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1、Coombs试验概述直接Coombs试验原理及方法直接Coombs试验临床意义第1页/共11页一一.Coombs.Coombs试验概述试验概述1945年，英国免疫学家Coombs等人发明的一种能检测红细胞表面抗体的新试验，故称之Coombs试验，亦称抗人球蛋白试验。抗人球蛋白试验是抗人球蛋白参与的一种间接血凝试验，利用抗人球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁的作用，连接与红细胞表面抗原结合的不完全抗体，使红细胞凝集。第2页/共11页不完全抗体 能够与相应的抗原牢固结合,但因其分子量较小,体积小,不能起到桥联作用,在一般条件下不出现可见反应。Coombs试验用于检测不完全抗体 直接Coombs试验：检
2、查红细胞上有无不完全抗体。间接Coombs试验：检查血清中有无游离的不完全抗体。第3页/共11页二二.直接直接CoombsCoombs试验试验（一）直接（一）直接CoombsCoombs试验基本原理试验基本原理 若红细胞在体内被不完全抗体吸附，由于不完全抗体分子量小，体积小，不能起到桥联作用，仅使红细胞处于致敏状态，在一般条件下不出现可见反应。加入抗球蛋白试剂，与红细胞上吸咐的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼可见的凝集。第4页/共11页待检红细胞不完全抗体抗人球蛋白直接coombscoombs试验原理示意图第5页/共11页（二）直接（二）直接CoombsCoombs试验方法试验方
3、法1.洗涤红细胞：取50L受检者全血，以0.9%生理盐水洗涤3次 （1500r/min离心1min）；2.配制3%-5%红细胞盐水悬液；3.编号：分别取三个试管，标记为IgG、C3d、IgG/C3d；4.三管中分别加入50L3%-5%红细胞盐水悬液，加入两滴相应的抗人球蛋白试剂（抗IgG、C3d、IgG/C3d）；5.轻轻混匀后3000r/min离心15s，轻轻摇动试管，观察结果。第6页/共11页（三）直接（三）直接CoombsCoombs试验结果判读试验结果判读 阳性结果-出现红细胞凝集，表示红细胞上有 相应抗体存在；阴性反应-红细胞不凝集，表示红细胞上没有相应抗体存在。第7页/共11页（四）注意事项（四）注意事项1.标本采集后应立即进行试验，延迟试验可使抗体从细胞上丢失；2.受检红细胞一定要洗涤充分，否则红细胞悬液中混杂的血清蛋白会中和抗人球蛋白；3.直接抗人球蛋白试验在初读结果后，放在室温中5-10分钟，再次离心观察。这样孵育之后，若红细胞被C3d致敏时，重新离心观察结果可使阴性结果转变为阳性结果，而IgG致敏的红细胞在孵育后反应更弱。第8页/共11页三.直接直接CoombsCoombs试验临床意义试验临床意义自身免疫性溶血性贫血新生儿溶血症溶血性输血反应药物诱发的免疫性溶血性贫血第9页/共11页第10页/共11页谢谢您的观看！第11页/共11页