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1、基因工程学案检测1限制性核酸内切酶(也称“限制酶”)(1)特点：识别双链DNA分子的某种 序列。切割特定核苷酸序列中的特定切点。(2)作用：断裂特定的两个核苷酸之间的 。(3)结果：产生 。2DNA连接酶Ecoli DNA连接酶来源于 、连接 末端；T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，连接两种末端，但连接 末端效率低。3.基因进入受体细胞的载体(1)种类有 、噬菌体的衍生物和 。(2)必备条件：在宿主细胞中保存下来并大量 、有多个 、有一定的 ，便于筛选、对受体细胞无害，大小适宜。4.目的基因的获取方法从基因文库中获取目的基因，包括基因组文库和 。 利用 技术扩增目的基因： 直接人工合成目的基因
2、（根据氨基酸序列合成DNA） 5.基因表达载体的组成为： 、目的基因、终止子、 。6限制酶Mun 和限制酶EcoR 的识别序列及切割位点分别是。如图表示四种质粒和目的基因，其中，质粒上箭头所指部位为酶的识别位点，阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是()7下表所示为几种限制酶的识别序列及其切割位点，请回答下列问题：(1)从表中四种酶的切割位点看，可以切出平末端的酶是_。(2)将目的基因与质粒DNA缝合依靠的是_酶，它的作用是形成磷酸二酯键。(3)图1中的质粒分子可被表中限制酶_切割，切割后的质粒含有_个游离的磷酸基团。 (4)在相关酶的作用下，图1中的甲与图2中的乙_(填“能”
3、或“不能”)拼接起来。请说明理由：_。一、知识点填空 1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：_、_、_、_。2、目的基因的获取 目的基因可以从_，也可以用_。目的基因主要是指_，也可以是一些_。获取目的基因的方法有以下几种： 、_、_。3、基因表达载体的构建基因工程的核心是_。一个基因表达载体的组成除了 外，还必须有_ 、_以及 _ 等。4、将目的基因导入受体细胞转化：_。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_，除此之外，还有_和_等方法。 _是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_处理细胞，使细胞处于一种_的生理
4、状态，这种细胞称为 。5、目的基因的检测与鉴定 要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，非常关键，检测方法是_。要检测目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是_。检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是_。除了上述分子检测外，有的还需要进行_的鉴定。二、 习题练习1、受体细胞不同,将目的基因导入受体细胞的方法也不相同,下列受体细胞与导入方法匹配错误的一项是（ ）A.棉花细胞花粉管通道法B.大肠杆菌农杆菌转化法 C.羊受精卵显微注射技术D.番茄细胞基因枪法2、在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草的过程中以下操作中错误的是( )A.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体B.用限制
5、性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸C.将重组DNA分子导入烟草体细胞D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞3、若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl(AGATCT)、EcoR(GAATTC)和Sau3A(GATC)。下列分析合理的是()A用EcoR切割目的基因和P1噬菌体载体B用Bgl和EcoR切割目的基因和P1噬菌体载体C用Bgl和Sau3A切割目的基因和P1噬菌体载体D用EcoR和Sau3A切割目的基因和P1噬菌体载体4、科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因
6、的DNA分子和农杆菌质粒，图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是()A目的基因插入到质粒的TDNA上，才能整合到受体细胞染色体中B为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoR和PstC成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素D可用PCR等技术或抗原抗体杂交技术检测目的基因是否表达5.蛋白质工程流程图（1） ； ；（2）蛋白质工程的基本途径：预期蛋白质功能设计 推测应有的 序列找到对应的 序列。13.蛋白质工程的概念：是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因 或基因 ，对现有蛋白质进行改造，或制造一种 ，以满足人类的生产和生活的需求。是延伸出来的第二代基因工程。学科网（北京）股份有限公司