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1、食源性致病菌的快速检食源性致病菌的快速检测测第1页，共24页，编辑于2022年，星期三食源性致病微生物检验大肠菌群检验：Brilliance大肠菌群/大肠杆菌显色培养基阪崎肠杆菌检验：Brilliance阪崎肠杆菌显色培养基金葡菌检验：Dryspot金葡菌乳胶凝集试剂盒生化鉴定：RapID鉴定板条第2页，共24页，编辑于2022年，星期三大肠菌群(coliforms)的检验大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源人的粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。传统检验方法：1、MPN法；2、平板计数法；时
2、间至少需要2-4天第3页，共24页，编辑于2022年，星期三GB/T4789.3-2010 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数第一法：MPN法第4页，共24页，编辑于2022年，星期三GB/T4789.3-2010 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数第二法：平板计数法第5页，共24页，编辑于2022年，星期三Brilliance大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂原理原理：培养基中含有两种显色底物Rose-Gal(检测-半乳糖苷酶)和X-Glu(-葡萄糖醛酸酶活性)使用方法使用方法：采取涂布法、倾注法或滤膜法均可；37C 培养24h制成培养基：BO8004M(100ml/瓶);BO8004T(250ml
3、/瓶);BO8004V(500ml/瓶);大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂干粉：CM1046B（500g）第6页，共24页，编辑于2022年，星期三阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的检验革兰氏阴性杆菌，可引新生儿脑膜炎、败血症及致死性小肠结肠炎高度耐受干燥，为其在奶粉生产的干燥环境中存活提供了非常有利的条件婴幼儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要途径第7页，共24页，编辑于2022年，星期三GB/T4789.40-2010食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 第8页，共24页，编辑于2022年，星期三阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)显色培养基曾写入
4、GB2008版阪崎肠杆菌检测方法原理原理：与其他肠杆菌不同，阪崎肠杆菌独有-葡萄糖苷酸酶。显色琼脂中含有该种酶的底物。菌落颜色菌落颜色：干粉：CM1055B制成培养基：BO8002M(100ml/瓶);BO8002T(250ml/瓶);BO8002V(500ml/瓶);第9页，共24页，编辑于2022年，星期三金葡菌的鉴定传统方法 血浆凝固酶试验：取新鲜配置兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入BHI 培养物0.2 mL0.3 mL，振荡摇匀，置361 温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。第1
5、0页，共24页，编辑于2022年，星期三Dryspot 加强型金黄色葡萄球菌试剂盒检测的乳胶试剂完全固定在检测卡上减少手工操作减少操作错误 降低污染的可能室温储存，质量更稳定，储存运输更安全货号：DR0100M规格：120测试原理：凝集因子纤维蛋白原 蛋白质A IgG 荚膜多糖IgG 第11页，共24页，编辑于2022年，星期三spottedAgglutinate with antigen Extract5.4.Antibody absorbedto latexDry formulationspottedBacterial suspensionor sera addedAgglutinatio
6、nobservedReagent Formulation干式乳胶凝集试剂第12页，共24页，编辑于2022年，星期三操作程序：结果观察：阳性结果阳性结果：20秒之内发生凝集 阴性结果阴性结果：20秒之后在检测圈内未发生凝集反应且蓝色悬浮液保持光滑注意事项：2 至25 之间保存，确保干燥，防止卡片上形成冷凝水盐水试验反应区和对照反应区的小环内挑取疑似菌落在盐水中乳化与乳胶点混合铺开整个菌悬液，覆盖整个反应区第13页，共24页，编辑于2022年，星期三生化鉴定Remel RapID 手工鉴定系统原理原理：生化鉴定；酶学技术；基于特定底物的微生物降解可被多种指示剂系统检测到特点：特点：简单的一步接种
7、简单的一步接种 4小时孵育，无需厌氧培养小时孵育，无需厌氧培养 无需覆盖矿物油无需覆盖矿物油 检测构成酶，无需微生物的生长，检测构成酶，无需微生物的生长，结果清晰结果清晰-颜色鲜艳清晰，与比色卡对比更易判读颜色鲜艳清晰，与比色卡对比更易判读 大容量、及时更新的数据库大容量、及时更新的数据库第14页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID 手工鉴定系统 RapID ONERapID ONE 用于氧化酶阴性、革兰氏染色阴性杆菌（如肠杆菌科细菌）的鉴定 RapID ANA IIRapID ANA II 用于厌氧菌鉴定 RapID NF PlusRapID NF Plus 用于不发酵葡萄糖的革兰
8、氏菌阴性菌以及其他选择性发酵葡萄糖的氧化酶阳性的革兰氏阴性菌的鉴定 RapID NHRapID NH 用于奈瑟氏菌、嗜血杆菌和包括卡他莫拉菌在内的其他菌的鉴定 RapID CB PlusRapID CB Plus 用于棒状杆菌和其他不规则的革兰氏阳性菌的鉴定第15页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID 手工鉴定系统 RapID Yeast PlusRapID Yeast Plus 用于酵母菌和类酵母菌的鉴定 RapID STRRapID STR 用于链球菌和其他相关微生物（如肠球菌、明串珠菌和单增李斯特菌等）的鉴定 RapID SS/uRapID SS/u 用于尿路致病菌（革兰氏阳性
9、菌、革兰氏阴性菌和一定的酵母）的鉴定 RapID STAPH PLUS-RapID STAPH PLUS-用于葡萄球菌和其他过氧化氢酶阳性、革兰氏阳性球菌的鉴定第16页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID操作程序操作程序取适合的培养基上经纯培养得到分离株选择适合的接种液，制成一定浓度的菌悬液(与麦氏浊度标准管比较浊度)掀开一角的塑料盖，用移液管向板条中加入菌悬液第17页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID操作程序操作程序反应槽接种槽（槽板后部）反应槽（槽板前部）第18页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID Procedures第19页，共24页，编辑于2022年，星期三RapID Procedures第20页，共24页，编辑于2022年，星期三ERIC on the web第21页，共24页，编辑于2022年，星期三ERIC-web version第22页，共24页，编辑于2022年，星期三进一步联系Thermo Fisher Scientific 市场及技术支持：孙颖（010-80499033-3127；13811814910）销售代表：张璐（13810067469）合作伙伴：北京兰伯瑞生物技术有限责任公司 技术支持：文峰（13716865874）第23页，共24页，编辑于2022年，星期三谢 谢！第24页，共24页，编辑于2022年，星期三