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1、实训实训 传染病病料的采取、保存、运送传染病病料的采取、保存、运送及尸体的处理及尸体的处理一、实训内容一、实训内容l1、病料的采取、保存与运送l2、传染病动物尸体的处理二、实训目标二、实训目标l1、初步掌握传染病病料采取、保存和运送的方法。l2、初步掌握传染病动物尸体的处理方法。三、材料准备三、材料准备l1、器材：剪刀、镊子、手术刀、注射器、酒精灯、酒精棉、碘酊棉、灭菌棉签、标签、胶布、手套、无菌样品容器（小瓶、平皿等）、载玻片l2、药品：消毒液、生理盐水、30%甘油盐水缓冲液、50%甘油盐水缓冲液、10%甲醛l3、动物：新鲜的动物尸体四、方法、步骤l病料的采取l送检病料的记录与包装l保存与运
2、送l传染病动物尸体的处理（一）病料的采取l1、注意事项根据不同的疫病或检验目的，采取相应的病料。进行流行病学调查、抗体检测等情况下，样品的数量应满足统计学的要求。无法确认病因时，应系统采集病料。采取内脏病料时，应尽快采集。器具和容器必须无菌。作好人身防护。怀疑炭疽的动物，严禁解剖。2、使用器械的消毒l刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。l器皿(玻制、陶制等)经103kPa高压30 min，或经160干烤2h灭菌。l注射器和针头放于清洁水中煮沸30 min。一般要求使用“一次性”针头和注射器采取一种病料。l采过病料的用具应先消毒后清洗。3、活体采样l呼吸道应
3、用灭菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉或气管内的分泌物，蘸取分泌物后立即将拭子浸人保存液中。常用的保存液：的灭菌肉汤或30%甘油盐水缓冲液，如准备将待检标本接种组织培养，则保存于50%甘油盐水缓冲液。l生殖道可采集阴道或包皮冲洗液，或者采用合适的拭子，有时也可用尿道拭子采集。l乳汁乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手亦应事先消毒)，并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的3-4把乳汁弃去，然后再采集10 ml左右乳汁于灭菌试管中。进行血清学检验的乳汁不应冻结、加热或强烈震动。l精液精液样品用人工方法采集，所采样品应包括“富精”部分，并避免加人防腐剂。l尿液的采集在动物排尿时，用洁净的容器直接接取。也可使用塑料袋，固
4、定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液。采取尿液，宜早晨进行。l脓汁 用灭菌注射器无菌操作，抽取未破溃的脓肿深部的脓汁，置灭菌试管中。若为开口的化脓灶或鼻腔时，则用无菌棉签浸蘸后，放在灭菌试管中。l血液采血部位：猪可选用耳静脉或前腔静脉采血；禽类通常选择翅静脉采血，也可通过心脏采血。全血：采血时直接将血液滴入抗凝剂中，并立即充分混合。血清：采取血液，置室温下静置至血液凝固，或低速离心分离。4、病料的取材操作l解剖前检查配制0.1%新洁尔灭手术刀、剪、镊子等用具可浸泡消毒20分钟剖检场地喷洒消毒操作人员戴口罩、手套用消毒液清洗病死动物尸体的污物及消毒无菌操作有次序解剖各个系统组织脏器的取材病料取材
5、完毕病畜尸体的无害化处理手术刀、剪、镊子等用过的工具浸泡消毒场地消毒清洗干净。5、各种脏器及组织材料的选取操作 l（1）一般组织病原分离样品：（1）将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位，各采取12立方厘米的小方块，分别置于灭菌试管或平皿中。组织病理学检查样品：将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病健交界的部位，各采取12立方厘米的小方块，分别置于10%福尔马林广口瓶中。l（2）肠：用烧红刀片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔，持灭菌棉签插入肠内，采取肠管粘膜或内容物；亦可用线扎紧一段肠道（约6厘米）两端，将两端以外切断，置于灭菌器皿内。l（3）拭子样品：用灭菌棉拭子采集鼻腔、咽喉或气管的分泌物、泄殖腔的
6、内容物。l（5）皮肤：取大小约1.01.0平方厘米的皮肤一块。l（6）胎儿：将流产后的整个胎儿，用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包装，装入木箱内，立即送往实验室。l（7）骨：剔除表面肉、韧带，表面洒上食盐，然后用浸有5%石炭酸或0.1%升汞的纱布包扎，装入木箱或其他容器内。l（8）脑、脊髓：浸入30%甘油盐水缓冲液中，或将整个头部割下包入浸过消毒液的纱布中，装入不透水的容器中。l（9）胆汁或脓汁：先用烧红的刀片或铁片烙烫采样部位表面，再用灭菌吸管或注射器从烫烙部位刺入，吸取内部液体材料，盛于灭菌试管中。l（10）小家畜及家禽：将整个尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中，装入木箱内，送往实验室
7、。l（11）抹片：每份病料2-4张，自然干燥后，彼此中间垫以火柴或纸片，重叠后用线缠住，用纸包好。（二）病料的保存、包装和运送l保存细菌检验病料：通常保存在灭菌液体石蜡、30%甘油缓冲盐水或饱。病毒检验病料：通常用50%甘油缓冲盐水或加有青、链霉素的磷酸缓冲盐水中或培养病毒用的维持液中保存、送检。血清学检验病料：如为固形病料（肝、脾、肾、皮肤、小块胃肠等），可用硼酸或食盐处理后包扎运检；液体病料（血清、渗出液）可在每毫升中加入3%5%石炭酸液12滴，包装好后运送。长期保存的样品应-70超低温保存。l包装每个组织样品应分别包装，在样品袋或平皿外贴上标签，再将各个样品放在塑料包装袋内。拭子样品、小塑料离心管应放在特定的塑料盒内。血清样品装于小瓶时，在其周围应加填塞物。外层包装应贴封条。l运送于广口保温瓶（冰瓶）内放冰块，冰块上撒一些盐，然后将装有病料的塑料袋置于冰块上，将盖盖紧，用胶布密封送检。派专人运送。（三)动物传染病尸体的无害化处理l处理尸体的方式掩埋法发酵法焚烧法化制法煮沸处理法