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1、 蚌埠丰原涂山制药有限公司蚌埠丰原涂山制药有限公司 2010.04 微生物与消毒灭菌基本知识微生物与消毒灭菌基本知识 一、一、前言前言n微生物的概念n微生物（microorganism,microbe）是一些肉眼看不见的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体和蓝细菌（过去称蓝藻或蓝绿藻），属于真核类的真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物和显微藻类，以及属于非细胞类的病毒、类病毒和朊病毒等。我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气中，微生物达8003500个/m3，在土壤中达1500108个/g，在严重污染的水中可达107个/ml。（饮用水要求细菌总数
2、100个/ml，大肠杆菌3个/ml。经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至105106个/ml。）人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有440万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达101000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。微生物的特点 n分布广，种类多分布广，种类多n个体小、面积大个体小、面积大n适应强，易变异适应强，易变异n代谢强，转化快代谢强，转化快二、微生物特点二、微生物特点n分布广、种
3、类多分布广、种类多n微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入，人的皮肤上，口腔，肠道里都有许多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁殖的大本营，约占微生物总量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20亿个微生物，即使是贫瘠的土壤，每克土中也含有35亿个微生物。空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。哪里尘埃多，哪里的微生物就多。n迄今为止，我们知道的微生物约有10万种，目前已知的种类只占地球上实际存在的微生物总数的20%，人类生产和生活中仅开发利用了已发现微生物种数的1%。n个体小、面
4、积大个体小、面积大n生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。物体的表面积和体积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的30万倍。n适应强、易变异适应强、易变异n多数细菌能耐0196的低温；在海洋深处的某些硫细菌可在250300的高温条件下正常生长；一些嗜盐细菌甚至能在饱和盐水中正常生活；产芽孢细菌和真菌孢子在干燥条件下能保藏几十年、几百年。由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特
5、性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅度的产量提高。n代谢强、转化快代谢强、转化快n微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代，如细菌一般每2030分钟既可分裂一次；n微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。三、微生物的类群和形态结构三、微生物的类群和形态结构n微生物按其结构、化学组成及生
6、活习性等分为三大类：n原核细胞型原核细胞型：细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体等n真核细胞型真核细胞型：真菌n非细胞型非细胞型：病毒 噬菌体 微生物的分类按细胞结构的有无，可分为两大类群n非细胞生物（如病毒）n细胞生物（细菌、真菌等）芽孢杆菌（细菌）乙型肝炎病毒酵母菌细菌形态构造n 细菌形态细菌的结构与生长n细胞壁n细胞膜n核糖体n核质体特殊结构芽孢淡水中的螺旋菌 spirochetes.蜡样芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌（细菌）支原体扫描电镜图片支原体支原体（mycoplasma）以前被认为是最小的能独立存活的原核生物，以前也被认为是地球上迄今为止被发现的最
7、小的细胞生物。全世界90%的猪体内寄生着支原体。立克次氏体（rickettsiae），一种微小的寄生的细菌。上图是动物的淋巴细胞，红色的是寄生的立克次氏体。青霉是种真菌，属于子囊菌。有的能产生青霉素，救了无数人的命。产生无性孢子。根霉（Rhizopus)是种真菌，属于接合菌。能产生无性孢子菌丝体的直径约12um黑的是孢子囊噬菌体SARS病毒是一类新发现的冠状病毒禽流感病毒爱滋病毒1 1、细菌、细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二等分裂方式繁殖的原核微生物，分布广泛。细菌的繁殖细菌的繁殖 二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于
8、长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。8的湿热灭菌的湿热灭菌以达到以达到SAL10-6采用采用F08的湿热灭菌，的湿热灭菌，以达到以达到SAL10-6能否对药液除菌过滤能否对药液除菌过滤无菌原料药、无菌配制无菌原料药、无菌配制无菌灌封无菌灌封药液除菌过滤及无菌灌封药液除菌过滤及无菌灌封是是否否否否否否是是是是灭菌工艺与灭菌前微生物控制的关系灭菌工艺与灭菌前微生物控制的关系灭菌工艺灭菌工艺灭菌前微生物控制要求灭菌前微生物控制要求类别类别过度杀灭过度杀灭F012低，不必每批监控污染菌低，不必每批监控污染菌最终灭菌工艺，最终灭菌工艺，无菌保证
9、值无菌保证值6残存概率残存概率F08高，应每批监控污染菌，尽高，应每批监控污染菌，尽量加入除菌过滤器，应有原量加入除菌过滤器，应有原料微生物标准料微生物标准最终灭菌工艺，最终灭菌工艺，无菌保证值无菌保证值6F08很高，必须采用除菌过滤，很高，必须采用除菌过滤，每批监控灭菌前污染菌（或每批监控灭菌前污染菌（或过滤前污染菌），监控每批过滤前污染菌），监控每批灌装区的环境灌装区的环境非最终灭菌工非最终灭菌工艺（无菌生产艺（无菌生产工艺）工艺）无菌保证值无菌保证值3紫外线灭菌n原理 1、260nm波长辐射对细菌有杀灭作用。2、产生微量臭氧也有一定杀菌作用。n特点 穿透力较弱，仅适用于物体表面、空气消毒
10、。使用时注意人员个人防护使用时注意人员个人防护常用消毒剂常用消毒剂n 70%75%乙醇水溶液；n 0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油，用于皮肤、器具等消毒；n异丙醇 75%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；n甲醛 37%40%甲醛液89ml，再加入45g高锰酸钾，每m3熏蒸量，密闭1224h，刺激性强；n戊二醛 2%水溶液，用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒，毒性较轻；常用消毒剂常用消毒剂n新洁尔灭（苯扎溴铵）0.1%水溶液，用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效，抗菌谱较窄；n杜灭芬（消毒宁）0.05%0.1%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；n过氧乙酸 a、
11、0.2%0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c、1g/m3；用于器具等消毒，抗菌谱广，可用于皮肤消毒杀灭某些病毒；熏蒸，但性质不稳定。n乳酸 a、0.331mol/L；b、11.5ml/m3熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸 喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用；熏蒸，密闭12h以上。n麝香草酚 5%麝香草酚溶于50%乙醇，喷洒墙面、地面，杀霉菌。干热灭菌干热灭菌n常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。n火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。n干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，1802
12、00需0.51h。除热原，则需25030min，或20045min，1802h。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。湿热灭菌湿热灭菌n通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。n煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是100，一般处理3060min可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。n低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用6080加热（或煮沸）1h，然后置2025保存24h（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再
13、用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。高压蒸汽灭菌（热压灭菌）高压蒸汽灭菌（热压灭菌）n超过一个大气压时，水的沸点高于100，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。n常用条件为：115.5、30min；121.5、20min；126.5、15min。注意事项注意事项na.必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。nb.注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，
14、所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定一固定的灭菌曲线（像冻干曲线一样）。nc.定期检查灭菌器内温度的准确性。化学灭菌化学灭菌n利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。滤过除菌滤过除菌n利用细菌不能通过致密孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原
15、体和病毒。过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22m。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应超过8小时。辐射灭菌辐射灭菌n辐射有两种类型：n一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；n一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、射线等。谢谢观看/欢迎下载BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH