药 量(m l)潜 伏 期(S)维持时间(m i n)肝脏肉眼观测正常组12损伤组34【注意事项】
17、1.如室温在2 0 以下，应给麻醉小鼠保暖，否则动物将因体温下降，代谢减慢而不易清醒。2 .四氯化碳是一种肝脏毒物，其中毒动物常被作为中毒性肝炎的动物模型，用于观测肝脏功能状态对药物作用的影响及筛选和实验肝脏功能保护药。其油溶液可用植物油配制；亦可用甘油配成5%的制剂，实验 前2 4小时皮下注射0.0 8 m l/1 0 g。3.四氯化碳中毒小鼠的肝脏比较肿大，有的充血，有的变成灰黄色，触之有油腻感，其小叶比正常肝脏更清楚。【思考题】1 .为什么损害肝脏的小白鼠注射戊巴比妥钠后作用时间延长？2 .讨论肝脏功能与临床用药的关系？3 .亦可用硫喷妥钠45m g/k g 代替戊巴比妥钠。实验五、药物
18、作用的个体差异及常态分布规律【目的】了解药物反映的个体差异和常态分布规律【方法】将全班各实验小组在实验2.4 中正常小鼠腹腔注射戊巴比妥钠后翻正反射消失连续时间数据集中，按下表进行记录，以了解药物反映的个体差异。翻正反射消失连续时间（m i n）3 0 以下 3 0-6 0 6 0-9 0 9 0-1 2 0 1 2 0-1 50 1 50-1 8 0 1 8 0 以上小鼠数（只）再以翻正反射消失连续时间组距为横坐标，每个组距内的小鼠数为纵坐标，仿照示例绘制直方图，观测各组距内的小鼠数是否呈常态分布。【思考题】药物反映的个体差异规律对于判断药理实验和临床上用药治病的结果有何指导意义？4 .传出
19、神经系统药物实验实验一、拟胆碱药和抗胆碱药对家兔瞳孔的影响【目的】观测阿托品和毛果芸香碱对瞳孔的影响。【材料】器材：家兔固定盒、瞳孔测量尺、1 m l 注射器动物：家 兔 1 只【方法】取无眼疾的家兔1 只，自然体位置于兔固定盒内，测两侧瞳孔的大小。然后用注射器向两侧眼结膜囊中滴入1%硫酸阿托品溶液3 滴，另一侧滴入1%的硝酸毛果芸香碱溶液3 滴。给药后l O m i n,再测其瞳孔大小。最后，将两药互换滴入，给药后l O m i n,反复测量瞳孔大小。【结果】兔眼滴入药物给药前瞳孔直径（m m）第一次 第二次给药后第一次 第:次左右硫酸阿托品 毛果芸香碱毛果芸香碱 硫酸阿托品【注意事项】1.
20、滴药液时，要把下眼睑拉成杯状，同时压迫内眦部，以免药液经鼻泪管流入鼻腔而吸取。待 滴 药 后Imin,再将手放开。2.测量瞳孔时，请勿触及角膜。3.实验始终，规定兔头朝一个方向固定，以免由于光强度的变化影响结果。【思考题】滴入毛果芸香碱及阿托品后，瞳孔为什么有不同的变化？假如将毛果芸香碱换成毒扁豆碱，结果会如何？为什么？实验二、敌百虫的中毒及其解救【目的】观测敌百虫中毒的症状及阿托品、解磷定作用。【材料】器材：1ml、5ml注射器、测瞳尺药品：5%精制敌百虫溶液、0.2%硫酸阿托品溶液、2.5%解磷定溶液动物：家 兔1只【方 法】1.取 家 兔1只，称重。分别观测并记录活动情况、呼 吸(频 率
21、、幅度、节 律 是 否 均 匀)、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等。2.给家兔腹腔注射5%精制敌百虫4.0ml/kg(100mg/kg).随时观测，并记录上述各指标的变化。待中毒症状明显后，立即耳缘静脉注射0.2%硫酸阿托品溶液1.0ml/kg(2.0mg/kg)观 测 上 述 指 标 的 变 化。3.耳缘静脉注射2.5%解磷定溶液2.0!11/1(50mg/kg)。观测上述指标的变化。【结 果】【注意事项】观测阶段活动情况呼吸情况瞳孔大小唾液分泌大小便次数及形状肌张力及震颤给药前给敌百虫后给阿托品后给解磷定后1.有机磷农药为剧毒药，切勿污染。如 手 接 触1605后，可用肥皂
22、水清洗，但敌百虫则不能用碱性物。2.本实验为分析阿托品和解磷定的解救机制而设计的，临床上须将两药合用，才干获得最佳的效果。3.有机磷农药静脉注射时中毒症状发生块，抢救需及时。假如1605采用带小鼠灌胃针头的注射器，有家兔的嘴角滴入口腔，则潜伏期稍长，中毒症状的观测更明显。敌百虫亦可改用腹腔注射给药。这样还能保存耳缘静脉以备抢救注药。如经15-20min尚为出现中毒症状，可追加1 /3量。【思考题】有机磷农药中毒的机制是什么？阿托品和解磷定为什么能抢救有机磷农药中毒？在临床上如何应用？实验三、乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的影响【目的】观测乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的作用，分析其作用原理。学
23、习离体器官的测定方法【材料】器材：离体器官测定仪、木槌、手术刀、手术剪、1ml注射器药品：IX 10%乙酰胆碱溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、10%氯化钢溶液，台式液动物：家兔1只【方法】1.离体肠管的制备 取体重为2.0 kg左右的家兔1只，用木追击枕骨处死，迅速剖腹，取空肠和回肠的上端，置于盛有冷的台式液的器皿中，沿肠壁分离肠系膜，并将肠管剪数段，轻压出肠内容物，并冲洗干净,将肠管剪成23厘米的小段备用。2.安装离体肠管实验装置 打开离体器官测定仪，调整状态，让浴槽温度维持在36.5土0.5。在肠管两端结扎穿线，一端系于通气钩上，然后放入盛有40ml台式液的浴槽中，另一端系于测定仪的换能器上
24、，并连接记录仪。给肠肌约2g左右的前负荷，并调节通气速度(约2个气泡/s),稳定30min后，调整记录仪的走纸速度，描记肠肌正常活动曲线。3.加药：用注射器依次向浴槽中加入下列物质，描记曲线变化。(1)1X 10 5M乙酰胆碱溶液0.1-0.2 n d,当肠管显著收缩后，再加入(2)0.1%硫酸阿托品溶液0.1 m l,当记录曲线下降到基线后再加入：(3)1X 10%乙酰胆碱溶液0.1-0.2 m l,如作用不明显，接着追加：(4)10%氯化钢溶液0.1 m l,待作用稳定后，立即加入：(5)0.1%的硫酸阿托品溶液0.1ml【结果】剪下肠管收缩曲线，分析比较其作用。【注意事项】1.剪取家兔肠
25、管及冲洗、挂线等操作必须轻柔。2.肠管两端穿线时切勿将肠腔缝死。3.浴槽中液体，根据浴槽大小而定，应覆盖肠管。【思考题】用受体学说分析阿托品为什么能对抗乙酰胆碱对肠管的收缩作用？5.中枢神经系统药物实验一、巴比妥类药物的催眠作用时间和强度的比较【目的】比较儿种巴比妥类药物对动物作用强度和维持时间的长短【材料】器材：2ml、5ml注射器、婴儿秤、兔笼、秒表药物：1%硫喷妥钠溶液、3%戊巴比妥钠溶液、3%苯巴比妥钠溶液、苦味酸溶液动物：家兔3 只(1.5-2.0 kg)【方法】取健康家兔，称重，编号。观测各兔正常活动及翻正反射情况。按家兔体重经耳缘静脉给药。1号家兔给1%硫喷妥钠溶液lml/kg(
26、10mg/kg),2 号家兔给3%戊巴比妥钠lml/kg(30mg/kg),3 号家兔给3%的苯巴比妥钠lml/kg(30mg/kg)。药后观测翻正反射消失时间及恢复时间，按下表记录。【结果】免号体重(kg)药物与剂量(iv)翻正反射时间给药消失时间恢复时间作用特点123【注意事项】1.注药时不宜太快，特别是硫喷妥钠。2.进行本实验时需保持环境安静。【思考题】根据实验结果讨论上述巴比妥类药物作用强度、快慢、欠缺的差别及因素。实验二、安定抗士的宁惊厥作用【目的】观测安定对士的宁中毒动物的解救作用。【材料】器材：1ml与0.5m l注射器、小儿头皮针、大烧杯或玻璃钟罩、天平、鼠笼药品：0.1%或0
27、.2%士的宁溶液、0.25%或0.5%安定溶液、生理盐水、苦味酸溶液动物：小白鼠2只或家兔2只【方法1】取小白鼠2只，各于腹腔注射0.1%士的宁溶液0.010.015ml/10g体 重(11.5 m l/k g),其中一只接着注射0.25%安定溶液0.10.15ml/10g(25-37.5m g/kg)另一只注射生理盐水，观测两鼠的反映情况。【方法2】取家兔2只，与先在耳缘静脉插入头皮针，然后各兔腹腔注射0.2%士的宁溶液0.5m l/kg(lm l/kg),待出现强直性惊厥后，一只耳缘静脉注射0.5%安定溶液0.5nd/kg(25mg/kg),另一只则由耳缘静脉注射生理盐水0.5ml/kg,
28、记录两兔最后表现情况。【结果】动物号(鼠、兔)体 重(g或kg)药物与剂量反映情况1生理盐水 ml%士的宁ml2%士的宁ml%安定ml【注意事项】1.苯实验亦可仅用1只家兔，不用生理盐水对照，以节约动物。2.右侧腹腔注射部位不宜太高，进针不宜过深。3.士的宁亦可按0.4mg/kg由耳缘静脉给药。士的宁致惊厥作用快，要事先准备好安定。4.有的动物，安定一次注射量不够，可适当加量。【思考题】安定为什么能解救士的宁所致的惊厥？实验三、氯丙嗪对小白鼠激怒反映的影响【目的】观测氯丙嗪的安定作用【材料】器材：Y S D-4型药理生理多用仪及其附件激怒盒、注射器、天平、鼠笼药品：0.1%盐酸氯丙嗪溶液、生理
29、盐水、苦味酸溶液动物：小白鼠（异笼喂养，雄性，体重在2 5 g左右）4只。【方法】多用仪的使用方法见附录。测阈值电压 取小鼠4只，称重，标记，随机分为两组。每次取一组放入激怒刺激盒内，接通多用仪电源并打开电源开关，由小到大调节交流电压输出强度，至小鼠出现激怒反映（两鼠竖立对峙、互相撕咬）为 止（约3 5-6 0 V）。记录两组小鼠出现激怒反映时的阈值电压（V）。然后一组小鼠腹腔注射0.1%盐酸氯丙嗪0.l m l/1 0 g（1 0 m g/k g）,另一组小鼠注入相同容量的生理盐水，给药后2 0 m i n分别以给药前的电压刺激，观测两组小鼠给药前后反映的差异。【结果】组别 鼠号体重（g）药
30、物激怒阈值电压（V）激怒反映给药前 给药后1 122 120.1%氯丙嗪生理盐水【注意事项】1 .药理生理多用仪后面板上的开关拨向激怒，而不能拨向恒温一边。2.刺激电压应从小到大，过低不引起激怒，过高易致小鼠逃避，同组小鼠用药前后应致。3 .每组小鼠体重不要相差太大。4.本实验假如采用异笼喂养，体重2 5 0-3 0 0 g雄性大白鼠，效果更佳。亦可用血管钳同时夹两鼠的尾部（距尾尖1/3处），使之疼痛，引起两鼠竖立互斗，代替药理生理多用仪。【思考题】根据实验结果，说明氯丙嗪安定作用的机理与临床应用。实验四、氯丙嗪对小白鼠的耐缺氧的影响【目的】观测氯丙嗪对动物基础代谢的影响【材 料】器材：1 2
31、 5-2 5 0 m l磨 口 瓶（容积需校正）、秒表、1 m l注射器、天平药品：0.1%盐酸氯丙嗪溶液、0.1%硫酸异丙肾上腺素溶液、生理盐水、苦味酸溶液、凡士林动物：小 白 鼠（1 8-2 2 g）3只【方法】：取体重相似（士W i g）、性别相同的小鼠3只，标记，分别于腹腔注射0.1%盐酸氯丙嗪0.1 5 m l/1 0 g（1 5 m g/kg）s。1%硫酸异丙肾上腺素 0.1 5 m l/1 0 g（1 5 m g/kg）、生理盐水 0.1 5 m l/1 0 g。1 5 m i n 后分别放入磨口瓶中，并用凡士林涂抹瓶塞周边，盖入密封，立即用秒表记录时间，记录各鼠停止呼吸时间。【
32、结果】鼠|药物与剂量 存活时间 全班实验存活时间均值 存活时间延长百分率号（%,m l）（m i n）（m i n）（%）123存活时间延长百分率（）=（给药组平均存活时间均值一对照组平均存活时间）/对照组平均存活时间X 1 0 0%【注意事项】1.磨口瓶用广口，且容积必须相同，加盖密封使不漏气，瓶底可放钠石灰（1 5 g）,易吸取二氧化碳与水气。2 .动物性别与体重的一致，可减少动物的差异性。【思考题】氯丙嗪对动物提高缺氧的耐受力与基础代谢有何关系，其在临床有何意义？实验五、哌替咤、阿司匹林、金铃子散的镇痛作用【目的】掌握用热板法测试镇痛药物、比较镇痛效价的方法。【材料】器材：恒温水裕、大烧
33、杯、温度计、1 ml注射器、鼠笼、秒表、纱布条。药品：0.2%盐酸哌替咤溶液、4%阿司匹林混悬液、金铃子散水煎醇沉液（4 g/ml）、生理盐水、苦味酸溶液。动物：雌性小鼠（1 8 2 2）4只。【方法】将恒温水浴调节在5 5 0.5七,放入大烧杯固定，将雌性小白鼠投入烧杯，以秒表测定其痛觉反映 时 间（以舔足为指标），共测2次，间隔5 mi n,取其平均值不超过3 0 s的鼠作为正式实验使用。取合格小鼠4只，称重，编号。1 号鼠腹腔注射0.2%盐酸哌替咤溶液0.1 5 ml/1 0 g （3 0 mg/k g）,2号鼠用4%阿司匹林混悬液0.1 5 ml/1 0 g（6 0 0 mg/k g）
34、,灌胃，3 号鼠腹腔注射金铃子散液0.1 5 ml/1 0 g （8 0 g/k g ）、4号鼠腹腔注射生理盐水0.1 5 ml/1 0 g。在给药后1 5、3 0、4 5、6 0、9 0 mi n各测痛觉反映一次。在测试中，如 6 0 s 内无痛反映，应立即取出，并以6 0 s 计算。【结果】：体重痛觉反映时间（S）鼠号（g ）药物与剂量用药前给药后（S ）（均值）1 5 3 0 4 5 6 0 9 01234【注意事项】1 .因动物个体差异大，故用药前必须挑选，痛反映时间在3 0 s 内者才干适应。2 .小鼠以雌性为好，因雄性小鼠遇热时，睾丸易下垂，阴囊触及热板而致反映敏感。3 .小鼠痛反
35、映时间超过6 0 s 者应立即取出，以免烫伤足部，影响以后测试结果。4 .室温以1 5 左右为宜，过低动物反映迟钝，过高侧敏感。5 .痛阈提高百分率计算可按下列公式进行。同时可用时间作横坐标，痛阈提高率为纵坐标，制成各药镇痛的时效曲线（以全班实验结果记录）。痛阈提高百分率=（药后痛反映时间均值一药前痛反映时间均值）/药前痛反映时间均值X 1 0 0%（如用药后平均反映时间减去用药前平均反映时间得到负数，则以零计算）实验六、尼可刹米对抗吗啡克制呼吸的作用【目的】观测尼可刹米对吗啡中毒时克制呼吸的解救作用。【材料】器材：兔固定箱、婴儿秤、兔口罩、橡皮管、呼吸容量管、换气瓶、双向T形管、2 m l
36、注射器、铁支架、双凹夹、胶布药品：1%的吗啡溶液、2.5%的尼可刹米溶液动物：家兔1 只（1.5 k g 以上）【方 法】取 家 兔1只，称重，置于兔固定盒内，将连有橡皮管的口罩照住其鼻部，通过橡皮管与换气瓶上的双向T型管相连，另一端与呼吸容量瓶相连，呼吸容量瓶倒置于盛有浅红色水的面盆中。由兔耳缘静脉缓慢注射1%吗啡溶液0.5lml/kg（50-100mg/kg）,待呼吸克制明先后,再由耳缘静脉注射2.5%尼可刹米溶液2ml/kg（50mg/kg）,再观测上述指标的变化。【结 果】动物体重（g）记录项目 正常状态 给吗啡后 给尼可刹米后呼吸曲线呼 吸 频 率（次/min）【注意点】L先 测15
37、秒钟呼吸容量瓶中上升的气泡数（呼吸频率）及 排 水 量（呼吸深度），连 续3次，取平均值。2.吗啡注射速度应缓慢，以控制其出现潮式呼吸为止 如上述剂量局限性时可适当增长。3.尼可刹米注射不宜过快，否则易引起惊厥。【思考题】各种中枢兴奋药兴奋呼吸作用机理有什么不同？临床如何选择应用？实验七、药物的解热作用【目的】掌握大鼠发热模型的制备方法。观测阿司匹林、柴胡注射液的解热作用。【材 料】器材：1ml注射器、肛温表、灌胃针头药品：4%阿司匹林混悬液、柴 胡 注 射 液（2g/2mD、生理盐水、甘油、苦味酸动物：大鼠【方 法】选用体重为150200g大鼠，先 测 正 常 体 温（一 般 为36.638
38、.3）二次。选用体温合格者大鼠4只，称重，标记，并分为正常组、模型组、阿司匹林组、柴胡注射液组，除正常组大鼠，其他各鼠皮下注 射0.3%的2,4二硝基苯酚2030mg/kg,待 体 温 升 高 后（约 升 高1）,分别按剂量给药，阿司匹林组 灌 服4%阿司匹林混悬液lml/100g,柴胡注射液组肌注0.15ml/100g,其他组给等容量的生理盐水。并分别于给药后0.5、1、1.5、2、3、4h测定各组大鼠的体温，记录体温变化，以观测阿司匹林的解热作用。【结 果】组别动物数大鼠 体温()正:常致热后0.511.5234 h【注意点】1 .实验室温度明显影响发热反映的速度和限度，故实验室温度应保持
39、恒定在2 0 2 5 匕。2 .致热剂的配置 精密称取2,4 二硝基苯酚1 5 0 m g,置于4 0 m l 生理盐水中，滴加5 M 的氢氧化钠溶液,不断搅拌，待药液澄明变亮黄色，再加入生理盐水至5 0 m l。【思考题】阿司匹林的解热作用机理是什么？对正常体温有无影响？两种药物的解热作用有何不同？6.内脏系统药物实验实验一、利尿药和脱水药对动物尿量的影响【目的】观测药物对尿排血量的影响，了解利尿实验方法.【材料】器材：兔手术台、1 0 号导尿管、兔灌胃器、注射器、烧杯、量筒。药品：3%戊巴比妥钠溶液、1%速尿溶液，5 0%葡萄糖溶液动物：家 兔（雄性，2 kg以上）2只【方法】取雄性家兔2
40、只，称重，分别用胃管灌入温水4 0 m l/k g。0.5 h 后，以3%戊巴比妥钠溶液l n d/k g耳缘静脉麻醉。仰卧固定在手术台上。将 1 0 号导尿管尖端用液体石蜡润滑后自尿道轻而慢地插入，待导尿管通过膀胱括约肌进入膀胱后，既有尿液滴处，然后再插入2 c m （共 8 1 2 c m）,用胶布将导尿管与兔体固定。轻轻按兔下腹部将膀胱内的尿液挤出。将最初5 分钟内滴出的尿液弃去，待滴速稳定后，在导尿管下接一量筒，收集2 0分钟内滴出的尿液，作为给药前的对照值。然后经1 号兔耳缘静脉注入5 0%葡萄糖溶液 5 m l/k g,2号兔注入1%速尿溶液0.4m l/k g（4m g/k g）
41、o并分别收集注药后2 0分钟内的尿量，同对照组比较。结果兔别物药剂量尿 量(m l/2 0m i n)给药前给药后15 0%葡萄糖5 m l/k g2 1%速尿0.4ml/kg【注意事项】1.插胃管时，应注意将胃管从兔的舌上方插入。并避免将胃管误插入气管。当胃管插好后，可将导管的外端放入水中，如有气泡，则说明误插入气管中，应拔出重新插。2.插导管时动作应轻巧，以免引起膝胱括约肌痉挛；插入深度应适当，过多可致卷曲或管口上翘。为避免导尿不畅，可在导尿管的尖端两侧各剪一小孔。3.本实验系兔导尿管法，亦可改用“兔输尿管插管法”收集尿量。操作方法为：将兔麻醉后仰卧固定于手术台，下腹部剪毛（或剃毛），在耻
42、骨联合上缘向上沿正中线作约5cm的皮肤切口，再沿腹白线剪开腹部及腹膜，暴露膀胱。在膀胱底部两侧找出输尿管，轻轻分离一侧输尿管，在其下方穿两根细线，在输尿管靠近膀胱处用一细线结扎。轻轻提起输尿管，在结扎处的上方剪一V型小口，然后向肾脏方向插入一细塑料管23cm,并用另一根细线结扎固定。塑料管的另一端连接记滴装置，记录尿液滴数。将腹部切口处合拢,并用生理盐水纱布覆盖切口。待尿滴数稳定后，即可给药观测。【思考题】根据实验结果，试讨论利尿药和脱水药的作用机制。实验二、硫酸镁对大鼠胆汁的影响【目的】观测硫酸镁对大鼠胆汁流量的影响，验证药物的利胆作用【材料】器材：手术剪、5ml注射器、内径1mm的塑料管、
43、镜子、医用缝合线药品：硫酸镁或其他药物动物：250-300g大鼠【方法】大鼠没有胆囊，其肝脏分泌的胆汁经肝总管进入十二指肠。因此，在胆总管引流收集胆汁，不受胆囊贮存胆汁功能影响，有助于利胆实验的进行。其体重250-300g大鼠，实验前禁食12-16小时，用乌拉坦（20%）麻醉，0.5m l/100g,背部固定，开腹后在右上腹找到胃幽门部，以幽门部为标准，翻转十二指肠，即可见到白色十二指肠乳头部，从乳头部追踪至胆总管，用镣子将覆盖在表面的被膜剥离暴露出胆总管，结扎下端，小心剪一小口，向胆总管近肝端插入内径1 m m 左右的塑料管，并固定，形成疹管引流胆汁，待胆汁流量稳定后，按剂量口服给药，测定给
44、药前及给药后4小时内胆汁流量，并可用胆汁来测定胆汁中胆酸、胆固醇、卵磷脂、胆红素及其它成分。【结果】组别 鼠号(m l)体重剂量(g)给药前流量(g/k g)给药后流量(m l)0.5 h l h 1.5 h4 h2 h3 h213【注意事项】1 .大鼠胆总管仅0.5 T.5 m m 左右，且粗细不一，故应选择合适的插管。胆汁流量也差异较大，故常用给药前和给药后自身比较方法。2 .由于体内雌激素水平会影响胆汁流量及胆汁成分的比例，故应用雄性动物实验。3 .巴比妥类能增长胆汁分泌和胆酸含量，并影响胆固醇、胆汁酸合成的限速酶，能诱导肝微粒体酶，故一般不用于麻醉动物。4 .大鼠没有胆囊，胰腺管位于胆
45、总管两侧，多数胰管直接开口胆总管的下1/3,故在较高位置插管可获得纯净胆汁。5 .胆汁流量常以胆汁充盈导管的长度计算，也可记录滴数或毫升数。6 .大鼠胆汁中的胆汁酸是牛磺酸与甘氨酸的结合物，与人的胆汁较接近，胆汁中胆酸含量约占总胆汁酸的4 5%,胆汁中的磷脂重要是卵磷脂。实验三、硫酸镁、生大黄对小鼠肠管推动性作用的影响(墨汁法)【目的】观测硫酸镁、生大黄对小鼠肠管运动的影响【材料】器材：手术剪、直尺、灌胃针头、注射器、天平药品：硫酸镁、5 0%碳素墨汁生理盐水溶液、生大黄水煎液(l g/m l)动物：小鼠【方法】取禁食2 4 小时成年体重相近小鼠6只，均提成3 组，分别用硫酸镁墨汁溶液、生大黄
46、墨汁溶液 0.2 m l/1 0 g 体重和黑汁液0.2 m l/1 0 g 体重灌胃，给药后2 0 分钟颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘中拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿的距离作为：墨汁在肠内的推动距离“用公式计算墨汁推动百分率”。墨汁推动百分率()=墨汁在肠内推动距离(cm)/小肠全长(cm)X100%【结果】组别 鼠号 体 重(g)药物剂量 小肠总长度(cm)墨汁推动距离(cm)墨汁推动率(酚123k56【注意事项】1.给药至处死动物的时间必须准确，以免时间不同导致实验误差。2.实验动物体重越相近越好，平均体重最佳用23
47、25g小鼠，肠管比较粗大，易于操作。3.肠容积变化观测可以上下段结扎，称取重量，以定量化。4.肠推动距离观测的着色剂，可用10%活性炭溶液或其他颜料(1%卡红溶液)0.2ml/10g体重灌胃。实验四、几种药物对血凝时间的影响【目的】学习测定小鼠血凝时间的简易方法，观测药物对血凝时间的影响。【材料】器材：1ml注射器、约 5cm长度的毛细管、载玻片、针头、秒表、棉球。药品：2.5%的止血敏溶液、50u/ml肝素溶液、丹参注射液、生理盐水、苦味酸溶液。动物：小白鼠3 只【方法】1.毛细管法 取 20g左右的健康小白鼠，用苦味酸标记。1号鼠腹腔注射2.5%止血敏溶液0.21111/108(5mg/1
48、0g),2号鼠腹腔注射50u/ml肝素溶液0.2ml/10g(10 u/10g),3号腹腔注射丹参注射液0.2ml/10g,4 号鼠腹腔注射生理盐水0.2ml/10g。30min后，以毛细管作眼眶内眦穿刺，取达5cm的血柱。立即启动秒表，每隔15秒折断毛细管一小截，检查有无出现血凝丝，计算从毛细管采血到出现血凝丝的时间，即为血凝时间。汇聚全班实验结果，计算三组小鼠的平均血凝时间，并作均数之间差异的显著性检测，从而得出关于止血敏和肝素对血凝时间的影响的结论。2.玻片法 作眼眶内眦穿刺后迅速取血，于清洁干燥的玻片的两端各滴血一滴，并启动秒表，每 隔15秒用干燥针头拨动血液一次，到针头能挑起纤维蛋白
49、丝为止。另一滴血供复验。记录血凝时间，同上法记录实验结果。【结果】组别小鼠数给药血凝时间均值土标准差机 率（P值）毛细管法玻片法毛细管法玻片法【注意事项】1.血凝时间可受温度影响，本实验室温最佳在15左右。2.毛细管的内径最佳为1mm,并均匀一致。【思考题】止血敏、丹参注射液和肝素对凝血时间有何影响？其作用机理如何？临床上有哪些用途？7.药物的安全性实验实验一、药物半数致死量测定【目的】测定戊巴比妥钠的半数致死量【材料】器材：1ml注射器、100ml量筒、50ml烧杯、粗天平药品：3%戊巴比妥钠动物：小 白 鼠（20g左右，雌雄各半）【方法】1.预实验 以3%的戊巴比妥钠为原液，按2倍稀释原则
50、（即1:2:4:8）配成不同浓度的稀释液。取小 鼠16 20只，每4只一组，每组按以上不同稀释浓度的溶液腹腔注射，注射容量均为0.2ml/10g体重。找出正式实验时的最大剂量（Dm）和最小剂量（Dn）。即引起100%和0%动物死亡的剂量或引起大多数动物死亡和大多数动物存活的两个剂量。2.正式实验 在预实验找到的Dm和Dn间按等比级数将动物提成3 5个剂量组。每组10只，随机分派。给药后观测1小时内动物死亡数。并计算各组的死亡率。按简化机率单位法或寇氏改善法计算半数致死量。【结果】1.列表计算（参阅有关半数致死量测定计算方法介绍）2.报告被试药物。给药途径给药日期和时间：室温 动物品种1.1）5