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1、会计学1临床实验室生物安全管理要点解释临床实验室生物安全管理要点解释职业暴露与感染职业暴露与感染n n实验室工作实验室工作可能发生职可能发生职业暴露业暴露n n职业暴露可职业暴露可能发生感染能发生感染第1页/共49页常见的实验室感染常见的实验室感染Most frequently reported laboratory-acquired infectionsMost frequently reported laboratory-acquired infections in the United States and Great Britain in the United States and G
2、reat Britain total no.(%)of cases reported for:total no.(%)of cases reported for:Infection Infection US US AND world Great Britain NACD US US AND world Great Britain NACD Brucellosis 274(9.4)423(10.8)2(10.8)18(52.9)Brucellosis 274(9.4)423(10.8)2(10.8)18(52.9)Q fever 184(6.3)278(7.1)0 Q fever 184(6.3
3、)278(7.1)0 Typhoid fever 292(10.0)256(6.5)3(3.2)Typhoid fever 292(10.0)256(6.5)3(3.2)Hepatitis 126(4.3)234(6.0)19(20.0)Hepatitis 126(4.3)234(6.0)19(20.0)Tularemia 129(4.4)225(5.7)0 Tularemia 129(4.4)225(5.7)0 Tuberculosis 174(6.0)176(4.5)24(25.3)4(11.8)Tuberculosis 174(6.0)176(4.5)24(25.3)4(11.8)Der
4、matomycosis 84(2.9)161(4.1)0 2(5.9)Dermatomycosis 84(2.9)161(4.1)0 2(5.9)Venezuelan equine 118(4.1)141(3.6)0 Venezuelan equine 118(4.1)141(3.6)0 encephalitis encephalitis Typhus 82(2.8)124(3.2)0 Typhus 82(2.8)124(3.2)0 Psittacosis 70(2.4)116(3.0)0 4(11.8)Psittacosis 70(2.4)116(3.0)0 4(11.8)Coccidioi
5、domycosis 108(3.7)93(2.4)0 Coccidioidomycosis 108(3.7)93(2.4)0 Streptococcal infection 67(2.3)78(2.0)3(3.2)Streptococcal infection 67(2.3)78(2.0)3(3.2)Histoplasmosis 81(2.8)71(1.8)0 Histoplasmosis 81(2.8)71(1.8)0 Lptospirosis 43(1.5)87(2.2)0 3(8.8)Lptospirosis 43(1.5)87(2.2)0 3(8.8)Salmonellosis 54(
6、1.9)48(1.2)11(11.6)1(2.9)Salmonellosis 54(1.9)48(1.2)11(11.6)1(2.9)Shigellosis 54(1.9)58(1.5)26(27.4)Shigellosis 54(1.9)58(1.5)26(27.4)All reported infections 2912 3921 95 34 All reported infections 2912 3921 95 34 Adapted from D.L.Sewell,Clinical microbiology reviews,1995,389-405 Adapted from D.L.S
7、ewell,Clinical microbiology reviews,1995,389-405第2页/共49页实验室获得性感染的病原体分布实验室获得性感染的病原体分布n n大多数实验室获得性感染由大多数实验室获得性感染由 细菌细菌 43%43%病毒病毒 27%27%立克次体立克次体 15%15%真菌真菌 9%9%衣原体衣原体 3.3%3.3%寄生虫寄生虫 2.9%2.9%From D.L.Sewell,Clin.Microb.Reviews,1995,8:389-405 From D.L.Sewell,Clin.Microb.Reviews,1995,8:389-405 From D.L.S
8、ewell,Clin.Microb.Reviews,1995,8:389-405 From D.L.Sewell,Clin.Microb.Reviews,1995,8:389-405 第3页/共49页实验室职业暴露感染的途径实验室职业暴露感染的途径n n实验室职业暴露可发生在实验实验室职业暴露可发生在实验室工作或逗留的任何时间室工作或逗留的任何时间n n呼吸道吸入呼吸道吸入n n经口摄入经口摄入n n针刺或锐器刺伤接种针刺或锐器刺伤接种n n皮肤、粘膜污染皮肤、粘膜污染n n叮咬叮咬第4页/共49页呼吸道传播呼吸道传播n n呼吸道传播的微生物主要存在于呼吸道传播的微生物主要存在于气溶胶气溶胶气
9、溶胶气溶胶中并中并可引起人类感染可引起人类感染 举例：结核分枝杆菌举例：结核分枝杆菌 炭疽杆菌炭疽杆菌 SARS冠状病毒冠状病毒 第5页/共49页呼吸道传播呼吸道传播n n微生物气溶胶微生物气溶胶微生物气溶胶微生物气溶胶n n粒子直径粒子直径1010mm，一般被阻留，一般被阻留在鼻腔内在鼻腔内n n粒子直径粒子直径5-10m5-10m，可到达支气，可到达支气管管n n粒子直径粒子直径5mm，可进入细支气，可进入细支气管和肺泡管和肺泡n n粒子直径越小，其到达的部位粒子直径越小，其到达的部位越深，小于越深，小于1m1m的粒子在肺泡的粒子在肺泡内沉积率最高内沉积率最高n n粒子直径粒子直径0.4m
10、m可自由进出肺可自由进出肺泡泡第6页/共49页呼吸道传播呼吸道传播n n气溶胶可在实验室内长时间漂浮并随气流气溶胶可在实验室内长时间漂浮并随气流在室内流动在室内流动n n工作人员在实验室内工作，甚或逗留期间工作人员在实验室内工作，甚或逗留期间通过通过吸入吸入含有致病微生物的气溶胶颗粒发含有致病微生物的气溶胶颗粒发生暴露并可致感染生暴露并可致感染第7页/共49页消化道摄入传播消化道摄入传播n n经消化道摄入传播的微生物主要存在于粪经消化道摄入传播的微生物主要存在于粪便、食物等中，可引起人类消化道感染便、食物等中，可引起人类消化道感染 举例：志贺菌属细菌举例：志贺菌属细菌 沙门菌属细菌沙门菌属细菌
11、 葡萄球菌属细菌葡萄球菌属细菌第8页/共49页消化道摄入传播消化道摄入传播n n经消化道摄入传播的胃肠道感经消化道摄入传播的胃肠道感染可发生在染可发生在 无意识的手无意识的手-口途口途径污染时径污染时 传染性液体喷溅传染性液体喷溅入口时入口时 在实验室进食、在实验室进食、饮水时饮水时 口吸移液管时口吸移液管时 第9页/共49页经血传播经血传播n n经血传播的微生物是存在于血经血传播的微生物是存在于血液中并可引起人类疾病的生物液中并可引起人类疾病的生物病原体病原体 举例：举例：HBV HCV HIV 疟原虫疟原虫 梅毒梅毒螺旋体螺旋体 第10页/共49页经血传播经血传播n n被经血传播的病原体感
12、染的患者血液、或有可见的血污染的体液；被经血传播的病原体感染的患者血液、或有可见的血污染的体液；被经血传播的病原体感染的患者血液、或有可见的血污染的体液；被经血传播的病原体感染的患者血液、或有可见的血污染的体液；以及精液、阴道分泌物、以及精液、阴道分泌物、以及精液、阴道分泌物、以及精液、阴道分泌物、关节液、内脏器官周围液体等可传播血关节液、内脏器官周围液体等可传播血关节液、内脏器官周围液体等可传播血关节液、内脏器官周围液体等可传播血传病原体传病原体传病原体传病原体n n经血传播而致的感染主要发生在经血传播而致的感染主要发生在经血传播而致的感染主要发生在经血传播而致的感染主要发生在 针刺意外时针
13、刺意外时针刺意外时针刺意外时 锐器刺伤时锐器刺伤时锐器刺伤时锐器刺伤时 蚊虫、动物叮咬时蚊虫、动物叮咬时蚊虫、动物叮咬时蚊虫、动物叮咬时 破损的皮肤或粘膜污染时破损的皮肤或粘膜污染时破损的皮肤或粘膜污染时破损的皮肤或粘膜污染时 第11页/共49页职业职业HIVHIV感染感染Occupationally acquired AIDS cases or HIV infections Occupationally acquired AIDS cases or HIV infections Occupationally acquired AIDS cases or HIV infections Occu
14、pationally acquired AIDS cases or HIV infections reported ti CDC through 1992reported ti CDC through 1992reported ti CDC through 1992reported ti CDC through 1992 Occupation No.(%)of Occupation No.(%)of Occupation No.(%)of Occupation No.(%)of occupational transmissions occupational transmissions occu
15、pational transmissions occupational transmissions Laboratory technician 25(24.8)Laboratory technician 25(24.8)Laboratory technician 25(24.8)Laboratory technician 25(24.8)Nurse 26(25.7)Nurse 26(25.7)Nurse 26(25.7)Nurse 26(25.7)Physician 13(12.8)Physician 13(12.8)Physician 13(12.8)Physician 13(12.8)Me
16、dical technician/paramedic 7(6.9)Medical technician/paramedic 7(6.9)Medical technician/paramedic 7(6.9)Medical technician/paramedic 7(6.9)Dentist/dental technician 6(5.9)Dentist/dental technician 6(5.9)Dentist/dental technician 6(5.9)Dentist/dental technician 6(5.9)Health aide/attendant 6(5.9)Health
17、 aide/attendant 6(5.9)Health aide/attendant 6(5.9)Health aide/attendant 6(5.9)Housekeeper/maintenance worker 6(5.9)Housekeeper/maintenance worker 6(5.9)Housekeeper/maintenance worker 6(5.9)Housekeeper/maintenance worker 6(5.9)Morgue technician 3(3.0)Morgue technician 3(3.0)Morgue technician 3(3.0)Mo
18、rgue technician 3(3.0)Technician/therapist 3(3.0)Technician/therapist 3(3.0)Technician/therapist 3(3.0)Technician/therapist 3(3.0)Respiratory therapist 2(2.0)Respiratory therapist 2(2.0)Respiratory therapist 2(2.0)Respiratory therapist 2(2.0)Surgical technician 2(2.0)Surgical technician 2(2.0)Surgic
19、al technician 2(2.0)Surgical technician 2(2.0)Other HCW 2(2.0)Other HCW 2(2.0)Other HCW 2(2.0)Other HCW 2(2.0)Total 101 Total 101 Total 101 Total 101 Adapted from D.L.Sewell,Clinical microbiology reviews,1995,389-405Adapted from D.L.Sewell,Clinical microbiology reviews,1995,389-405第12页/共49页病原微生物实验室生
20、物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例国务院国务院国务院国务院2004200420042004年年年年11111111月月月月26262626日日日日第13页/共49页目目 的的 为了加强病原微生物实验室(以下称实验室)生物安全管理，保护实验室工作人员和公众的健康，制定本条例。第14页/共49页什么是实验室生物安全防护？什么是实验室生物安全防护？实验室工作人员所处理的试验对象含有致病微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受试验对
21、象侵染，确保周围环境不受其污染。第15页/共49页适用范围适用范围 第二条 对中华人民共和国境内的实验室及其从事实验活动的生物安全管理，适用本条例。本条例所称病原微生物，是指能够使人或者动物致病的微生物。本条例所称实验活动，是指有关实验室从事与病原微生物菌(毒)种、样本的研究、教学、检测、诊断等活动。第16页/共49页 第四条 国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理。第五条 国家实行统一的实验室生物安全标准。实验室应当符合国家标准和要求。第六条 实验室的设立单位及其主管部门负责实验室日常活动的管理，承担建立健全安全管理制度，检查、维护实验设施、设备，控制实验室感染的职责。第17页/
22、共49页病原微生物的分类和管理病原微生物的分类和管理1.1.1.1.国家根据病原微生物的传染性，国家根据病原微生物的传染性，国家根据病原微生物的传染性，国家根据病原微生物的传染性，感染后对个体或者群体的危害程感染后对个体或者群体的危害程感染后对个体或者群体的危害程感染后对个体或者群体的危害程度对将病原微生物分为四类。度对将病原微生物分为四类。度对将病原微生物分为四类。度对将病原微生物分为四类。2.2.2.2.第一类、第二类称为高致病性病第一类、第二类称为高致病性病第一类、第二类称为高致病性病第一类、第二类称为高致病性病原微生物。原微生物。原微生物。原微生物。3.3.3.3.人间传染的人间传染的
23、人间传染的人间传染的病原微生物名录病原微生物名录病原微生物名录病原微生物名录由国由国由国由国务院卫生主管部门商国务院有关务院卫生主管部门商国务院有关务院卫生主管部门商国务院有关务院卫生主管部门商国务院有关部门后制定、调整并予以公布。部门后制定、调整并予以公布。部门后制定、调整并予以公布。部门后制定、调整并予以公布。第18页/共49页分类定义对比分类定义对比n n中国n n第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。n n国际n n第四类病原微生物是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的
24、微生物。第19页/共49页分类定义对比分类定义对比n n中国n n第二类病原微生物第二类病原微生物，是指，是指能够引起人类或者动物严能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的人、动物与动物间传播的微生物。微生物。n n国际n n第三类病原微生物，是指第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。实施预防和治疗的微生物。第20页/共49页分类定义对比分类定义对比n n中国n n
25、第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。n n国际国际n n第二类病原微生第二类病原微生物，是指能够引物，是指能够引起人或者动物疾起人或者动物疾病，发生实验室病，发生实验室暴露可能引起感暴露可能引起感染，但不会引起染，但不会引起严重危害，且能严重危害，且能够有效实施预防够有效实施预防和治疗的微生物。和治疗的微生物。第21页/共49页分类定义对比分类定义对比n n中国中国n n第四类病原微生物，是指第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人在通常情况下不会引起人
26、类或者动物疾病的微生物。类或者动物疾病的微生物。n n国际国际n n第第一一类类病病原原微微生生物物，是是指指在在通通常常情情况况下下不不会会引引起起人人或者动物疾病的微生物。或者动物疾病的微生物。第22页/共49页 第八条 人间传染的病原微生物名录由国务院卫生主管部门商国务院有关部门后制定、调整并予以公布；第23页/共49页病原微生物名录及生物安全评价病原微生物名录及生物安全评价-细菌类细菌类中文名危害程度分类活菌分离、培养分离、菌种冻干等实验动物感染实验免疫学实验、涂片、显微观察等分子生物学实验、生化分析等结核分枝杆菌第二类 BSL-3ABSL-3BSL-2BSL-1金黄色葡萄球菌第三类
27、BSL-2ABSL-2BSL-2BSL-1第24页/共49页病原微生物名录及生物安全评价病毒类中文名危害程度分类活病毒培养分离、感染性材料核酸提取动物感染未灭活样本的检测、诊断已确认灭活材料的实验操作HIV第二类 BSL-3ABSL-3BSL-2BSL-1乙型肝炎病毒第三类 BSL-2ABSL-2BSL-2BSL-1第25页/共49页 国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。第26页/共49页实验室生物安全防护分实验室生物安全防护分级级n n一级生物安全防护实验室，简称一级生物安全防护实验室，简称BSL1BSL1或或P1P1n n二级生物安全防护实验室，简称二级生物安全防护
28、实验室，简称BSL2BSL2或或P2P2n n三级生物安全防护实验室，简称三级生物安全防护实验室，简称BSL3BSL3或或P3P3n n四级生物安全防护实验室，简称四级生物安全防护实验室，简称BSL4BSL4或或P4P4第27页/共49页一级一级生物安全防护实验室生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。第28页/共49页二级二级生物安全防护实验室生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环对人或环境具有中等潜在危害境具有中等潜在危害的微生物。第2
29、9页/共49页三级三级生物安全防护实验室生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要规程、安全设备适用于主要通过呼通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。常已有预防传染的疫苗。艾滋病毒的研究（血清学实验艾滋病毒的研究（血清学实验室除外）应在三级生物安全防护实室除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。验室中进行。第30页/共49页四级四级生物安全防护实验室生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危
30、险性，通过气溶胶对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。第31页/共49页 第二十三条 医疗卫生机构在实验室开展检测、诊断工作时，发现高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物，需要进一步从事这类高致病性病原微生物相关实验活动的，应当依照本条例的规定经批准同意，并在取得相应资格证书的实验室中进行。专门从事检测、诊断的实验室应当严格依照国务院卫生主管部门的规定，建立健全规章制度，保证实验室生物安全。第32页/共49页确保实验室工作人员不与致病微生物直接接触
31、的一级屏障是什么?答：安全设备和个体防护用品。第33页/共49页安全设备生物安全柜1.生物安全柜是最重要的安全设备；2.可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作，除实际上不可实施外，均应在生物安全柜中进行。3.二级生物安全防护实验室以选用级生物安全柜为宜。4.离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。第34页/共49页为何需使用生物安全柜为何需使用生物安全柜?n n考虑对操作人员，操作样品，操作环境的保护。第35页/共49页生物安全设备分类生物安全设备分类n n1.1.超净台超净台 n n2.2.抽风橱抽风橱n n3.CLASS
32、 I 3.CLASS I 一级生物安全柜一级生物安全柜 n n4.CLASS II 4.CLASS II 二级生物安全柜二级生物安全柜 n n5.CALSS III5.CALSS III三级生物安全柜（又称三级生物安全柜（又称手套柜）手套柜）第36页/共49页1、超净台、超净台n n正压柜正压柜n n气气流流从从顶顶部部或或底底部部经经过过过过滤滤器器后后从从操操作作区区正正面面流流向向工工作作台台面面，被被样样品品污污染染的的气气流流排排出出柜柜外外，没有循环气流。没有循环气流。n n超净台保护样品不受污超净台保护样品不受污染，染，适用于普通实验室适用于普通实验室适用于普通实验室适用于普通实
33、验室或或或或1 1 1 1级生物安全水平中级生物安全水平中级生物安全水平中级生物安全水平中对人员和环境无保护要对人员和环境无保护要对人员和环境无保护要对人员和环境无保护要求的实验求的实验求的实验求的实验。第37页/共49页2、CLASS I一级生物安一级生物安全柜全柜气流经操作人员向内进入工作台面，被污染的气流通过高效空气过滤器外排出柜外，没有循环气流，是负压柜。CLASS I级BSC保护操作人员和环境不受污染，适用于适用于生物安全水平中生物安全水平中对实验样品对实验样品无保护要求的实验。无保护要求的实验。第38页/共49页3、CLASS II 二级生物安全柜二级生物安全柜n n层流负压柜 n
34、 n它它们们可可以以安安全全的的保保护护样样品品、人人员和环境员和环境。n nII 级生物安全柜分为A型（30%排在室内）和 B型；n nB型中又分为B1（70%接管道外排）、B2（100%接管道外排）、B3（30%接管道外排）。第39页/共49页II级生物安全柜级生物安全柜Airflow 第40页/共49页生物安全柜空气流向生物安全柜空气流向第41页/共49页 4.CLASS III生物安全柜生物安全柜（手套柜）（手套柜）全封闭的、气密结构的通风柜；通过橡胶手套进行操作；柜内保持至少120Pa的负压；供气通过HEPA抽入内；外排的气流经过双层HEPA过滤或经 HEPA后再经燃烧处理。CLAS
35、S III 型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。第42页/共49页高效空气高效空气过滤过滤工作人员工作人员安全安全无涡流单无涡流单向流空气向流空气实验对象实验对象不受污染不受污染手套箱式手套箱式操作口操作口抽风橱抽风橱无无是是否否否否否否I级级有有是是否否否否否否II级级有有是是是是是是否否III级级有有是是是是是是是是生物安全装置异同第43页/共49页个人防护装备个人防护装备1.1.实验室防护服2.2.面部及身体保护3.3.手套4.4.鞋5.5.呼吸防护第44页/共49页感染原因分析感染原因分析n n80不明原因，20原因明确n n20中的80%操作人员失误引起，余20仪器设备故障引起第45页/共49页导致感染的实验室事故多见导致感染的实验室事故多见1.1.溢出和泼洒2.2.针头和注射器3.3.锐器、碎玻璃4.4.动物或动物体外寄生虫的抓伤或咬伤王秋娣王秋娣.我国实验室生物安全管理我国实验室生物安全管理.中国医药生物技术中国医药生物技术.2007.2007年年2 2月第二卷第一期月第二卷第一期第46页/共49页安全管理制度安全管理制度n n实验室内务管理制度n n尖锐器具安全使用制度n n实验室消毒防护制度n n标本采集运输制度n n废弃物处理制度n n工作人员防护制度n n差错事故处理制度第47页/共49页THE ENDTHANKS第48页/共49页