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1、2.什么是抑制百分数？它的物理含义是什么？怎样判断反应的抑制类型？抑制百分数是为了表示抑制剂对酶催化反应抑制程度，其定义式为 i值越大，表示抑制的程度越大；i值越小，表示抑制的程度越小。考虑增加底物浓度与抑制因子的关系来判断，不随底物浓度改变的为非竞争性抑制，随底物浓度增加而减小的为竞争性抑制，随底物浓度增加反而减小的为反竞争性抑制。（也可用作图法比较有抑制与无抑制时的图形差别，根据如下图形得以判断）第1页/共19页第2页/共19页3.谈谈影响酶催化反应速率的因素 影响酶催化反应速率的因素有很多，从内部因素来看，包括酶的结构特性和底物的结构特性；从外部因素来看，包括各种物质的浓度因素（如酶浓度
2、、底物和产物的浓度、抑制剂的浓度等）和操作条件（如温度、压力、离子强度、pH等）。第3页/共19页作业第4页/共19页第5页/共19页联立求解得：第6页/共19页1-2 1-2 假设某酶有两个活性中心，它要经过下述假设某酶有两个活性中心，它要经过下述机理步骤，底物才能转化为产物：机理步骤，底物才能转化为产物：试根据稳态假设，求其速率方程式。思考第7页/共19页1-3 Eadie1-3 Eadie在在19421942年测量了乙酰胆碱（底物）年测量了乙酰胆碱（底物）在某酶上进行水解反应的初始速率，数据如在某酶上进行水解反应的初始速率，数据如下：下：试用（1）L-B法；（2）H-W法；（3）E-H法
3、估计其动力学参数值。解：由题中数据进行变换后可达下表：解：由题中数据进行变换后可达下表：作业此题不少同学把两个参数得值弄混第8页/共19页第9页/共19页1-4 1-4 一分批进行的均相酶催化反应，底物的初始浓一分批进行的均相酶催化反应，底物的初始浓度为度为310310-5-5 mol/l,Kmol/l,Kmm=110=110-3-3 mol/l,mol/l,经过经过2 min2 min后，底物转化了后，底物转化了5%5%，假定该反应符合，假定该反应符合M-MM-M方程，方程，试问当该反应经过试问当该反应经过10 min10 min、30 min30 min和和60 min60 min时，时，
4、该底物转化了多少？该底物转化了多少？第10页/共19页1-7 1-7 某一酶催化反应的某一酶催化反应的K Kmm=4.710=4.710-5-5mol/l,mol/l,r rmaxmax=22mol/(l=22mol/(lmin),Cmin),CS S=210=210-4-4mol/l,mol/l,C CI I=510=510-4-4mol/l,Kmol/l,KI I=510=510-4-4mol/l,mol/l,试分别计算在竞争性抑试分别计算在竞争性抑制、非竞争性抑制、反竞争抑制三种情况下的反应速率和抑制程制、非竞争性抑制、反竞争抑制三种情况下的反应速率和抑制程度。度。此题很多同学算错第11
5、页/共19页第12页/共19页1-8 Eadie测量了存在和不存在某抑制剂情况下乙酰胆碱在某酶作用下进行的水解反应的初始速率，数据如下：（1）判断该抑制作用是竞争性还是非竞争性？（2）用L-B法求在有抑制剂存在时的动力学参数。第13页/共19页解：有上数据进行变换后可得：第14页/共19页1-10 在某种水解酶的作用下葡萄糖-6-硫酸可以分解为葡萄糖和硫酸。在一定的酶浓度下，测得M-MM-M方程中的参数Km=6.710-4mol/l,rmax=310-7mol/(lmin)。对该反应，半乳糖-6-硫酸是一竞争性抑制剂。当CS0=210-5mol/l,CI0=110-5mol/l时，测得反应速率
6、rSI=1.510-9mol/(lmin)。试求KmI和K I值。解：由题意可得：第15页/共19页1-12 1-12 在以腺苷三磷酸酯酶为催化剂进行的在以腺苷三磷酸酯酶为催化剂进行的 反应中，酶的分子量为反应中，酶的分子量为5105104 4,K,Kmm为为110110-4-4 kmol/mkmol/m3 3,k k+2+2为为166 s166 s-1-1.该酶失活遵循一级动力学，其半衰期该酶失活遵循一级动力学，其半衰期t t1/21/2=414 s,=414 s,如果加入体积为如果加入体积为0.001 m0.001 m3 3的间歇反应器中的酶的间歇反应器中的酶量为量为10 g,10 g,反应反应12 h12 h后测定后测定产产物浓度为物浓度为0.002kmol/m0.002kmol/m3 3,试试确定该酶的纯度（以确定该酶的纯度（以C CE0E0实际的实际的/C/CE0E0加入的值表示）。底加入的值表示）。底物的初始浓度为物的初始浓度为0.02 kmol/m0.02 kmol/m3 3。第16页/共19页不合理第17页/共19页问题出在rmax是变化的,不能直接用下式求第18页/共19页感谢您的观看！第19页/共19页