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1、2023新课标版生物高考第二轮复习第十单元现代生物科技专题专题2 8基因工程与蛋白质工程L肿瘤已成为严重危害人类健康的高发病，主要的治疗手段有化疗、放疗和手术等，而肿瘤细胞对肿瘤药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一，研究表明肿瘤细胞耐药性的产生与过量表达的跨膜转运蛋白BCRP有关,研究人员尝试建立稳定表达BCRP的细胞系。回答下列问题：（1）研究人员从人的（填 普通体细胞 或 癌细胞）中提取出总RNA,逆转录后进行PCR扩增获得大量BCRP基因。（2）随后构建BCRP基因的真核表达载体，研究人员选择了 P质粒作为载体，因为其具有能被真核细胞识别的启动子，作用是；抗新霉素的标记基因;多个限制酶
2、切割位点,作用是 O（3）在不破坏表达载体各功能序列的基础上,对上述环状载体进行酶切得到线性化载体，随后将其导入受体细胞，线性化载体可整合到染色体D N A上。联系所学知识推测进行酶切得到线性化载体的原因是O答 案（1）癌 细 胞（2）RNA聚合酶识别和结合的位点便于插入外源基因（3）与环状载体相比，线性化载体能更稳定地存在并发挥功能解 析（1）分析题意可知，肿瘤细胞耐药性的产生与过量表达的跨膜转运蛋白BCRP有关，故为获取BCRP基因，需要从癌细胞中提取出总RNA,逆转录后进行PCR扩增。（2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点,用于驱动基因的转录过程;载体中有多个限制酶切割位点的作用是便
3、于插入外源基因。（3）与环状载体相比，线性化载体能更稳定地存在并发挥功能，故需要酶切得到线性化载体。第1页 共1 2页2.如图所示为RT-PCR（逆转录-荧光PCR技术）的原理:PCR过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和淬灭基团（抑制荧光发出）,当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。川 II 川pillllMHIIIII倡 I川I TTT引物米 弓型荧光基团I淬灭基团米;_.u荧光检测请回答下列问题：（l）PCR技术的目的是 o RT-PCR过程中，需 先 将 RNA逆转录成cDNA,故装置中需添加的酶有。（2）对 新 冠 病 毒 进
4、 行 检 测 时 才 采 针 的 设 计 依 据 是.探针与模板结合发生在PCR循环中的（选 填 变 性 复 性 或 延 伸）阶段。（3）若监测系统检测到荧光信号很!j可判定该检测样本为阳性，其原理是.（4）为了在没有核酸检测的条件下及早发现新冠病毒，我 国 于 2022年 3 月 1 1 日推出新冠病毒抗原检测试剂盒作为核酸检测的补充措施，该 试 剂 盒 的 检 测 原 理 是答 案 Q）大量扩增目的基因片段，用 于 检 测 逆 转 录 酶（2）一段已知目的基因的核音酸序列复性（3）样本中的新冠病毒核酸会被探针识从而进行快速复制，导致监测系统检测到荧光信号（4）抗原与抗体的特异性结合解 析（
5、l）PCR技术的目的是大量扩增目的基因片段，用于基因工程或检测。以 RNA为模板逆转录成cDNA,是逆转录过程，需要用到逆转录酶。（2）探针是可以与模板结合的一小段DN A序列,故设计的依据是一段已知目的基因的核苗酸序列，变性过程是D N A双链打开的过程,复性时，引物与探针结合到模板D N A上。（3）根据题意,当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出第 2 页 共 1 2 页荧光。因此，样本中有新冠病毒核酸时，能进行快速复制，导致监测系统检测到荧光信号。（4）新冠病毒抗原检测试剂盒的检测原理是抗原与抗体的特异性结合。3.我国科学家黄三文团队通过基因编辑技术培育
6、出二倍体自交系和杂交优势显著的杂交马铃薯品系优薯1号，突破了百年来马铃薯自交不亲和,薯块只能无性繁殖的难题。如图是科学家用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因的示意图。a链 Cas9蛋白/、/目标DNA川川-hill川川川ullilhi少 K识别序列|,|昌 向导RNAn m n n u n n n n n n n n u ju n 【川 1川川川川HMUIIUI-H I-H 初DN（1）据图分析CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到 进行切割。已知CRISPR/Cas9仅存在于原核生物中，故需借
7、助技术才能在马铃薯细胞中发挥作用。Cas9蛋白和向导RNA结合形成的复合物能切割DNA,从功能上来看该复合物相当于基因工程中的限制酶,CRISPR/Cas9打破了限制酶的局限性。所以在使用CRISPR/Cas9系统对不同基因进行编辑时，应使用（填 相同或不同）的向导RNA。（2）敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因后可让该植株自交观察是否产生种子来检测其作用效果，这属于 水平的鉴定。基因编辑技术比传统的基因工程技术更准确,目的性更强。通过上述材料，推测利用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行基因敲除的应用价值可能有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
8、 _ _ _（答出一点即可）。答 案（1）一个特定的基因位点转基因只能识别一种特定的核甘酸序列不同（2）个体生物学（3）进行基因治疗、研究基因功能、构建疾病治疗动物模型等第3页 共1 2页解 析(1)据题意可知，向导RNA是一条单链RNA,主要功能是与目标DNA(目的基因)上特定碱基序列互补配对,从而定向引导Cas9蛋白与一个特定的基因位点进行结合，并在该位点切割DNA。因为CRISPR/Cas9仅存在于原核生物中，而马铃薯属于真核生物,故需借助转基因技术才能实现基因在不同生物间的转移和表达。Cas9和向导RNA结合形成的复合物具有类似限制酶的作用，但限制酶在发挥作用时只能识别一种特定的核苗酸
9、序列，而CRISPR/Cas9则打破了这一局限性。CRISPR/Cas9系统具有定向切除DNA片段的作用,因此对不同基因进行编辑时，应使用不同的向导RNA,与相应的目标DNA进行配对，完成定点切除。(2)敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因后可让该植株自交观察是否产生种子来检测其作用效果，这属于个体生物学水平的鉴定。与传统的基因工程相比较，运用CRISPR/Ca9基因编辑技术培育转基因生物,可以更准确地进行目的基因的敲除，且明显避免了目的基因随机插入受体细胞DNA引发的生物安全性问题,因此该技术有望应用在基因治疗、研究基因功能、构建疾病治疗动物模型等方面。4.心脏移植是挽救终末期心脏病患者生命唯一
10、有效的手段，然而心脏移植过程中会发生缺血再灌注损伤(IRI),可能导致心脏坏死。研究发现,IRI通过促进CaspaseS等一系列凋亡基因的表达，导致细胞凋亡坏死,最终引起器官损伤。根据Caspase8基因合成的小干扰RNA(siRNA)可以使CaspaseS基因沉默，有效抑制IRI所致的器官损伤。图是利用猪的心肌细胞开展siRNA作用研究的示意图。,iRNA对应的DNA序列Cnspnse8基因W I重组质粒pCMV质粒-F回答下列问题：(1)图中步骤构建重组质粒需要使用 等工具酶。与直接将siRNA导入猪的心肌细胞相比，通过重组质粒将siRNA对应的DNA序列导入心肌细胞，其优点是第4页 共1
11、2页_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _（答出一点）。（2）siRNA对 应 DNA序列在心肌细胞中表达产生的siRNA,与 RISC组装形成基因沉默复合物，通过抑制基因表达的 过程，使 Caspase8基因沉默，从而降低IR I引起的细胞凋亡。研究人员根据Caspase8基因的碱基序列，设计了三种序列分别导入猪的心肌细胞，通过测定靶基因Caspase8的 mRNA含量来确定最优序列。测 定 mRNA含量时，需提取心肌细胞的总
12、RNA,经过过程得到cDNA,再 进 行 PCR扩增，测 定 PCR产物量，结果如图所示。据 此 判 断 最 优 序 列 是.对 照 序 列 1序列2 序列3（4）选用猪的心肌细胞作受体细胞是因为猪在基因、解剖结构、生理生化和免疫反应等方面与人类极为相似。为了解决心脏移植供体短缺问题，许多科学家正在研究用猪心脏代替人的心脏。你认为将猪心脏移植到人体面临的最大挑战是，请说出一种解决这一问题的思路:O答 案（1）限制酶、D N A连接酶 可持续产生siRNA,使靶基因长时间沉默（或:可以使质粒只在特定的组织中表达;或:可构建某基因永久沉默的实验动物模型）（2）翻 译（3）逆 转 录 序 列 2（4
13、）免疫排斥反应可以利用基因工程技术将猪与免疫排斥有关的抗原基因敲除;转入一些人类特有蛋白的基因，将猪细胞伪装成人的细胞解 析（1）限制酶、DN A连接酶是构建重组质粒需要的工具酶。与直接将siRNA导入猪的心肌细胞相比，通过重组质粒将siRNA对 应 的 D N A序列导入心肌细胞,siRNA可随重组质粒增殖而持续产生，从而使靶基因长时间沉默。（2）据图可知，基因沉默复合物作用于Caspase8 mRNA,抑制了基因表达的翻译过程，使 Caspase8基因沉默。测 定 m RNA含量时，需提取细胞总RNA,经过逆转录过程得到cDNA,第 5 页 共 1 2 页再 进 行 P C R 扩增，通
14、过 P C R 产物的量间接反映细胞中相关基因的mR N A 含量。根据图示可知,在序列2作用下,Ca s p a s e 8的 mR N A 含量最低，表明其抑制效果最好,是最优序列。(4)免疫排斥反应是将猪心脏移植到人体面临的最大挑战。利用基因工程技术将猪与免疫排斥有关的抗原基因敲除，或转入一些人类特有蛋白的基因,将猪细胞伪装成人的细胞等可能解决这一问题。5.Cr e/lo x P重组酶系统是对转基因受体细胞D N A 上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。请回答下列问题：图1 ,-*-、/-A-、/-人-、5，一ATAACTTCGT
15、ATAATGTATGCTATACCAAGTEAT3,3TATTCAACCATATTACATACCTTAlCfTrCAATAT(l)lo x P具有方向性，结 构 如 图 I所示，其 中 决 定 方 向 的 序 列 是(填 序 号)。(2)Cr e 酶能催化如图2 所示的反应，随机识别D N A 分子上同向排列的两个相同的lo x P序列,并在图1 的中特定位点切断D N A 双链，切口被重新连接后，保留片段，从而实现目标基因的敲除。若经Cr e 酶作用使得两个lo x P位点间的序列发生反转,其原因可能是 o(3)Cr e/lo x P重组酶系统可以调控基因的表达，在 目 的 基 因(填 上
16、游 或 下 游 )插入一个带有lo x P位点的编码终止密码子的序列，在 Cr e 酶存在的情况下，目 的 基 因(填 表 达 或 不 表达 )。(4)抗虫烟草的制备过程中.通常用 法将重组质粒导入烟草细胞，导入成功后，标记基因如抗除草剂基因可用Cr e/lo x P重组酶系统将其，其继续留在烟草体内可能会将抗除草剂基因转移到杂草中，造成基因污染。(5)GUS 基因编码的酶可将无色底物生成蓝色产物,G F P 基因会产生绿色荧光蛋白酒已合Cr e/lo x P重组酶系统来研究发育生物学的问题。.35S loxP CIS loxP GFPHH PMCr隔图3构建基因表达载体时，可用 酶 将 lo
17、 x P序列、G U S基因及G F P 基因连接，接 上 3 5 S 启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区(如图3 所示)，这是由于 基因自身无启动子而无法表达。Cr e 基 因 经 3 8。热处理后可被激活表达，在此前提下组织中可检测出绿色荧光区，据此分析绿色荧光区形成的原因是，采用 等手段可以扩大组织中绿色荧光区的面积。第 6页 共 12页答 案 (2)2两个lo x P序 列 方 向 相 反 上 游 表 达(4)农 杆 菌 转 化 敲 除(5)限制酶和D N A连 接G F P Cr e酶能(特异性识别并)切割lo x P序列，使G F P基因得以表达 延长热处理时间解 析(
18、1)由图1可知，决定方向的是序列。(2)Cr e酶识别两个相同的k)x P序列,从而实现对目标基因的敲除.片段1自身环化且带有待敲除基因，因此应保留片段2。若两个lo x P位点间的序列发生反转，则可能是两个lo x P序列方向相反。(3)Cr e/lo x P重组酶系统可以调控基因的表达，在目的基因上游插入带有lo x P位点的编码终止密码子的序列,Cr e酶会切开lo x P位点，使编码终止密码子的序列不发挥作用.因此目的基因表达。(4)将目的基因导入植物细胞通常采用农杆菌转化法，导入成功后，可用Cr e/lo x P重组酶系统将抗除草剂基因敲除,其继续留在烟草体内可能会转移到杂草中，造成
19、基因污染。(5)构建基因表达载体时,可用限制酶和D N A连接酶处理相关基因，使lo x P序列、G U S基因及G F P基因连接，接上3 5 S启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区，是因为G F P基因自身无启动子不能表达。Cr e基因经过热处理后被激活表达,Cr e酶切割了 lo x P序列，使G F P基因得以表达，最终出现绿色荧光区，延长热处理的时间使Cr e基因充分表达，可以扩大绿色荧光区面积。6.实时荧光RT-PCR技术(RT-q PCR)利用荧光标记探针对扩增产物量进行实时跟踪，再根据扩增曲线计算出起始模板量，即样本病毒载量。如图是利用RT-q PCR进行新型冠状病毒
20、(S ARS-Co V-2)载量测定的主要过程。请据图回答:样本采集及病毒灭活处理步骤1:病 毒,RNA提取iXI荧 学 测/白醐K、R N A/扁 曲*酶抑制剂)7 K发 总 光步骤2:病毒cDNA合成5,-3病毒RNA 酶N、引物、_3，dNTP等 延伸|勿引物MRNA-DNA杂交分子TTTT酶X、引物、荧光探针等步骤3：qPCR5匕R(1)过程中,R N A提取裂解液可同时灭活病毒，原因是采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理，其目的是。R N A酶抑制剂的作用是O过程中加入的酶N是。根据图示，保证病毒核酸检测准确的关键是0(3)在进行新冠病毒核酸检测时，通常以病毒的ORFi a b基因为检
21、测的目标基因,是因为ORFla b基因具有的特点。检测试剂中还加有“阳性对照和“阴性对照，阴性对照的主要作用是0(4)如表是S ARS-Co V-2核酸检测时P C R仪参数设定要求：步骤侬时间 循环a.病毒cDNA合成50 15 min 1b.预变性95 5 min 1C.变性95 5 sd.?60 40 s 45步骤a的反应时间要足够长，其目的是.步骤d主要包括P C R过程的 阶段。第7页 共12页（5）临床上，将症状及影像学结果高度疑似、核 酸 多 次 检 测 为“阴性”的现象称为检测结果假阴性，导 致 假 阴 性 结 果 可 能 是 由 于（填序号）检 测 者 处 于 感 染 初 期
22、 检 测 者 感 染 时 间 较 长 样 本 采 集 位 置 不 规 范 样 品 稀 释 度 不 足 病毒出现变异答案 蛋 白 酶K能催化病毒蛋白质水解 提高样本转运和检测阶段的安全性 防止样本R N A水解，影 响 检 测 结 果 的 准 确 性 逆 转 录 酶 设 计 引 物 和 探 针 的 特 异 性 特 异 性 强、基因结构相对稳定（变异小）排除因检测过程、试剂等因素引起的假阳性 保证样本中病毒R N A均能逆转录形成c DNA退火（或复性）、延 伸（5）解 析（I）分析题图，过程中,R N A提取裂解液含有的蛋白酶K可水解病毒蛋白质，起到灭活病毒的作用。采样后迅速进行病毒灭活，可以防
23、止样本在运输和检测阶段造成病毒泄漏，以提高样本转运和检测阶段的安全性。R N A酶能催化R N A水解,R N A提取裂解液中的R N A酶抑制剂可以防止病毒R N A被水解.进而影响检测结果的准确性。（2）过程为逆转录，需要逆转录酶催化，说明加入的酶N是逆转录酶。采用实时荧光P C R技术检测病毒核酸，其关键是设计新冠病毒基因的特异性弓I物和依据检测的基因内部特异序列设计特异性探针。（3）在进行新冠病毒核酸检测时，选择检测的目标基因应具有特异性强、基因结构相对稳定（变异小）的特点。设置邛月性对照”的目的是排除因检测过程、检测试剂等因素引起的假阳性。（4）表格中步骤a为逆转录，该步骤反应时间要
24、足够长，其目的是使病毒R N A均能逆转录形成c DNA。步骤d是实时荧光P C R中变性后的两个步骤:退火（或称复性）和延伸。（5）检测者处于感染初期,其样本中病毒载量少，由于检测的灵敏度限制，可能使检测结果出现假阴性,符合题意:检测者感染时间较长，由于自身免疫,可能使样本中病毒载量很低，进而导致检测结果出现假阴性,符合题意;样本采集位置不规范、样品稀释度过高等可造成样品中病毒载量低.进而导致检测结果出现假阴性，符合题意，与题意不符;若病毒发生了变异，可能会使试剂中引物不能跟模板结合.不能获得PCR产物,也会使检测结果出现假阳性，符合题意。7.亚洲棉的光籽（突变体无短绒）和毛籽（野生型有短绒
25、）是一对相对性状，中国农业科学院棉花研究所对亚洲棉光籽性状遗传机制进行了研究，发现突变体光籽表型的出现与8号染色体上D N A片段发生突变有关，研究者提取突变体和野生型的8号染色体的D N A进 行PCR,产物扩增后电泳结果如图:4R-d注：1 代表扩增的区间，其左侧数字为引物对编号;口代表点样处，每对引物对应的电泳结果左为野生型，右为突变体.1引物1880 kb至903 kb区间1引物8引物2 引物3引物4引物5引物6引物7 O a 日 回 回 .0困 （1）据图分析，该P C R过程是根据野生型毛籽棉的 D N A序列设计连续的重叠引物对。电 泳 结 果 表 明 相 对 分 子 质 量 较
26、 大 的 扩 增 产 物 与 点 样 处 的 距 离 较（选 填 大 或 小 ）,第8页 共12页并推测8 号染色体上第 对引物对应的区间（简称M）发 生 了 碱 基 的（选 填 增 添 缺失 或 替 换 ）是突变体光籽出现的根本原因。（2）研究者从野生型和突变体中克隆出区间M 后，运用基因工程技术分别导入棉花原生质体检测其下游报告基因的基因表达水平,进而推测区间M 的作用，结果如图。内参基因REN是为了排除转化效率不同对实验结果的干扰，因此图中LUC表达量/REN表达量可用来衡量报告基因的表达水平。实验结果说明:O（3）研究者发现基因GaFZ的表达会影响毛籽棉花短绒的发育.而且突变体GaFZ
27、蛋白结构与野生型一致。综 合 上 述 研 究 推 测 突 变 体 光 籽 表 型 出 现 的 可 能 原 因 是.8 答 案（1）8 号染色体的880 kb至 903 kb区间 小6增 添（2）区间M 促进下游报告基因的表达，且其作用的发挥与区间M 的长度（或 M 的类型）和方向有关 突变体区间M 突变后，促进了 GaFZ基因的表达，进而抑制了棉花短绒的发育,导致出现了光籽性状解析 据图分析，该 PCR过程设计了 8 组连续的重叠引物对，这些引物扩增的片段都在野生型毛籽棉的 880 kb至 903 kb区间。电泳结果表明相对分子质量较大的扩增产物会更靠近点样处.与点样处的距离较小。观察电泳结果
28、,8号染色体上的第6 对引物扩增出来的片段不同，突变体比野生型更靠近点样处,说明突变体这个片段比野生型的相对分子质量大，应该是发生了碱基对的增添。（2）根据柱形图可知，空载体、野生型和突变体的LUC表达量/REN表达量不同，说明LUC表达量/REN表达量可以用来衡量M 的表达水平。区间M 的长度和方向不同,LUC表达量/REN表达量值不同，说明M 可以促进下游基因的表第 9 页 共 1 2 页达,其作用的发挥与区间M 的长度和方向有关。(3)基因GaFZ的表达会影响毛籽棉花短绒的发育，而且突变体GaFZ蛋白结构与野生型一致，说明基因GaFZ可能不在区间M 上，突变体区间M 突变后，促进了下游基
29、因，如 GaFZ基因的表达,进而影响了棉花短绒的发育，导致出现了光籽性状。8.同源重组基因敲除技术是将同源DNA片段导入受体细胞，利用同源DNA片段的互换.用其他DNA片段在原有位置替代靶基因，从而实现基因的敲除。米曲霉产生的曲酸具有抗菌性、抗氧化性等抗逆能力,具有重要的应用价值。为提高米曲霉产曲酸能力，科研人员用同源重组基因敲除技术成功敲除了米曲霉3.042菌株中的msn2基因，获得高产的g-5菌株。其部分机理如图所示。注：m$n2L、msn2、msn2A、pyrG为DNA/目 应 片 段据图分析,欲实现msn2基因的敲除,需要在pyrG基因两侧分别插入 片段，该过程中需要的工具酶有.(2)
30、科研人员选取进行基因敲除操作后的3 个菌落，分别提取其DNA,利用引物 进行PCR扩增，电泳结果如图所示。根据1号菌落电泳结果可得出的结论是。为进一步验证3 号菌落为目的菌落，需要选择引物重复上述操作，最终电泳结果应出现1条长度为 bp的条带。第 1 0 页 共 1 2 页标 准1号2号3号3 700 bp-.，I（3）米曲霉的曲酸产量与其对逆境的敏感性有关,tpsl基因表达产物可以降低米曲霉对逆境的敏感性。研究发现g-5菌落tpsl基因表达量明显降低。据此推测msn2基因敲除能使米曲霉产曲酸增多的机理是Oq 答 案（l）msn2L、m sn2R 限制酶、DNA连 接 酶（2）A 和 B 1号
31、菌落没有实现基因敲除，含有米曲霉 3.042基因组原始序列C 和 D 2 6 0 2 msn2基因表达产物的缺乏，抑制了 tpsl基因的表达提高了米曲霉对逆境的敏感性，从而导致米曲霉产生更多的曲酸解析 从题图中可以看出在msn2两侧存在msn2L和 msn2R基因，所以欲实现msn2基因的敲除，需要在 pyrG基因两侧分别插入msn2L和 msn2R片段,在这个过程中，需要用限制酶将基因切割，再用DNA连接酶将三个基因片段连接起来。（2）从图中可以看出，引物C 和引物D都不能将g-5基因组扩增完，所以为进行PCR扩增,需要选择引物A和 B;1号菌落条带长度接近3 000 bp,米曲霉3.042
32、基因组的碱基对数为 1 032+1 024+909=2 965 bp,两者较为接近，所以推测1号菌落没有实现基因敲除;3 号菌落条带长度约为 3 700 bp,引物C 和 D 可以扩增msn2L和 pyrG,所以可以选择引物C 和 D 重新扩增并电泳，从图中可以看出，这对引物扩增的片段长度是2 602 bp。（3）tpsl基因表达产物可以降低米曲霉对逆境的敏感性,g-5菌落tpsl基因表达量明显降低.所以可以推测msn2基因敲除能使米曲霉产曲酸增多的机理是msn2基因表达产物的缺乏,抑制了 tpsl基因的表达，提高了米曲霉对逆境的敏感性，从而导致米曲霉产生更多的曲酸。第 1 1 页 共 1 2 页知识拓展 基因敲除主要是应用DNA同源重组原理.用同源DNA片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的，由此可见,基因敲除可定向改变生物体的某一基因。基因敲除既可以用突变基因或其他基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。第12页 共12页