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1、第一页，共三十一页。一、一、细菌细菌(xjn)(xjn)(xjn)(xjn)形态检查法形态检查法一不染色一不染色(rns)标本检查法标本检查法活菌轮廓活菌轮廓(lnku)(lnku)动动 力力第二页，共三十一页。单染色法单染色法 复染色复染色(rns)(rns)(rns)(rns)法法 鉴别染色鉴别染色(rns)(rns)(rns)(rns)法法 革兰染色革兰染色(rns)(rns)(rns)(rns)抗酸染色抗酸染色 荚膜染色荚膜染色 鞭毛染色鞭毛染色 芽胞染色芽胞染色特殊特殊(tsh)(tsh)染色法染色法二染色二染色(rns)标本检查法标本检查法第三页，共三十一页。原原 理：理：细胞壁结
2、构学说细胞壁结构学说(xu shu)(xu shu)(xu shu)(xu shu)等电点学说等电点学说化学结构学说化学结构学说 革兰染色法革兰染色法Gram Stain由丹麦医生由丹麦医生(yshng)(yshng)Hans Christian GramHans Christian Gram于于18841884年创立。年创立。第四页，共三十一页。涂涂 片片干干 燥燥固固 定定染染 色色水洗、吸干水洗、吸干镜镜 检检一、制备涂片一、制备涂片(t pin)标本标本步步 骤骤第五页，共三十一页。二、染二、染 色色结晶紫初染结晶紫初染碘液媒染碘液媒染乙醇脱色乙醇脱色复红复染复红复染涂片固定涂片固定第
3、六页，共三十一页。紫色紫色紫色紫色革兰阳性革兰阳性革兰阳性革兰阳性G+G+G+G+菌菌菌菌红色红色红色红色(hngs)(hngs)(hngs)(hngs)革兰阴性革兰阴性革兰阴性革兰阴性G-G-G-G-菌菌菌菌1 1 1 1鉴别细菌鉴别细菌鉴别细菌鉴别细菌(xjn)(xjn)(xjn)(xjn)2 2 2 2选择药物选择药物选择药物选择药物3 3 3 3与致病性有关与致病性有关与致病性有关与致病性有关意意 义义结结 果果第七页，共三十一页。细菌学诊断细菌学诊断(zhndun)标本标本(biobn)的采集和的采集和运送运送防止杂菌污染防止杂菌污染运送注意保存运送注意保存不同期不同标本不同期不同标
4、本抗菌素使用前抗菌素使用前采集病变明显部位采集病变明显部位标本必须新鲜标本必须新鲜第八页，共三十一页。病原菌的检查程序病原菌的检查程序药物敏感药物敏感(mngn)试验试验直接直接(zhji)涂片镜检涂片镜检别离培养别离培养生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定动物试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断分子生物学技术分子生物学技术其他检测技术其他检测技术观察菌落形态观察菌落形态染色镜检染色镜检第九页，共三十一页。原理原理(yunl)双份血清双份血清(xuqng)(xuqng)标本，恢复期血清标本，恢复期血清(xuqng)(xuqng)中抗体效价中抗体效价比急性期血清比急性期血清(xuqng)
5、(xuqng)中抗体效价升高中抗体效价升高44倍者方有意义倍者方有意义结果结果(ji gu)判断判断血清学的诊断血清学的诊断-抗原检测未知抗体-效价上下-动态观察动态观察第十页，共三十一页。种种 类类凝集凝集(nngj)(nngj)试验试验 -肥达试验肥达试验(shyn)、外斐试验、外斐试验(shyn)、显微镜凝集试验、显微镜凝集试验(shyn)等等中和试验中和试验(shyn)(shyn)-梅毒梅毒VDRLVDRL、RPRRPR试验等试验等沉淀试验沉淀试验-抗抗“O“O试验等试验等补体结合试验补体结合试验-Q Q热柯克斯体抗体检测等热柯克斯体抗体检测等第十一页，共三十一页。杀死物体上病原微生物
6、的方法杀死物体上病原微生物的方法(fngf)(fngf),并不一定并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物 第十二章 消毒(xio d)(xio d)与灭菌消毒消毒(xio d)(xio d)(xio d)(xio d)disinfectiondisinfection灭菌灭菌sterilizationsterilization无菌无菌asepsisasepsis防腐防腐antisepsisantisepsis防止或抑制体外细菌生长繁殖防止或抑制体外细菌生长繁殖防止或抑制体外细菌生长繁殖防止或抑制体外细菌生长繁殖不含活菌不含活菌不含活菌不含活菌杀死物体上的所有微生
7、物杀死物体上的所有微生物杀死物体上的所有微生物杀死物体上的所有微生物无菌操作无菌操作第十二页，共三十一页。抹布抹布(mb)(mb)上的细菌上的细菌 菜板上的细菌菜板上的细菌(xjn)(xjn)第十三页，共三十一页。热力热力(rl)(rl)灭菌法灭菌法 一、物理消毒一、物理消毒(xio d)(xio d)灭菌灭菌法法燃烧燃烧-最彻底最彻底(chd)(chd)的灭菌方的灭菌方法法烧灼烧灼-直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法干烤干烤-加热加热160-180 2160-180 2小时小时干热干热(dry heat)(dry heat)灭菌法灭菌法杀菌机理：杀菌机理：高温使菌体蛋白凝固变性高温使菌体蛋
8、白凝固变性红外线红外线-热效应只在照射外表产生热效应只在照射外表产生微波微波-热效应具有一定的穿透性热效应具有一定的穿透性第十四页，共三十一页。湿热湿热(sh r)(sh r)(moist heat)(moist heat)灭菌灭菌法法加压蒸汽加压蒸汽(zhn q)灭菌法灭菌法最有效的灭菌最有效的灭菌(mi jn)(mi jn)方法方法121121煮沸消毒法煮沸消毒法水煮水煮10051005分钟分钟(繁殖体繁殖体)-2)-2小时小时(芽胞芽胞)流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽水蒸汽100 15-30100 15-30分钟分钟(繁殖体繁殖体)反复
9、屡次流动蒸汽间歇加热灭菌反复屡次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度较低的温度61306130分钟杀灭致病菌分钟杀灭致病菌20-3020-30分钟分钟第十五页，共三十一页。湿热湿热(sh r)灭菌与干热灭菌的比较灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热同一温度下，湿热(sh r)比干热灭菌效果好比干热灭菌效果好原原因因(yunyn)1 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2 2、湿热的穿透力比干热大、湿热的穿透力比干热大3 3、湿热的蒸汽有潜热、湿热的蒸汽有潜热第十六页，共三十一页。辐射辐射(fsh)(fsh)杀菌法杀菌法 紫外线紫外线杀菌杀菌(sh jn)机理：机理：波长波长(b
10、chng)(bchng)200-300nm200-300nm的紫外线具有杀菌作用的紫外线具有杀菌作用干扰干扰DNADNA的复制与转录的复制与转录紫外线穿透力较弱紫外线穿透力较弱特点：特点：应用范围：应用范围：空气及不耐热物品的外表消毒空气及不耐热物品的外表消毒光复活作用及光复活酶光复活作用及光复活酶第十七页，共三十一页。杀菌杀菌(sh jn)机理：机理：应用应用(yngyng)范范围：围：电离辐射电离辐射包括高速包括高速(o s)(o s)电子、电子、X X射线和射线和 射线射线产生游离基产生游离基,破坏破坏DNADNA。一次性医用塑料制品的消毒一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒不破坏其营养成
11、分食品的消毒不破坏其营养成分 第十八页，共三十一页。超声波杀菌超声波杀菌(sh jn)法法 超声波超声波杀菌杀菌(sh jn)机理：机理：频率高于频率高于20kHz/s20kHz/s而不被人耳感觉而不被人耳感觉(gnju)(gnju)到的声波到的声波过水时的空化作用空穴效应过水时的空化作用空穴效应特点：特点：应用范围：应用范围：粉碎细胞，提取细胞组分粉碎细胞，提取细胞组分革兰阴性菌较为敏感革兰阴性菌较为敏感第十九页，共三十一页。滤过滤过(l u)除菌法除菌法用机械性阻挡除去用机械性阻挡除去(ch q)(ch q)液体或空气中的细菌液体或空气中的细菌滤菌器滤菌器 含有微细小孔含有微细小孔0.22
12、0.22微米微米,只允许液体只允许液体(yt)(yt)或气体通或气体通过过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 适用范围适用范围血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌 第二十页，共三十一页。滤菌过程滤菌过程(guchng)第二十一页，共三十一页。低温低温(dwn)与枯燥与枯燥在低温在低温(dwn)状态下真空抽去水分状态下真空抽去水分用途用途(yngt)：保存菌保存菌种种冷冻真空枯燥法：冷冻真空枯燥法：第二十二页，共三十一页。二、化学消毒二、化学消毒(xio d)(xio d)灭菌灭菌法法杀菌杀菌(sh jn)机理机理使菌体蛋白使菌体蛋白(
13、dnbi)(dnbi)凝固变性凝固变性使细胞内酶失活，干扰细菌的正常代谢使细胞内酶失活，干扰细菌的正常代谢破坏细菌细胞壁、膜等结构，导致内含破坏细菌细胞壁、膜等结构，导致内含 物逸出物逸出第二十三页，共三十一页。按杀菌能力按杀菌能力(nngl)分类分类可杀死包括可杀死包括(boku)(boku)芽胞在内的所有微生物芽胞在内的所有微生物 1、高效高效(o xio)(o xio)消毒剂消毒剂适用于不耐热力，但要进入体内的物品适用于不耐热力，但要进入体内的物品包括含氯消毒剂、过氧化物消毒剂包括含氯消毒剂、过氧化物消毒剂 醛类消毒剂、环氧乙烷等醛类消毒剂、环氧乙烷等第二十四页，共三十一页。2、中效消毒
14、剂中效消毒剂适用于纤维内窥镜、喉镜、麻醉适用于纤维内窥镜、喉镜、麻醉(mzu)(mzu)器材等器材等包括包括(boku)(boku)含碘消毒剂、醇类消毒剂等含碘消毒剂、醇类消毒剂等不能杀死包括芽胞，可杀死繁殖体包不能杀死包括芽胞，可杀死繁殖体包 括结核分枝杆菌、真菌、多数括结核分枝杆菌、真菌、多数(dush)(dush)病病毒毒第二十五页，共三十一页。可杀死多数细菌繁殖体，不能杀死芽胞、可杀死多数细菌繁殖体，不能杀死芽胞、结核结核(jih)(jih)分枝杆菌、某些抵抗力强的真菌和病毒分枝杆菌、某些抵抗力强的真菌和病毒3、低效消毒剂低效消毒剂适用于皮肤、粘膜、物体适用于皮肤、粘膜、物体(wt)(
15、wt)外表和地面等外表和地面等包括包括(boku)(boku)季胺盐类消毒剂、氯乙定、高锰酸季胺盐类消毒剂、氯乙定、高锰酸 钾等钾等第二十六页，共三十一页。龙胆紫龙胆紫干扰氧化、抑制繁殖干扰氧化、抑制繁殖染料染料染料染料新洁而灭新洁而灭蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤表面活性剂表面活性剂过氧乙酸、碘酒过氧乙酸、碘酒氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀氧化剂氧化剂红汞、硫柳汞红汞、硫柳汞氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白酶变性重金属盐重金属盐高锰酸甲高锰酸甲氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀氧化剂氧化剂乙醇乙醇蛋白变性蛋白变性醇类醇类石炭酸石炭酸蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤酚类酚类常用种类常用种类
16、作用机制作用机制类别类别常用常用(chn yn)消毒剂种消毒剂种类类第二十七页，共三十一页。各种各种(zhn)消毒剂的消毒剂的应用应用消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂常用浓度常用浓度常用浓度常用浓度 适用范围适用范围适用范围适用范围含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂有效氯量有效氯量有效氯量有效氯量4g/L4g/L4g/L4g/L饮水饮水饮水饮水过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸0.2%-1%0.2%-1%0.2%-1%0.2%-1%皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气戊二醛戊二醛戊二醛戊二醛2%2%2%2%医疗器械医疗器械医疗器械医疗器械碘酒碘酒碘酒碘酒
17、2.5%2.5%2.5%2.5%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面碘伏碘伏碘伏碘伏2%2%2%2%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面乙醇乙醇乙醇乙醇75%75%75%75%医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤新洁尔灭新洁尔灭新洁尔灭新洁尔灭0.4%-1.6%0.4%-1.6%0.4%-1.6%0.4%-1.6%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾1-10g/L1-10g/L1-10g/L1-10g/L皮肤、黏
18、膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等第二十八页，共三十一页。影响消毒剂作用影响消毒剂作用(zuyng)的因素的因素消毒剂消毒剂细菌细菌(xjn)环境环境(hunjng)种类种类浓度浓度作用时间作用时间菌龄菌龄种类种类有机物有机物温度温度酸硷度酸硷度第二十九页，共三十一页。1 1、试述常用、试述常用(chn yn)(chn yn)热力灭菌法的作用机制及适用范围热力灭菌法的作用机制及适用范围2 2、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素3 3、简述革兰染色的原理、步骤、结果及意义、简述革兰染色的原理、步骤、结果及意
19、义4 4、据细菌的生物学性状，如何对一未知菌提出微据细菌的生物学性状，如何对一未知菌提出微 生物学的诊断方案？生物学的诊断方案？预习预习(yx)：微生物的遗传微生物的遗传(ychun)(ychun)与变异与变异思考题思考题第三十页，共三十一页。内容(nirng)总结第十一章 细菌(xjn)的检查方法。第十一章 细菌(xjn)的检查方法。复染色法 鉴别染色法 革兰染色。由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。步 骤。二、染 色。红色革兰阴性G-菌。结 果。双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高4倍者方有意义。-抗原检测未知抗体。-效价上下。-动态观察。凝集试验 -。第十二章 消毒与灭菌。湿热灭菌与干热灭菌的比较第三十一页，共三十一页。