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1、【实验目的】p掌握药物和化学物质对离体肠肌收缩活动的影响及机制。p熟悉家兔离体平滑肌的制备方法p 了解哺乳动物胃肠平滑肌的一般特性第1页/共21页 哺乳动物小肠平滑肌离体后，置于适宜的哺乳动物小肠平滑肌离体后，置于适宜的环境内，仍能进行节律性活动，并随环境的变环境内，仍能进行节律性活动，并随环境的变化表现出不同的反应。通过实验加深对平滑肌化表现出不同的反应。通过实验加深对平滑肌某些基本特性了解和药物对小肠平滑肌的影响。某些基本特性了解和药物对小肠平滑肌的影响。实实 验验 原原 理理第2页/共21页消化道平滑肌的特性消化道平滑肌的特性一般一般特性特性 电生理电生理特性特性 第3页/共21页1 1
2、自动节律性自动节律性2 2伸展性大伸展性大3 3兴奋性较低兴奋性较低4 4具紧张性收缩具紧张性收缩5 5对电刺激不敏感，对电刺激不敏感，对温度等刺激敏感对温度等刺激敏感一般特性一般特性第4页/共21页 特点特点 不稳定不稳定，-40-80mV 形成机制形成机制 K K+外流、钠钾泵的作用外流、钠钾泵的作用 电生理特性电生理特性 静息电位（静息电位（RpRp）第5页/共21页 慢波电位（慢波电位（BERBER）肌源性活动，肌源性活动，钠钾泵活动周期钠钾泵活动周期纵行肌与环行肌之间的间质细胞纵行肌与环行肌之间的间质细胞机制机制起源起源作用作用在此基础上激发动作电位在此基础上激发动作电位,并决定并决
3、定收缩的频率收缩的频率第6页/共21页动作电位动作电位Rp Rp BER BER 阈电位阈电位 Ap-Ap-肌肉收缩肌肉收缩特点特点缓慢，持续时间长缓慢，持续时间长1020ms1020ms形成形成去极相去极相:Ca2+:Ca2+内流内流 （少（少Na+Na+）复极相复极相:K+:K+外流外流 第7页/共21页 消消化化道道平平滑滑肌肌上上分分布布有有有有M、受受体体等等。因因此此，在在离离体体培培养养液液中中加加入入受受体体激激动动剂剂（毛毛果果芸芸香香碱碱M受受体体激激动动药药；乙乙酰酰胆胆碱碱N,M受受体体激激动动药药;肾肾上上腺腺素素,受受体体激激动动药药）或或阻阻断断剂剂（阿阿托托品品
4、M受受体体阻阻断药断药)时，可引起肠肌收缩或松弛。时，可引起肠肌收缩或松弛。第8页/共21页 实验动物实验动物实验动物实验动物 兔兔 实验器材实验器材实验器材实验器材 BLBLBLBL410410410410生物机能实验系统；恒温生物机能实验系统；恒温平滑肌槽；张力换能器、万能支架、温度计、烧杯、平滑肌槽；张力换能器、万能支架、温度计、烧杯、滴管、培养皿、注射器、手术剪、眼科镊滴管、培养皿、注射器、手术剪、眼科镊实实 验验 材材 料料第9页/共21页 药品与试剂药品与试剂药品与试剂药品与试剂 台氏液、台氏液、0.0010.0010.0010.001乙酰胆碱溶液、毛乙酰胆碱溶液、毛果芸香碱、果芸
5、香碱、0.1%0.1%0.1%0.1%硫酸阿托品溶液、硫酸阿托品溶液、1M1M1M1M氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液溶液、溶液、1M1M1M1M盐酸溶液溶液。盐酸溶液溶液。第10页/共21页 空空气气注注射射法法处处死死家家兔兔，之之后后立立即即剖剖开开腹腹部部，在在十十二二指指肠肠起起始始端端游游离离一一段段小小肠肠，依依次次用用细细线线扎扎成成2-3cm长长的的小小肠肠段段，保保存存于于37 台氏液中。台氏液中。1、制备离体小肠平滑肌标本、制备离体小肠平滑肌标本（离体肠肌结扎方法示意图）（离体肠肌结扎方法示意图）第11页/共21页实验仪器实验仪器预热药筒预热药筒实验药筒实验药筒支架杆支架杆HW-
6、400TH恒温平恒温平滑肌槽滑肌槽 第12页/共21页u 小小肠肠平平滑滑肌肌标标本本一一端端用用短短线线固固定定在在实实验验药药筒筒的的钩钩上上，使使小小肠肠平平滑滑肌肌被被浸浸没没在在台台氏氏液液中中，另另一一端端扎扎线线与与张张力力传传感感器器的的应应变变梁相连，并将张力换能器固定在支架杆上。梁相连，并将张力换能器固定在支架杆上。u调调节节气气量量调调节节旋旋钮钮，使使气气泡泡逐逐个个地地溢溢出出实验药筒，以供给标本足够的氧气。实验药筒，以供给标本足够的氧气。2、连接实验装置、连接实验装置第13页/共21页（离体小肠平滑肌的实验装置示意图）（离体小肠平滑肌的实验装置示意图）第14页/共2
7、1页3、软件操作、软件操作u打打开开BL-410/420系系统统选选择择“实实验验项项目目”“输输入入信信号号”“1通通道道”或或其其他他通道通道“张力张力”。u单单击击工工具具条条上上的的“开开始始”命命令令按按扭扭，进行记录。进行记录。第15页/共21页1、肠段肠段正常活动正常活动曲线。曲线。2、加入加入1:10000(g/ml)乙酰胆碱乙酰胆碱溶液溶液23滴。滴。3、加入、加入1%硫酸硫酸阿托品阿托品溶液溶液23滴。滴。4、加入、加入1:10000(g/ml)肾上腺素肾上腺素23滴。滴。5、加入、加入1mol/L盐酸盐酸溶液溶液23滴。滴。6、加入、加入1mol/L氢氧化钠氢氧化钠溶液溶
8、液23滴。滴。4、观察项目（、观察项目（6项）项）观察到明显效果后，立即更换实验药筒内液体，观察到明显效果后，立即更换实验药筒内液体，肠肌活动恢复稳定后再行下一项，！肠肌活动恢复稳定后再行下一项，！第16页/共21页5、结果记录、结果记录l 正常曲线正常曲线l 乙酰胆碱乙酰胆碱l 阿托品阿托品记录并标记各药物作用前后离体肠肌记录并标记各药物作用前后离体肠肌活动曲线活动曲线（结果可打印或手画）（结果可打印或手画）。l肾上腺素肾上腺素l盐酸盐酸l氢氧化钠氢氧化钠实验项目：在实验报告中标明实验项目：在实验报告中标明第17页/共21页注意事项注意事项1、在加药之前应先准备好、在加药之前应先准备好37台
9、氏液，以备实台氏液，以备实验中更换用液。验中更换用液。2、操作过程中不要牵拉肠肌；与张力换能器相、操作过程中不要牵拉肠肌；与张力换能器相连的线必须垂直，不要与管壁接触。连的线必须垂直，不要与管壁接触。3、如果加入上述各药液后效果不明显，可以补、如果加入上述各药液后效果不明显，可以补加少许药液，但不可一次加药过多。加少许药液，但不可一次加药过多。4、观察到明显效果后，立即更换实验药筒内台观察到明显效果后，立即更换实验药筒内台氏液，使肠肌活动恢复稳定后再进行下一项。氏液，使肠肌活动恢复稳定后再进行下一项。5、浴槽内温度应保持在、浴槽内温度应保持在37，不能过高或过低。，不能过高或过低。第18页/共
10、21页1.1.1.1.实实实实验验验验观观观观察察察察项项项项目目目目中中中中各各各各药药药药液液液液对对对对胃胃胃胃肠肠肠肠平平平平滑滑滑滑肌肌肌肌活活活活动动动动有有有有何何何何影影影影响响响响？试从受体角度分析各药对小肠平滑肌的作用试从受体角度分析各药对小肠平滑肌的作用试从受体角度分析各药对小肠平滑肌的作用试从受体角度分析各药对小肠平滑肌的作用2.2.2.2.通通通通过过过过该该该该实实实实验验验验,小小小小结结结结保保保保持持持持哺哺哺哺乳乳乳乳动动动动物物物物离离离离体体体体平平平平滑滑滑滑肌肌肌肌正正正正常常常常收收收收缩缩缩缩活动所具备的条件活动所具备的条件活动所具备的条件活动所具备的条件实验讨论实验讨论第19页/共21页在进行离体组织或器官实验时，为了维持标本的“正常”功能活动，必须尽可能地使标本所处的环境因素与体内相近似。这些因素包括电解质成分、渗透压、酸碱度、温度，葡萄糖和O2O2含量等。第20页/共21页感谢您的观看！第21页/共21页