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1、药物的物的镇痛作用痛作用第1页，共23页，编辑于2022年，星期二【实验目的实验目的】4/15/2023free teamplate from 21.学习痛阈测定及三种痛觉测定方法。学习痛阈测定及三种痛觉测定方法。2.观察吗啡或哌替啶的镇痛作用。观察吗啡或哌替啶的镇痛作用。第2页，共23页，编辑于2022年，星期二【实验原理实验原理】疼痛是临床常见的病症之一。它除了表现为痛觉即由伤疼痛是临床常见的病症之一。它除了表现为痛觉即由伤害性刺激引起的一种主观感受外，还经常在痛觉的基础害性刺激引起的一种主观感受外，还经常在痛觉的基础上伴发并表现出各种痛反应如自主神经反应、躯体防御上伴发并表现出各种痛反应
2、如自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等反应和心理情感及行为反应等为减轻疼痛而在临床上应用的镇痛（催眠）药、镇痛药和麻醉药为减轻疼痛而在临床上应用的镇痛（催眠）药、镇痛药和麻醉药等，一般就是通过提高痛觉阈值来达到镇痛目的。本实验应用热等，一般就是通过提高痛觉阈值来达到镇痛目的。本实验应用热板法和化学刺激法，观察镇痛药吗啡或哌替啶对小白鼠痛觉阈值板法和化学刺激法，观察镇痛药吗啡或哌替啶对小白鼠痛觉阈值的影响及其表现。的影响及其表现。4/15/2023free teamplate from 3第3页，共23页，编辑于2022年，星期二一、热板法一、热板法【材料与方法材料与方法】一、实验动
3、物：雌性小白鼠，一、实验动物：雌性小白鼠，1822g。二、器材与药品：二、器材与药品：Woolfe热板、天平、热板、天平、1ml注注射器射器2支、注射针头、鼠笼、秒表、支、注射针头、鼠笼、秒表、0.1盐盐酸吗啡或酸吗啡或0.4%盐酸哌替啶、生理盐水。盐酸哌替啶、生理盐水。4/15/2023free teamplate from 4第4页，共23页，编辑于2022年，星期二三、方法与步骤：三、方法与步骤：筛选实验动物筛选实验动物将浴槽加满水并使水面接触热板，通过控温仪装置使热将浴槽加满水并使水面接触热板，通过控温仪装置使热板表面温度维持在板表面温度维持在551，然后将小白鼠置于热板上，然后将小白
4、鼠置于热板上，密切观察它的活动；在正常情况下，大多数小白鼠在热密切观察它的活动；在正常情况下，大多数小白鼠在热刺激下出现不安的表现如举前肢、抬后肢、跳跃等。但刺激下出现不安的表现如举前肢、抬后肢、跳跃等。但以上指标不稳定而不宜作为痛阈指标，若将舔后爪出现以上指标不稳定而不宜作为痛阈指标，若将舔后爪出现的时间作为疼痛反应的指标，则更具客观性。的时间作为疼痛反应的指标，则更具客观性。当小白鼠出现舔后爪时，立即记录时间并同时将其取出（以免当小白鼠出现舔后爪时，立即记录时间并同时将其取出（以免烫伤足部），该时间即为小白鼠的痛阈值。用此法筛选痛阈烫伤足部），该时间即为小白鼠的痛阈值。用此法筛选痛阈值在值
5、在30s以内的小鼠以供实验用。以内的小鼠以供实验用。4/15/2023free teamplate from 5第5页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 6取已选出的小白鼠取已选出的小白鼠4只称重，随机分为两组只称重，随机分为两组即对照组和实验组（每组即对照组和实验组（每组2只），按上述方法只），按上述方法分别测定给小白鼠注射药物和生理盐水前的分别测定给小白鼠注射药物和生理盐水前的痛阈值。痛阈值。实验组小白鼠腹腔注射实验组小白鼠腹腔注射0.1%盐酸吗啡盐酸吗啡10mg/kg(0.1ml/10g)或或0.4%盐酸哌替啶盐酸哌替啶40mg/
6、kg（0.1ml/10g）、对照组小白鼠腹腔注射等容量）、对照组小白鼠腹腔注射等容量生理盐水，并于注射后生理盐水，并于注射后15、30、45min分别再分别再次测定小鼠痛阈值。其中，对于次测定小鼠痛阈值。其中，对于60s不舔后爪的不舔后爪的小鼠，痛阈按小鼠，痛阈按60s计算。计算。第6页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 7汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变百分率百分率:痛阈改变百分率（用药后平均痛阈值用痛阈改变百分率（用药后平均痛阈值用药前平均痛阈值）药前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值用药前平均痛
7、阈值100%第7页，共23页，编辑于2022年，星期二5.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。并计算各时间点的痛阈改变百分率。以横并计算各时间点的痛阈改变百分率。以横坐标表示时间、纵坐标表示痛阈改变百分坐标表示时间、纵坐标表示痛阈改变百分率，绘出用药后率，绘出用药后15min、30min、45min小小鼠的痛阈改变百分率时效曲线。鼠的痛阈改变百分率时效曲线。4/15/2023free teamplate from 8第8页，共23页，编辑于2022年，星期二给药后前小白鼠痛阈值给药后前小白鼠痛阈值4/15/2023free teamplate from 9动物只
8、数动物只数给药前痛阈值给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（给药后痛阈值（s）15min30min45min实验组实验组对照组对照组第9页，共23页，编辑于2022年，星期二痛阈改变百分率时效曲线痛阈改变百分率时效曲线4/15/2023free teamplate from 10第10页，共23页，编辑于2022年，星期二【注意事项注意事项】1.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。一般以热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。一般以疼痛反应在疼痛反应在30s以内者为敏感鼠可供实验用。以内者为敏感鼠可供实验用。2.小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易与热板小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易与
9、热板接触而影响实验结果。接触而影响实验结果。3.用药后小鼠痛阈值超过用药后小鼠痛阈值超过60s者应立即取出，以防者应立即取出，以防止烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按止烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s计算。计算。4/15/2023free teamplate from 11第11页，共23页，编辑于2022年，星期二二、化学刺激法二、化学刺激法【材料与方法材料与方法】一、实验动物：小白鼠，一、实验动物：小白鼠，1822g，雌雄不限。，雌雄不限。二、器材与药品：天平、二、器材与药品：天平、1ml注射器注射器2支、注射针头、鼠支、注射针头、鼠笼、笼、0.4%盐酸哌替啶、生理盐水、盐酸哌替啶
10、、生理盐水、0.6醋酸或醋酸或1酒石酸锑钾溶液。酒石酸锑钾溶液。4/15/2023free teamplate from 12第12页，共23页，编辑于2022年，星期二三、方法与步骤：三、方法与步骤：1.取体重相近的小白鼠取体重相近的小白鼠4只称重，随机分只称重，随机分为为2组即实验组和对照组（每组组即实验组和对照组（每组2只），只），并观察每组动物的活动情况。并观察每组动物的活动情况。2.实验组小白鼠腹腔注射实验组小白鼠腹腔注射1盐酸哌替啶盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g）,对照组腹腔对照组腹腔注射点等容量的生理盐水。注射点等容量的生理盐水。4/15/2023free tea
11、mplate from 13第13页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 143.20min后，两组小白鼠均腹腔注射后，两组小白鼠均腹腔注射1酒酒石酸锑钾石酸锑钾0.1ml/10g或或0.6%醋酸醋酸0.1ml/10g，并观察并观察15min内各组出现扭体反应的动物数。内各组出现扭体反应的动物数。如在注射药物之后，小白鼠会因腹腔受刺如在注射药物之后，小白鼠会因腹腔受刺激而出现强烈的腹痛，进而外在地表现为激而出现强烈的腹痛，进而外在地表现为扭体反应（腹部内凹、躯干和后腿伸张、扭体反应（腹部内凹、躯干和后腿伸张、臀部抬高等）。此时将给药组与对
12、照组相臀部抬高等）。此时将给药组与对照组相比，若前者使扭体反应发生率减少比，若前者使扭体反应发生率减少50以以上，即可认为哌替啶产生了镇痛作用。上，即可认为哌替啶产生了镇痛作用。第14页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 154.汇总实验结果，将各组发生扭体反应和未汇总实验结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率物镇痛百分率药物镇痛百分率（实验组无扭体反应数对照组无扭体反药物镇痛百分率（实验组无扭体反应数对照组无扭体反应数）应数）/对照组扭体反应数对照组扭体反应数1
13、00。第15页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 16小白鼠发生和未发生扭体反应数目的统计小白鼠发生和未发生扭体反应数目的统计动物数扭体反应数无扭体反应数实验组对照组第16页，共23页，编辑于2022年，星期二【注意事项注意事项】1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配制酒石酸锑钾或醋酸需临用时配制,若存放过久，作用会明显减弱若存放过久，作用会明显减弱2.哌替啶给药剂量要准确，否则剂哌替啶给药剂量要准确，否则剂量过大会造成呼吸抑制，剂量过量过大会造成呼吸抑制，剂量过小则不出现作用。小则不出现作用。4/15/2023free teamplate f
14、rom 17第17页，共23页，编辑于2022年，星期二三、甩尾法三、甩尾法【材料与方法材料与方法】一、实验动物：小白鼠，一、实验动物：小白鼠，1822g，雌雄不，雌雄不限。限。二、器材与药品：恒温水浴箱、天平、二、器材与药品：恒温水浴箱、天平、1ml注注射器射器3支、注射针头、小鼠固定器、支、注射针头、小鼠固定器、0.4%盐盐酸哌替啶、酸哌替啶、30%安乃近、生理盐水。安乃近、生理盐水。4/15/2023free teamplate from 18第18页，共23页，编辑于2022年，星期二三、方法与步骤：三、方法与步骤：1.取体重相近的小白鼠取体重相近的小白鼠3只称重，观察每只动物的活动情
15、况。只称重，观察每只动物的活动情况。将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，将鼠尾的将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，将鼠尾的1/31/4浸浸入入55热水中，约热水中，约6s内小鼠出现甩尾动作，作为小鼠内小鼠出现甩尾动作，作为小鼠痛阈值。超出痛阈值。超出6s的小鼠应弃除。的小鼠应弃除。2.甲鼠腹腔注射甲鼠腹腔注射0.4盐酸哌替啶盐酸哌替啶40mg/kg（0.1ml/10g）,乙鼠腹腔注射乙鼠腹腔注射3%安乃近安乃近300mg/kg（0.1ml/10g）,丙鼠丙鼠腹腔注射点等容量的生理盐水。并于注射后腹腔注射点等容量的生理盐水。并于注射后10、20、30、40min分别再次测定小鼠痛阈值。其中，对于分别再
16、次测定小鼠痛阈值。其中，对于60s不甩尾的小鼠，痛阈按不甩尾的小鼠，痛阈按60s计算。计算。4/15/2023free teamplate from 19第19页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 203.汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变百汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变百分率分率:痛阈改变百分率（用药后平均痛阈值用药痛阈改变百分率（用药后平均痛阈值用药前平均痛阈值）前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值100%4.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。并计将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。并计算各时间点的痛阈改变百分率。
17、算各时间点的痛阈改变百分率。第20页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 21给药后前小白鼠痛阈值给药后前小白鼠痛阈值动物只数动物只数给药前痛阈值（给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（给药后痛阈值（s）10min 20mion30min40min哌替啶组哌替啶组安乃近组安乃近组对照组对照组第21页，共23页，编辑于2022年，星期二4/15/2023free teamplate from 22痛阈改变百分率时效曲线痛阈改变百分率时效曲线第22页，共23页，编辑于2022年，星期二【思考题思考题】1.吗啡为什么能产生镇痛作用？临吗啡为什么能产生镇痛作用？临床可用于哪些方面？床可用于哪些方面？2.哌替啶在药效学和药动学上与吗啡哌替啶在药效学和药动学上与吗啡有何相似性和差异性？有何相似性和差异性？4/15/2023free teamplate from 23第23页，共23页，编辑于2022年，星期二