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1、生物化学实验25 酶底物专一性电子课件 生物化学实验技术生物化学实验技术酶的特性底物专一性实验类型:实验类型:实验类型:实验类型:验证性验证性验证性验证性教学时数:教学时数:教学时数:教学时数:3 3生物化学实验技术一、实验目的一、实验目的1、理解酶的专一性。、理解酶的专一性。2、掌握验证酶的专一性的实验方法。、掌握验证酶的专一性的实验方法。3、学习科学设计实验对照的方法。、学习科学设计实验对照的方法。生物化学实验技术二、实验二、实验原理原理酶酶的专一性的专一性(EnzymeSpecificity)是指酶对是指酶对底物及其催化反应的严格选择性底物及其催化反应的严格选择性。如。如淀粉酶只淀粉酶只
2、能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖,水解产生的葡萄糖和果糖的半缩醛及葡萄糖,水解产生的葡萄糖和果糖的半缩醛基均可与基均可与Benedict试剂反应,生成氧化亚铜的试剂反应,生成氧化亚铜的砖红色沉淀。利用砖红色沉淀。利用Benedict试剂的颜色反应可试剂的颜色反应可验证淀粉或蔗糖是否水解。验证淀粉或蔗糖是否水解。生物化学实验技术三、仪器与试剂三、仪器与试剂1、仪器:恒温水浴锅,移液管,离心管,量、仪器:恒温水浴锅,移液管,离心管,量筒等。筒等。2、试剂、试剂
3、:唾液:唾液液淀粉酶液淀粉酶溶液,蔗糖酶溶液,溶液,蔗糖酶溶液,Benedict试剂,试剂,2%蔗糖,蔗糖,1%淀粉溶液(含淀粉溶液(含0.3%氯化钠)。氯化钠)。生物化学实验技术四、实验内容四、实验内容1、淀粉酶的专一性:取、淀粉酶的专一性:取3支试管,编号,按支试管,编号,按下表操作。下表操作。试剂试剂试管编号试管编号123唾液淀粉酶溶液(唾液淀粉酶溶液(mL)1111%淀粉溶液(淀粉溶液(mL)32%蔗糖溶液(蔗糖溶液(mL)3蒸馏水(蒸馏水(mL)3摇匀置摇匀置37水浴水浴保温保温15minBenedict试剂试剂(mL)222沸水浴煮沸沸水浴煮沸23min观察记录现象观察记录现象生物化学实验技术2、蔗糖酶的专一性:取、蔗糖酶的专一性:取3支试管,编号,按支试管,编号,按下表操作。下表操作。试剂试剂试管编号试管编号123蔗糖酶溶液(蔗糖酶溶液(mL)1111%淀粉溶液(淀粉溶液(mL)32%蔗糖溶液(蔗糖溶液(mL)3蒸馏水(蒸馏水(mL)3摇匀置摇匀置37度水浴保温度水浴保温15minBenedict试剂试剂(mL)222沸水浴煮沸沸水浴煮沸23min观察记录现象观察记录现象