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1、几种常见疾病的造模方法几种常见疾病的造模方法1.1.血管性痴呆大鼠模型血管性痴呆大鼠模型动物选取选用健康级 SD 雄性大鼠，体重 280-320 g，动物于安静环境下分笼饲养，室温控制在(22 士 1)的范围内，相对湿度 60%，光线自动控制，明(07:00-19:00)暗（19:00-07）交替，给予充足清洁饮水、摄食。处理大鼠 10%水合氯醛腹腔注射(1 g/kg)麻醉后，将其仰卧固定。分离右颈总动脉（CCA）,颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA）并挂线备用，结扎 ECA 与 CCA,用动脉夹夹闭 ICA 远心端后，迅速于ECA 与 ICA 分义处作一切切口，从切口处插入一端加热成光滑球
2、形尼龙线(直径为 0.25 mm,距球端 2cm 处作标记)。线插入 ICA 后，于入日处稍稍结扎尼龙线与入口处 ICA 段，然后松开夹闭ICA 的动脉夹，继续插入尼龙线至稍有阻力后略回撤，至线插入深度为(18.5 士 0.5)mm 左右，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。再次结扎入口处，尼龙线外留约 1缝合皮肤。2h 后轻轻提拉所留线头至有阻力，实现大脑中动脉再灌，则造模完成。纳入动物入选的标准(按照 Zea Longa 5 级评分法取评分为 2,3,4 分的动物,动物于缺血2h 后出现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则纳入，动物无此体征或于缺血 2h 后仍不清醒者弃去。2.2.大鼠酒精
3、性肝病模型大鼠酒精性肝病模型取材体重 125-155g 雄性 SD 大鼠，环境温度 18一 20 0C,湿度 70%左右，自由采食全价营养颗粒饲料，垫料为紫外线消毒后的卫生纸。将酒精体积分数为 0.52 的红星二锅头自酒(北京酿酒总厂生产)，按体积比分别稀释成 400Io.450Io.500Io(v/v)备用。处理按每周所测得的体重给子每日早晚白酒灌胃各 1 次。第 1 周将稀释成 40%的白酒按剂量4g/(kg.d)、每次 0.5m1/100g 灌胃，第 2 周按剂量 8g/(kg.d)、每次 1.0ml/100g,灌胃，第5 周开始将稀释成 45%的自酒按 9g/(kg.d),每次 1.0
4、m1/100g 灌胃，第 9周将稀释成50%的白酒按 10g/（kg.d）、每次 1.0m1/100g 灌胃，第 11 周起改用自由饮酒至第 12 周，以浓度 50%白酒作为主要饮料，日供给量 40ml，同时限制饮水。纳入弃去死亡的大鼠，即为模型大鼠。3.3.肝郁脾虚证大鼠模型肝郁脾虚证大鼠模型取材健康雄性 SD 大鼠，体重(230 士 10)g，SPF 级，所有动物提前购入，适应性饲养3d,5 只/笼。光照节律 12L:12D(6：0018：00),室温(22 士 2)，保持动物室安静。相对湿度保持 3%一 40%，喂常规颗粒饲料及饮用水。处理大鼠适应性饲养 3d 后进行初步筛选，将过于活跃
5、和过于安静的大鼠排除,以慢性束缚方法制作慢性应激大鼠模型，束缚架自制(T 型束缚台:底座宽 10 cm,长 20 cm,厚 2 8 cm)上端束缚台长 22 cm,最宽处 66 cm,两侧分别有适合四肢放置的四槽及一条可调节的粘贴软带)，将大鼠束缚于束缚架上，两条粘贴软带分别固定大鼠的胸部和腹部，放入饲养箱中，每日 3h,早 8 点到 11 点,连续 21d,.纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。4.4.糖尿病大鼠模型糖尿病大鼠模型取材健康 SD 大鼠 60 只，SPF 级，雄性，体重 190 230g.大鼠预先饲养 3d.处理造模前动物禁食 16 h,按 50 mg/kg 的剂量一次性快速腹腔注
6、射 0.5%的链脲佐菌素。注射完后给食给水，2h 后灌胃给予 25%的葡萄糖水，防止大鼠低血糖的发生。于造模后第 3 天、第 10 天分别测定尿糖和空腹 6h 的血糖。尿糖阳性且空腹6h 血糖16.7 mmol/L 者为糖尿病大鼠。纳入如上所述。5.5.类风湿关节炎肾虚证大鼠模型类风湿关节炎肾虚证大鼠模型取材选用 6 周龄无特殊病原体级 SD 大鼠，雌雄各半。正常饲料适应性喂养 1 周。处理去势法:按常规方法做去势手术，即摘除双侧卵巢与睾丸，术后 28 d，取适量牛ll 型胶原溶液(浓度为 2 g/L)逐滴加入至等容积的不完全弗氏佐剂中，牛 1 型胶原终浓度为 1 g/L;冰浴中用匀浆器充分乳
7、化以滴入水中不打扩散为度;取乳化后的混合物，按 0.2mL/只，即200ug 牛 ll 型胶原/只，于尾根部皮下注射;7d 后按 0.1 mL/只，即100ug 牛 11 型胶原/只，于尾根部皮下加强免疫一次。纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。6.6.虚寒证大鼠模型虚寒证大鼠模型取材SPF 级雄性 SD 大鼠雌雄各半，体质量(240 士 10)g。处理以注射用氢化可的松琥珀酸钠(20 mg/kg)肌肉注射，每天 1 次，连续 14 d。纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。7.7.骨质疏松大鼠模型骨质疏松大鼠模型取材健康 SPF 级雄性 SD 大鼠，12 月龄，体质量(330 士 10)g。室温 19
8、23室内饲养，每日 12h 光照，定量给食，自由饮水。处理经苯巴比妥钠(110 mg/kg)ip 麻醉后，经腰背部切口切除双侧卵巢，手术后分笼饲养。纳入手术 4 周后，弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。8.8.血瘀型颈椎病大鼠模型血瘀型颈椎病大鼠模型取材健康 SPF 级雄性 SD 大鼠，3 月龄，体质量(330 士 10)g。处理首先采用动静力失衡造大鼠颈椎间盘退变模型。将大鼠颈后部剪毛和清洁后，按氯氨酮0.1/kg 体质量行腹腔注射麻醉，取颈背部正中纵向切口，长约 2 一 2.5 cm，切开皮肤后，横向切断颈夹肌和头、颈、寰最长肌，切除颈骼肋肌与头半棘肌，然后依次切除棘上和棘间韧带，建立动静力失衡
9、性大鼠颈椎间盘退变模型。观察2.5 个月后，采用肾上腺皮质激素加肾上腺素应用法造出血瘀症型，氢化可的松10mg/kg 体质量肌肉注射，用药 13 d，然后肾上腺素 0.36 mg/kg 体质量皮下注射，用药 1 d。纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。9.9.激素性股骨头坏死大鼠模型激素性股骨头坏死大鼠模型取材4 月龄健康 Wistar 大白鼠雌雄各半。以正常饲料适应性喂养 2 周。处理精确称重后，肌肉注射地塞米松磷酸钠(10 mg/kg)，每周 1 次，共注射 14 周.纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。10.10.膝关节骨性关节炎兔模型膝关节骨性关节炎兔模型取材健康 6 月龄新西兰大白兔 52 只，雌雄各半,空腹体重 22.5kg.处理先剪去兔左后肢踩关节以上 1cm 一腹股沟下 1.5 cm 区域兔毛，树脂绷带经 65一 85热水浸泡软化后，以兔膝关节为中心缠绕，松紧以不脱落为度，使兔膝关节仲直位固定，模型制备过程中随时观察绷带固定情况，若出现松动或脱落者要及时重新固定，制动满 6 周。纳入若制备的模型兔出现足底溃烂、感染、上呼吸道感染、骨折等动物，均予以排除。