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1、食用菌的组织分离技术第1页，共23页，编辑于2022年，星期三一、实验目的一、实验目的v1.掌握几种原种培养基的配方及其制作。掌握几种原种培养基的配方及其制作。v2.了解食用菌原种的制作原理，掌握制备过了解食用菌原种的制作原理，掌握制备过程。程。v3.了解灭菌的基本原理，掌握蒸气灭菌锅的了解灭菌的基本原理，掌握蒸气灭菌锅的使用方法。使用方法。第2页，共23页，编辑于2022年，星期三二、实验材料v 灭菌锅、超净工作台、培养室、菌种试管灭菌锅、超净工作台、培养室、菌种试管 玉米粒、铝锅、石膏、碳酸钙、蔗糖、天平、玉米粒、铝锅、石膏、碳酸钙、蔗糖、天平、水桶、大盆、牛皮纸、小线绳、玻璃瓶、橡水桶、
2、大盆、牛皮纸、小线绳、玻璃瓶、橡皮筋皮筋、75酒精消毒瓶、酒精消毒瓶、75酒精消毒棉酒精消毒棉球瓶、接种针、火柴、记号笔。球瓶、接种针、火柴、记号笔。第3页，共23页，编辑于2022年，星期三原种培养基的常用配方原种培养基的常用配方v1.玉米粒培养基玉米粒培养基 配方：配方：玉米粒玉米粒98%石膏石膏1%碳酸钙碳酸钙1%v2.棉籽壳培养基棉籽壳培养基 配方：棉籽壳配方：棉籽壳88%麸皮麸皮10%糖糖1%碳碳酸钙酸钙1%v3.木屑培养基木屑培养基 配方：木屑配方：木屑78%麸皮麸皮20%糖糖1%碳酸碳酸钙钙1%第4页，共23页，编辑于2022年，星期三三三 实验内容与方法实验内容与方法v1.配方
3、配方:玉米粒玉米粒98%，石膏，石膏1%，碳酸，碳酸1%。v2.按制种需要量称取玉米粒、石膏粉和碳酸钙。按制种需要量称取玉米粒、石膏粉和碳酸钙。v3.将称好的玉米粒倒入盆内，用清水清洗几次，去掉杂质将称好的玉米粒倒入盆内，用清水清洗几次，去掉杂质1624 h，至玉米粒充分吸足水分，但不过分膨胀和不开，至玉米粒充分吸足水分，但不过分膨胀和不开口为宜。口为宜。v4.将泡好的将泡好的玉米玉米粒放在锅内，加水浸过粒放在锅内，加水浸过玉米玉米粒，粒，放在电炉上煮。检查，一直煮到种子内无白放在电炉上煮。检查，一直煮到种子内无白心为止，切不可将种皮煮破。心为止，切不可将种皮煮破。v5.将煮好的将煮好的玉米玉
4、米粒捞出控干水，使粒捞出控干水，使玉米玉米粒含水粒含水量达量达5560。第5页，共23页，编辑于2022年，星期三三三 实验内容与方法实验内容与方法v6.将控干的玉米粒放在盆内，然后将称好的石膏粉和碳将控干的玉米粒放在盆内，然后将称好的石膏粉和碳酸钙倒入盆中搅拌均匀。酸钙倒入盆中搅拌均匀。v7.装瓶，将拌匀的培养料装入菌种瓶或菌种袋中，装料装瓶，将拌匀的培养料装入菌种瓶或菌种袋中，装料要均匀，装至瓶肩处或菌种袋的要均匀，装至瓶肩处或菌种袋的2/3处。处。v8.装好瓶后，将瓶口包一层防潮纸，用线绳将瓶口扎好，装好瓶后，将瓶口包一层防潮纸，用线绳将瓶口扎好，准备灭菌。准备灭菌。v9.灭菌灭菌,方法
5、同母种的灭菌方法，灭菌压强一般为方法同母种的灭菌方法，灭菌压强一般为0.12 0.14 Mpa，灭菌时间为，灭菌时间为1.52.O h。第6页，共23页，编辑于2022年，星期三三三 实验内容与方法实验内容与方法v 10.接种，接种间消毒与母种相同。接种时一人手拿母种接种，接种间消毒与母种相同。接种时一人手拿母种试管，在酒精灯火焰旁用接种钩试管，在酒精灯火焰旁用接种钩(铲铲)将试管内斜面上菌丝将试管内斜面上菌丝体切成小块；另一人将原种瓶瓶口倾斜在酒精灯火焰体切成小块；另一人将原种瓶瓶口倾斜在酒精灯火焰旁，将瓶盖掀开一个小缝，这时拿母种试管的人迅速旁，将瓶盖掀开一个小缝，这时拿母种试管的人迅速将
6、切好的一小块母种移接到原种瓶内，瓶口用酒精灯将切好的一小块母种移接到原种瓶内，瓶口用酒精灯烧一下，然后立即把原种瓶口盖严，扎好。一般一管烧一下，然后立即把原种瓶口盖严，扎好。一般一管母种接九瓶母种接九瓶(袋袋)左右原种。左右原种。v 11.把接种好的原种瓶送到所需温度的培养箱或培养室把接种好的原种瓶送到所需温度的培养箱或培养室内培养。内培养。v 12.一接种后应经常检查有无杂菌污染。发现污染瓶，一接种后应经常检查有无杂菌污染。发现污染瓶，立即挑出。立即挑出。v 13生长好的原种菌丝洁白、粗壮、纯净，可用来扩大生长好的原种菌丝洁白、粗壮、纯净，可用来扩大繁殖栽培种。繁殖栽培种。第7页，共23页，
7、编辑于2022年，星期三(三三)原种质量检查原种质量检查v 无论玉米粒原种还是棉籽壳原种，接种后无论玉米粒原种还是棉籽壳原种，接种后在在25左右培养左右培养2040 d，菌种即可长满瓶。，菌种即可长满瓶。品质优良的原种，菌丝洁白、纯净、有食用品质优良的原种，菌丝洁白、纯净、有食用菌特有的香味。若出现黄、绿、黑等颜色的菌特有的香味。若出现黄、绿、黑等颜色的毛状物或菌瓶内有酸、臭味道，即是污染杂毛状物或菌瓶内有酸、臭味道，即是污染杂菌，不能使用。应将其灭菌后在远离培养场菌，不能使用。应将其灭菌后在远离培养场地处深埋。地处深埋。第8页，共23页，编辑于2022年，星期三 四、作业四、作业v 1.如何
8、获得优质的原种如何获得优质的原种?v 2.制作原种过程中应注意哪些问题制作原种过程中应注意哪些问题?第9页，共23页，编辑于2022年，星期三实实 验验 四四 栽栽 培培 种种 的的 制制 作作 技技 术术第10页，共23页，编辑于2022年，星期三一、实验目的一、实验目的v 通过实验，使同学们掌握栽培种的制通过实验，使同学们掌握栽培种的制作方法和接种技术。作方法和接种技术。第11页，共23页，编辑于2022年，星期三二、实验材料v 超净工作台、培养室、土式常压灭菌锅、高压灭菌锅、超净工作台、培养室、土式常压灭菌锅、高压灭菌锅、棉籽壳棉籽壳(或玉米芯、木屑或玉米芯、木屑)、麦麸、麦麸(或玉米面
9、、米糠或玉米面、米糠)、过磷、过磷酸钙、石膏、水桶、盘称、搪瓷量杯、聚丙烯塑料酸钙、石膏、水桶、盘称、搪瓷量杯、聚丙烯塑料袋或菌种瓶、颈圈、棉花、牛皮纸、细线绳、接种勺袋或菌种瓶、颈圈、棉花、牛皮纸、细线绳、接种勺(或大镊子、接种铲或大镊子、接种铲)、小镊子、酒精灯、小镊子、酒精灯、75消毒酒精消毒酒精瓶、瓶、75消毒酒精棉球瓶、火柴、记号笔。消毒酒精棉球瓶、火柴、记号笔。第12页，共23页，编辑于2022年，星期三三、实验内容与方法三、实验内容与方法v（一一)培养基的制作培养基的制作v 1配方配方 玉米芯玉米芯78、麦麸或米糠、麦麸或米糠13、玉米面、玉米面7%、过磷酸钙过磷酸钙1、糖、糖1
10、(料：水。料：水。1：l 31：I 4)。v 2拌料拌料 根据制种需要按各种营养成分的配比称量根据制种需要按各种营养成分的配比称量各种原料。然后将玉米芯和麦麸玉米面先混合一起。各种原料。然后将玉米芯和麦麸玉米面先混合一起。过磷酸钙、蔗糖等混溶在拌料用的水中，搅拌均匀后，过磷酸钙、蔗糖等混溶在拌料用的水中，搅拌均匀后，泼洒到玉米芯上再搅拌均匀。泼洒到玉米芯上再搅拌均匀。v 3测培养料水分测培养料水分 培养料拌好后，用手抓一把培料握在手培养料拌好后，用手抓一把培料握在手中，用力捏紧，从手指缝中有水印但无水滴滴下这时的含中，用力捏紧，从手指缝中有水印但无水滴滴下这时的含水量合适，为水量合适，为626
11、4，若含水量不足可再加少量，若含水量不足可再加少量的水，充分搅拌均匀，再检测，直至含水量合适为止。的水，充分搅拌均匀，再检测，直至含水量合适为止。第13页，共23页，编辑于2022年，星期三三、实验内容与方法三、实验内容与方法v4装瓶装瓶 将拌好的培养料装入玻璃瓶中，边将拌好的培养料装入玻璃瓶中，边装边压实，一直装到玻璃瓶容积的装边压实，一直装到玻璃瓶容积的45左右。左右。v5封瓶口封瓶口 将瓶口用防潮纸盖好，用绳扎好。将瓶口用防潮纸盖好，用绳扎好。擦净玻璃瓶擦净玻璃瓶外面所粘的培养料。外面所粘的培养料。第14页，共23页，编辑于2022年，星期三(二)灭 菌v 由由于于栽栽培培种种数数量量大
12、大,小小型型灭灭菌菌锅锅不不合合适适，有有条条件件的的单单位位可可以以购购置置大大型型立立式式或或卧卧式式电电热热高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅。此此锅锅容容量量较较大大，一一次次可可以以消消毒毒17 17 cm cm 33cm33cm塑塑料料袋袋9090袋袋左左右右。灭灭菌菌时时应应按按灭灭菌菌锅锅的的使使用用说说明明进进行行操操作作。栽栽培培种种由由于于装装量量较较多多且且较较实实，一一般般要要求求1 14 41.1.5Mpa5Mpa，灭菌灭菌1.52.0 h1.52.0 h。第15页，共23页，编辑于2022年，星期三(三)接种和培养v 1.接接种种 接接种种间间消消毒毒与与母母种种相相同
13、同，菌菌种种袋袋放放入入接接种种室室或或接接种种箱箱内内，打打开开紫紫外外灯灯消消毒毒30 rnin。裁裁培培种种的的接接种种方方法法与与原原种种接接种种相相似似。两两人人合合作作接接种种时时，一一人人以以无无菌菌操操作作方方法法用用接接种种铲铲或或大大镊镊子子取取一一小小块块原原种种菌菌丝丝；另另一一人人在在酒酒精精灯灯火火焰焰旁旁打打开开栽栽培培种种袋袋口口(袋袋口口应应倾倾斜斜在在火火焰焰旁旁，切切勿勿直直立立)，迅迅速速将将原原种种按按到到袋袋中中，塞上棉塞或盖上无棉盖体的盖子即可。塞上棉塞或盖上无棉盖体的盖子即可。第16页，共23页，编辑于2022年，星期三(三)接种和培养v2.培养
14、培养v 接接种种完完毕毕，将将栽栽培培袋袋搬搬到到适适宜宜这这种种食食用用菌菌菌菌丝丝生生长长的的温温度度(一一般般比比最最适适生生长长温温度度低低23)、空空气气相相对对湿湿度度为为6070的的培培养养室室内培养。内培养。第17页，共23页，编辑于2022年，星期三(四)栽培种质量检查v 栽栽培培种种在在培培养养过过程程中中，应应经经常常检检查查，遇遇有有污污染染袋袋及及时时检检出出处处理理掉掉，不不得得与与好好的的菌菌种种袋袋放放在在一一起起。经经3040 d的的培培养养后后，菌菌丝丝可可长长满满栽栽培培袋袋，即即可可供供栽栽培培使使用用。若若菌菌袋袋内内长长出出原原基基，说说明明菌菌种种
15、已已老老化化，若若有有黄黄、绿绿、黑黑等等杂杂色色斑斑点点或或连连成成片片时时，说说明明菌菌种种已已污污染染，不不可使用。可使用。第18页，共23页，编辑于2022年，星期三四、作业v 1制作栽培种的技术关键是制作栽培种的技术关键是什什?v 2.综综述述母母种种、原原种种、栽栽培培种种在在生生产产上上的的作作用用?第19页，共23页，编辑于2022年，星期三实验五实验五 平菇的栽培方法平菇的栽培方法第20页，共23页，编辑于2022年，星期三一、实验目的一、实验目的v 通过平菇棉籽壳袋栽的实验，使同学通过平菇棉籽壳袋栽的实验，使同学们掌握平菇的栽培方法和技术。们掌握平菇的栽培方法和技术。第21
16、页，共23页，编辑于2022年，星期三二、实验材料 新鲜无霉变的玉米芯、新鲜无霉变的玉米芯、麦麸、石灰、聚麦麸、石灰、聚丙烯簿膜塑料筒丙烯簿膜塑料筒、牛皮纸、塑料环、超净工、牛皮纸、塑料环、超净工作台、栽培种、脸盆、作台、栽培种、脸盆、25%含量的多菌灵等。含量的多菌灵等。第22页，共23页，编辑于2022年，星期三三、实验内容与方法三、实验内容与方法 常见配方：常见配方：1、棉子壳、棉子壳98%，蔗糖，蔗糖1%，石膏粉，石膏粉1%。2、玉米芯、玉米芯84%，麦麸，麦麸14%，蔗糖，蔗糖1%，石灰，石灰1%3、甘蔗渣、甘蔗渣90%，麦麸，麦麸6%，钙镁磷肥，钙镁磷肥2%，石膏粉石膏粉1%。第23页，共23页，编辑于2022年，星期三