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1、教学无忧 教学事业！课题3血红蛋白的提取和分离课时训练14血红蛋白的提取和分离1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中()。解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。答案:B2.使用SDS聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于()。A.电荷的多少B.分子的大小C.肽链的多少D.分子形状的差异解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分
2、子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。答案:B3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是()。A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。答案:D4.蛋白质的提取和分离分为哪几步?()A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析:蛋白质的提取和分
3、离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。答案:C5.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?()A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶
4、膨胀时吸水7.5 g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50 cm高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h,以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液。答案:D6.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、电荷的性质和电荷量情况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是()。A.若将样品以2 000 rmin-1的速度离心10 min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲
5、移动速度最快C.将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内D.若用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远解析:若用离心法分离蛋白质,则相对分子质量大的分子先沉淀下来,即丙在沉淀中。若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则相对分子质量越小,移动越慢,即甲的移动速度最慢。将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则相对分子质量更大的丙也保留在袋内。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,据图无法判断五种蛋白质在凝胶上的电泳带距离;为消除净电荷对迁移率的影响,可在凝胶中加入SDS使电泳的
6、迁移率完全取决于分子的大小。答案:C7.下面说法不正确的是()。A.在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D.透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内解析:透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。答案:D8.下列试剂可用于血红蛋白释放的是()。生理盐水甲苯磷酸缓冲液蒸馏水柠檬酸钠A.B.C.D.解析:在蒸馏水中红细胞吸水胀破,甲苯作为有机
7、溶剂能够溶解细胞膜,加速细胞的破裂。答案:A9.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。(1)将实验流程补充完整:A为,B为。凝胶色谱法的基本原理是根据而分离蛋白质的有效方法。(2)洗涤红细胞的目的是去除,洗涤次数过少,无法除去;离心速度过高和时间过长会使一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是。释放血红蛋白的过程中起作用的是。(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是。如果红色区带,说明色谱柱制作成功。解析:本题考查血红蛋白提取和分离的实验步骤和基本操作。答
8、案:(1)血红蛋白的释放样品的加入和洗脱蛋白质相对分子质量的大小(2)杂蛋白(血浆蛋白)血浆蛋白白细胞和淋巴细胞离心后的上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯(3)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内的一致均匀一致地移动10.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题。(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有功能。 (2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是;乙装置中,C溶液的作用是。(3)甲装置用于,目的是。用乙装置分离蛋白质的方法叫,是根据分离蛋白质的有效方法。 (4)用乙装置分离血红蛋白时,待时,用试管收集流出液,每5 mL收
9、集一管,连续收集。解析:A表示磷酸缓冲液,B表示血红蛋白溶液,C表示缓冲液。甲装置可对血红蛋白粗分离,血红蛋白留在透析袋中,而小分子物质进入缓冲液。乙装置中的缓冲液(C)可对色谱柱中的血红蛋白进行洗脱。答案:(1)运输(2)磷酸缓冲液洗脱血红蛋白(3)透析 (粗分离)去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小(4)红色的蛋白质接近色谱柱底端11.测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术。常用的测定方法是凝胶色谱法。请回答下列问题。(1)凝胶色谱法的原理是。(2)还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质,一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离,在电泳
10、过程中,影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的,分子的大小、形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质。待蛋白质接近凝胶色谱柱底端时,用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是。答案:(1)根据相对分子质量的大小分离蛋白质(2)带电性质的差异先收集到的蛋白质相对分子质量较大,后收集到的相对分子质量较小12.凝胶色谱技术是20世纪60年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被广泛应用于多个领域,请回答问题。(1)若选用Sephadex G100,则G表示。(2)通过凝胶色谱法可将从红细胞
11、中分离出的血红蛋白样品进一步,在血红蛋白的提取和分离实验中有以下操作,试回答:实验时要对采集到的血液中的红细胞进行洗涤,洗涤的目的是。在的作用下,红细胞会破裂释放出血红蛋白。将释放出的血红蛋白收集到透析袋中透析,这是样品的,而透析的目的是。实验最后经过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行。(3)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡必须重装。这是因为。解析:本题考查血红蛋白的分离和提取。血红蛋白分离和提取实验的操作分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步。整个实验的原理是依据蛋白质的各种特性分离蛋白质。答案:(1)凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围(2)纯化去除血浆蛋白蒸馏水和甲苯粗分离去除相对分子质量较小的杂质纯度鉴定 (3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果客服唯一联系qq 1119139686 欢迎跟我们联系