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1、转基因动物第二章实验动物的饲养与培育分析实验动物的育种21实验动物的分类 3主要内容超排卵与取卵4实验动物的饲养条件与环境控制2动物转基因技术Animal transgenic technique第一节 实验动物的分类p 实验动物p 实验用动物经人工培育，遗传背景明确，来源清楚，对其携带微生物和寄生虫实行监控，应用于生命科学研究，药品、生物制品的生产和检定，以及其它科学研究的动物。指一切用于科学实验的动物。3一、在动物学上的分类p 人为分类法p 自然分类法界（Kingdom）门（Phylum）纲（Class）目（Order）科（Family）属（Genus）种（Species）动物界 脊椎动物
2、门 哺乳纲 真兽亚纲 食肉目 肢脚亚目 犬科 犬属 犬种4二、按遗传学控制原理分类11近交系动物近交系动物n 概念：是采用兄妹交配或亲子交配，连续繁殖20代以上培育而成的纯品系动物。C57BLn 特点：具有相同的基因型，表现型也一致 遗传背景明确 长期遗传稳定性 5 突变系动物是指正常染色体的基因发生了变异的，形成具有各种遗传缺陷的动物。2突变系动物肥胖小鼠 肥胖小鼠6 概念：是两个近交品系动物间有计划进行交配获得的第一代动物，亦称杂交一代，简称Fl动物。特点：F1动物基因型相同，个体基本相同，表现型变异低，适应性强，反应敏感及分布广等特点，并具有双亲共有的遗传特性。3杂交群动物 7 概念：概
3、念：指一个动物种群在5年以上未从外部引进其它任何新血缘品系，是由同一血缘品系进行随意交配，并在固定场所保存繁殖的动物群。4封闭群动物特点：特点：1）保持一定的杂合性 2）保持相对稳定的遗传特征 3）繁殖力、抗病力强、生产成本低 8二、按微生物学控制原理分类普通级动物(CV)清洁动物(CL级)无特定病原体动物(SPF)无菌动物（包括悉生动物、GF/GA)按照对微生物净化的程度，实验动物在我国分为四类:91、无菌动物概念：机体内、外不带有任何现有方法可检测出微生物和寄生虫的动物。应用：（1）用于微生物学和寄生虫学研究（3）用于老年病学研究（2）免疫学功能的研究 10概念：指在无菌动物体内植入已知微
4、生物的动物。悉生动物应用：（1）微生物学研究（2）免疫学研究（3）抗体制备研究 11 概念概念：指实验动物体内不存在特定病原微生物和寄生虫的动物，简称SPF动物。2无特定病原体动物 应用应用：（11）国际上公认国际上公认SPFSPF动物适用于所有科研动物适用于所有科研实验实验；（2）各种疫苗生产。12 概念概念：指来自屏障系统的SPF动物，而饲育在半屏障环境设施系统中的动物。应用应用：一般用于短期、中期对带菌要求不严格的实验研究。3清洁动物13概念：是未经积极的微生物学控制，普遍地 饲养在开放卫生环境里的动物。4.普通动物应用：教学、一般性实验、预实验14动物转基因技术Animal trans
5、genic technique实验动物环境外环境内环境 大环境小环境第二节 实验动物的饲养条件与环境控制15基因型表现型演出型发育环境 周围环境实验动物环境控制与动物实验结果的关系16动物转基因技术Animal transgenic technique1、气候因素（1）温度 18-29 影响生长发育和繁殖 影响代谢 激发应激反应 影响试验结果。一、影响实验动物环境的因素17温度与毒性的关系 温度对3种药物LD50的影响药物LD50（mg/kg）15.5 26.7 苯异丙胺盐酸脱氧麻黄碱麻黄碱197.0111.0477.190.033.2565.018（2）湿 度 40%-70%（3）风速 0.
6、1-0.25m/s19（11）粉尘：粉尘的标准，以净化的洁净度分为）粉尘：粉尘的标准，以净化的洁净度分为清洁级动物为清洁级动物为100000100000级，级，SPFSPF动物为动物为1000010000级，无级，无菌动物为菌动物为100100级。级。（22）有害气体：主要有氨、甲基硫醇、硫化氢）有害气体：主要有氨、甲基硫醇、硫化氢等。氨控制在等。氨控制在14 mg/m14 mg/m33以下。以下。2.理化因素（3）噪音：60 db（4）光照：明暗交替时间为12:12或10:14 203.生物因素（1）饲养密度和社会因素 大约是每平方米小鼠100只、大鼠50只、豚鼠20只、兔4只、狗1只、猴1
7、只。饲养空间狭小21（2）空气中的微生物 常常以空气落下菌数表示，普通环境小于或等于30个/皿，屏障环境小于或等于3个/皿，隔离环境无检出。22动物转基因技术Animal transgenic technique二、实验动物设施 实验动物设施：指与实验动物和动物实验有关的实验动物的保种维持、生产、实验、研究等所需的建筑物和设备的总称。23 饲育室、实验室、检疫室、洗刷消毒间、废物处理设施、办公室、机房、库房等。1、实验动物设施的一般组成2、实验动物设施的等级p 隔离系统隔离系统p 开放系统开放系统p 亚屏障系统亚屏障系统p 屏障系统屏障系统24（1）开放系统（Open system）：饲养普通
8、动物的设施，在某种程度上对卫生有要求。25 为努力避免与病原微生物接触和传染的机会而设计的封闭设施，适合饲养清洁动物或SPF动物。（2）屏障系统（Barrier system）：26 介于屏障系统和开放系统的中间状态的设施，其构造和设备均基本上按屏障设施的标准要求，空气经亚高效过滤，在管理上没有屏障系统那么严格，用于清洁级动物的生产和实验。（3）亚屏障系统（Sub-Barrier system）27 饲养无菌动物及悉生动物所使用的方式，它饲养无菌动物及悉生动物所使用的方式，它能保证动物处于完全无菌的环境下，主要设备是能保证动物处于完全无菌的环境下，主要设备是隔离器隔离器，可以放在普通环境中。，
9、可以放在普通环境中。（4）隔离系统（Isolator system）28（1）区域的设置3、实验动物设施的基本要求29l地面：应防滑、耐磨、耐清洗消毒、无渗漏。l地漏：屏障区内地漏应防堵、防回水回气，采用特制盖、可水封。l墙面：应光滑平整，阴阳角为圆弧形，墙面应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击、无缝隙的材料。（2）对部分建筑部位的要求30l天花板：应采用耐水洗、耐腐蚀、气密性好、坚固、无毒、阻燃的材料。l门窗：门应坚固、气密性好、耐腐蚀、易清洗，开闭形式顺应气流密封，门下端设连动装置，关闭时门底不留缝隙，门宽不少于1.0m，门上可留玻璃观察窗。l走廊：宽度一般为1.52.0m。l房间：为节
10、约能源，饲养室高度可设为2.4m左右。31动物转基因技术Animal transgenic technique 第三节 实验动物的育种一、近交系的培育1、平行线法 由5个家系组成基础繁殖群，从每个家系中选出一对兄妹进行全同胞交配，以此类推，最后有可能育成5个亚系。缺点：个体不太均一、易发生分化32以某个家系为基础繁殖对，在其后代中一般选留3-5对兄妹，但仅有1对向下传递，生产的个体均一，最后形成单一的品系。2、单线法缺点：选择范围小，由于只有单线的仔代，有断代的危险。33 在基础群中，每代有5对，繁殖过程中，每一代均保持5对向下传递，当某对不孕或生产能力降低时，可从另一对所生的后代中选择优良者
11、代替。它兼有以上两个方法的优点。3、优选法34动物转基因技术Animal transgenic technique 通过培育近交系的方法使突变基因保存下来二、突变系的培育35 将突变基因导入近交系3637 1、随机交配的方法（1）按随机数表配对法 将断奶后的实验动物编号，按随机数表组成配种对。三、封闭群的培育 封闭群动物的繁殖是尽量保持封闭群动物基因异质性及多态性，避免随繁殖代数增加，导致近交系数的过快上升。38 1 2 3 4 D C B A 4 3 2 1 雄鼠组号 雌鼠组号 子代组号（2）分组交叉交配法39公1 母 公 4 母 公 3 母 公 5 母 公 2 母 公 1 母 公 2 母
12、公 4 母 公 3 母 公 5 母n 代n1代（3）循环配对法402、封闭群的维持与生产 遗传背景明确，来源清楚，有完整资料。引种动物数量要足够多。（1）引种原则封闭群应足够大，并尽量避免近亲交配。2、繁殖原则41四、杂交群的培育采用两个近交系进行杂交而形成。42动物转基因技术Animal transgenic technique一、鼠的准备与要求 第四节 超排卵与取卵43二、超排卵与取卵 1、排卵程序：(1)第一日中午先向小鼠腹腔内注入5一l0单位的PMS；(2)过48小时腹腔内注入510单位的人hCG(注射后1113 小时后排卵)；(3)令雌雄动物一对一的合笼交配；(4)检查阴栓(第四日晨)；检查阴栓可判定是否受精；如已受精则出现阴栓。442 受精卵的收集45Thanks46此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢