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1、一、园林植物良种繁育的任务 良种繁育是运用遗传育种的理论与技术，在保持并不断提高良种种性、良种纯度与生活力的前提下迅速扩大良种数量的一套完整的种苗生产技术。良种繁育实际是育种的继续和扩大，是优良品种能够继续存在和不断提高质量的保证。所以它基本上属于育种学的范畴，同时它也是育种和生产之间的桥梁。第1页/共70页园林植物良种繁育的主要任务：1、在保证质量的前提下迅速扩大良种数量；2、保持并不断提高良种种性，恢复已退化的优良品种；3、保持并不断提高良种的生活力。第2页/共70页二、品种退化的概念及其原因（一）概念：观赏植物原有的优良品质削弱的过程和表现。造成观赏植物品种退化的原因：基因劣变；基因频率
2、和基因型频率发生改变；病虫害侵染；繁殖方法不当；栽培方法不当。第3页/共70页（二）机械与生物学混杂1、机械混杂：采种、晒种、储藏、包装、调度、播种、育苗、移栽、定植等栽培的繁殖过程中，把一个品种的种子或苗木机械地混入了另一个品种之中，从而降低了前一个品种的纯度。由于纯度的降低，其丰产性，物候期的一致性都降低了，观赏价值也降低了给栽培管理良种繁育都带来了损失，机械混杂的危害主要在于机械混杂以后，紧接着常发生生物学混杂，这就给栽培带来更大的损失，造成品种更严生的退化。第4页/共70页2 2、生物学混杂：、生物学混杂：生生物物学学混混杂杂，是是指指由由于于品品种种间间或或种种间间发发生生一一定定程
3、程度度的的天天然然杂杂交交，造造成成一一个个品品种种的的遗遗传传组组成成上上混混入入了了另另一一些些品品种种的的遗遗传传基基础础。在在园园林林植植物物中中发发生生生生物物学学混混杂杂后后，表表现现出出花花型型紊紊乱乱，花花期期不不一一，高高度度不不整整齐齐。花花色色混混杂杂，甚甚至至各各种种极极劣劣的的单株都会产生。单株都会产生。生物学混杂在异交植物与常异交植物的品种间或种间最易发生。自花授粉生物学混杂在异交植物与常异交植物的品种间或种间最易发生。自花授粉的植物中也间有发生。的植物中也间有发生。第5页/共70页（三）生活条件与栽培方法不适合种性要求，从而引起性状分离与变异。当生活条件与栽培方法
4、不适合品种种要求时，优良的种性就会被潜伏的野持性状所代替。隐性性状会代替原来的的显性性状，品种因而退化。P=G+EP=G+E 第6页/共70页（四）生活力衰退引起良种产量品种的降低1、长期营养繁殖长期营养繁殖而得不到的有性复壮的机会，致使生活力降低。2、长期自花授粉长期自花授粉，内部矛盾也会不断地减少，生活力不断地降低，最后品种的产量、生长势和其他特性也要退化。3、长期栽培在相同的条件下米丘林学派还认为一个品种长期培育在同一地点并用同一栽培方法，则久而久之会造成生活力的衰退。第7页/共70页 其其次次关关于于自自花花授授粉粉的的良良种种生生活活力力降降低低问问题题，虽虽然在一般的条件下如上述，
5、但是也有例外的现象。然在一般的条件下如上述，但是也有例外的现象。以下两例外的现象在良种繁育的实践中最有意义：以下两例外的现象在良种繁育的实践中最有意义：1 1、在在优优良良栽栽培培条条件件下下，天天然然自自花花授授粉粉良良种种生生活活力力降降低比在恶劣条件下显著地缓慢。低比在恶劣条件下显著地缓慢。2 2、天然自花授粉的良种生活力的降低，在单株之间、天然自花授粉的良种生活力的降低，在单株之间有较大的差异，有些单株退化很快，而有些则很慢，有较大的差异，有些单株退化很快，而有些则很慢，甚至不退化，因此在完全退化了的品种中也能用单甚至不退化，因此在完全退化了的品种中也能用单株选择法选出完全未退化的生活
6、力很高的单株，这株选择法选出完全未退化的生活力很高的单株，这也就是良种繁育中可以用选择的方法进行品种复壮也就是良种繁育中可以用选择的方法进行品种复壮的前提。的前提。第8页/共70页三、良种繁育的程序和方法（一）品种审定品种特性的评价；品种比较试验；区域试验；生产试验；审定和登录。第9页/共70页（二）品种繁育程序1.原种（苗）生产 超级原种：经品种审定后用作第一批繁殖的种苗。2.生产用种（苗）的繁殖 以原种为繁殖材料，提供生产用苗的繁殖过程。第10页/共70页（三）防止品种退化的技术措施（一）防止遗传性变劣与分离的技术措施1、防止混杂：防止机械混杂：严格遵守良种繁育的制度，任何混杂都应避免。采
7、种：专人负责及时采收；晒种：晒种时各品种应间隔一定距离；播种育苗：相似品种间隔种植；播种和定植地应该合理轮作，以免隔年种子萌发造成混杂。移苗：必须严格注意去杂和插牌并画下移植定植图。第11页/共70页防止生物学混杂：防止生物学混杂的基本方法是隔离与选择。空间隔离 生物学混杂的媒介主要是昆虫和风力传粉，因此隔离的方法和距离随风力大小，风向表况，花粉数量，花粉易飞散程度重瓣程度以及播种面积等而不同。时间隔离 时间隔离是防止生物学混杂极为有效的方法，时间隔离可分为跨年度的与不跨年度的两种，后一种是在同一年内进行分月播种，分期定植，把开花期错开，这种方法对于某些光周期不敏感的植物适用。第12页/共70
8、页第13页/共70页2、控制显性这里所指的控制显性，主要是指控制栽培性状成为显性，1)良种繁育地段的土壤选择：应该具备良好的土壤结构，避免过分粘重的土壤，应该排水良好，这两点对于球根类花卉更为重要。2)加强田间管理：防治病虫害发生、使植株生长健壮。第14页/共70页3)扩大营养面：与一般大田比起来适当加大株行距，不仅可以扩大繁殖系数，而且可以提高种子的质量，增加种子的品种典型性。4)合理轮作：除了一般在优良（如防治病虫害、合理利用地力，促进植物生长发充）以外，对于良种繁育特别有益的还能防止混杂和一定程度地防止球根花卉的生活力退化。5)避免砧木不良遗传性的影响，许多营养繁殖的良种，尤其是木本植物
9、中采用营养繁殖的良种，应用嫁接的方法。第15页/共70页3、经常进行选择：选择是克服品种退化最有效的方法。1)选择品种典型性高的单株；2)选择品种典型性高的花序 同一植株不同部位的花序或小花所产生的种子，其品种典型性不同。3)选择品种典型性高的种子 即使同一花序其中不同位置的种子，它们后代的品种典型性也不同。4、加强留种单株的处理 为了提高种子品质，整枝和去顶等处理会有良好的效果。第16页/共70页第17页/共70页（二）提高良种生活力的技术措施1、改变生活条件：1)改变播种时期 改改变变播播种种时时期期的的作作用用是是使使植植物物在在幼幼苗苗和和其其他他发发育育时时期期遇遇到到与与原原来来不
10、不同同的生活条件，使植物同化这些外部条件。的生活条件，使植物同化这些外部条件。2)换种 将将长长期期在在一一个个地地区区栽栽培培的的品品种种种种，定定期期地地换换到到另另一一地地区区繁繁殖殖栽栽培培，经经1-21-2年年再再拿回原地栽培。拿回原地栽培。3)特殊农业技术的处理 采用低温锻炼幼苗采用低温锻炼幼苗和种子，高温和盐水处理种子，以及用萌动和种子，高温和盐水处理种子，以及用萌动种子进行干燥处理等都能在一定程度上提高种子进行干燥处理等都能在一定程度上提高植物的抗性和生活力，尤其最后一种处理对植物的抗性和生活力，尤其最后一种处理对提高抗旱性有良好效果。提高抗旱性有良好效果。第18页/共70页2
11、、选择是保持与提高良种生活力的有效的措施。3、创造有利于生活力复壮的客观条件：选择易于生活力复壮的部分做繁殖材料创造有利于生活力复壮的栽培条件 第19页/共70页四、提高良种繁殖系数的技术措施（一）提高种子的繁殖系数（二）提高自然营养繁殖器官（三）提高一般营养繁殖器官的繁殖系数：1、充分利用园林植物巨大的再生力；2、延长繁殖时间；3、节约繁殖材料。第20页/共70页五、观赏植物优良品种的生产1.种源控制 2.生产过程的控制3.采收和储运过程的控制第21页/共70页良种繁育程序品种审定和登录原种生产种苗繁殖生产防止品种退化提高良种生活力种子（苗）检疫种子（苗）质量检验第22页/共70页观赏植物品
12、种培育和品种应用种质资源研究育种技术研究优良品种培育优良品种繁殖优良品种应用引种选种育种第23页/共70页六 植物组织培养技术 及其在育种中的应用植物组织培养技术是现代植物生物技术的基本技术。第24页/共70页(一)、植物组织培养的基本步骤1、植物细胞的全能性（Cell Totipotency）一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称之为细胞的全能性。第25页/共70页2、植物离体分化的类型无菌短枝型丛生芽增殖型器官发生型胚状体发生型原球茎发生型第26页/共70页3、植物组织培养的特点培育材料经济；培养条件可人为控制；生长周期短，繁殖率高；管理方便，利于自动化控制。第27页/共70页5、植物
13、组织培养的基本操作无菌操作技术细胞培养技术原生质体融合技术第28页/共70页v接种用具的灭菌接种用具的灭菌 接种前，必须把用具放入接种室或箱内，初用接种室或箱时要用甲醛（一般市售分析纯的有效成份为 36-38%熏蒸5小时以上再开紫外光灯照射40-60分钟，以后在每次接种之前，把要接种的试管或三角瓶放入接种室（箱）内，用5%的煤酚瓶皂溶液即来苏尔（一般市售的有效成份为47-53%）或 5%的石灰炭酸液喷雾消毒，再打开紫外光灯照20-40分钟，这样消毒后，再经30-40分钟便可进行接种。第29页/共70页v接种材料的表面灭菌接种材料的表面灭菌 接种前花蕾或穗的彻底灭菌是杜绝污染的主要关键，先用70
14、-75%的酒精浸泡10-15秒钟或用酒精棉球擦两遍，初步杀死表面所带的微生物，放在10%的漂白粉液或饱和漂白粉液中浸泡15-30分钟杀菌，然后用无菌水冲洗2-3次。消毒过的穗子或花蕾用消毒纱布包好，待取花药接种，注意，穗子或花蕾的操作要在无菌条件下进行。第30页/共70页5、植物组织培养所需营养与环境条件（1）无机营养大量元素：大量元素：一般是指浓度大于0.5mmol/L.氮(N)、磷(P)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、硫(S)。微量元素：微量元素：包括铁(Fe)、铜(Cu)、钼(Mo)、锌(Zn)、钠(Na)、锰(Mn)、钴(Co)、硼(B)、碘(I)。（2）有机营养维生素、肌醇、氨基
15、酸、有机添加物。维生素、肌醇、氨基酸、有机添加物。（3）生长调节物生长素生长素：2，4-D、奈乙酸(NAA)、吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸(IAA)。细胞分裂素细胞分裂素：激动素（KT）、6-苄基氨基嘌呤（6BA）、玉米素（ZT）。赤霉素赤霉素（GA）：脱落酸（ABA）、乙烯利（CEDP）。第31页/共70页（4）琼脂（5）能源和渗透压（6）其他成分（7）温度（8）光照（光强、光质）培养基的配制：培养基的配制：培养基母液的配制培养基母液的配制；配制培养基的步骤；配制培养基的步骤；培养基的分装及灭菌。培养基的分装及灭菌。第32页/共70页6、植物组织培养经历的五个阶段：（1）预备阶段预备阶段外植
16、体的获得；接种材料的消毒处理；配制适宜的培养基；（2）诱导去分化阶段诱导去分化阶段（3）继代增殖阶段）继代增殖阶段（4）生根成芽阶段）生根成芽阶段（5）移栽成活阶段）移栽成活阶段第33页/共70页(二)、植物组织培养技术在育种中的应用种质资源保护；优良品种快速繁殖；诱发和离体筛选突变体；克服远缘杂交困难；克服种子发育中的障碍；单倍体育种的技术环节基因工程的基础技术第34页/共70页（一）单倍体育种1.单倍体的概念及其特点 只含有一套染色体组的生物体；被子植物的配子体世代。矮小性；不育性；全显性。第35页/共70页2.单倍体植物在育种上的意义1.单倍体植物的直接利用；2.克服杂种分离，缩短育种年
17、限；3.快速获得异花授粉植物的自交系；4.单倍体植物的诱变育种；5.克服远缘杂种不孕性与不稳定的现象；第36页/共70页3.单倍体植株和愈伤组织的培养（1）单倍体材料的采集 单倍体育种的首要问题是如何获得大最的单倍体植株。据现有的研究材料，用花药培养产生单倍体植株有两个途径:第一是在离体培养的花药中，花粉经过类似胚胎发育的过程直接形成单倍体植物，如烟草、曼陀罗等。第二是在离体培养的花药中，花粉形成愈伤组织，再从愈伤组织分化出单倍体植株。第37页/共70页（2）花药的接种v接种前的准备工作 接种和培养花药是在无菌条件下进行的，所用的一切用具必须彻底灭菌。v花粉发育时期的鉴定 适宜的花粉发育时期对
18、于提高花粉诱导愈伤组织分化的频率是很重要的，为此，进行花药培养前，要用显微镜进行花粉发育时期的鉴定。经显微镜检查后，把花粉细胞的发育进期与花药或花序的外部形态联系起来，找出花粉单核期或单核期的花蕾或花序的外部形态标志选取花药进行接种培养。第38页/共70页（3）从愈伤组织分化成苗 诱导愈伤组织分化出根、茎、叶的方法是在愈伤组织长到1-3毫米大小（如小米大）时，即可转移到诱导分化培养基上，促使分化长出植株。一般说来，愈伤组织如果先形成芽，随后根自然会发生，如果先有根，以后不一定会出芽。因此，掌握芽分化的条件是十分重要的。愈伤组织转移培养工作是在无菌室或接种箱内进行的，转移后愈伤组织培养在23-2
19、8恒温室内，每日光照9-11小时，可用日光灯作辅助光，光强度在2000勒克斯以上。在转移愈伤组织时，应注意其极性，原来向上的一但转移后的一但转移后仍应向上，否则会影响生长，同时在转移时，就避免沾带过多的培养基。第39页/共70页4.染色体加倍处理方式：试管内进行；花粉植株定植后进行；药剂处理；植株鉴定。第40页/共70页单倍体育种程序：材料采集 接种培养 诱导愈伤组织 获得再生植株 染色体加倍 幼苗培育和品种选择 第41页/共70页（二）原生质体培养与体细胞杂交 常规杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图通过这
20、种崭新的手段冲破自然界的禁锢。第42页/共70页1.原生质体的概念 植物细胞原生质体是指那些以去除全部细胞壁的细胞。此时，细胞外仅由细胞膜包裹，呈圆形只有在高渗溶液中才能相对稳定。原生质体经适当处理，可与其他细胞融合成新的体细胞。第43页/共70页2.原生质体的特点比完整的细胞更容易获得外来遗传物质，为实现异源遗传物质转化提供了较好的实验材料。原生质体在一定条件下可以融合成杂种细胞，开辟了一条新的育种途径。第44页/共70页3.发展概况1892，J.A.Klerker 用机械法获得原生质体；1960，E.C.Cocking 用酶法首先从番茄根尖中分离出大量有活性的原生质体并通过培养再生出细胞壁
21、形成再生植株;1960，G.Barski发现,题细胞原生质体能融合在一起形成单核的、并能进行分裂的杂种细胞；1972，P.S.Carlon 首次获得烟草体细胞种间杂种。80s 此项技术在我国得到发展。第45页/共70页4.原生质体的制备（1）取材与灭菌（2）酶解(纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶)（3）分离（沉淀法、漂洗法、滴洗法）（4）洗涤（5）鉴定（形态观测、活性鉴定）原生质体的培养：细胞壁再生；细胞分裂；植株再生。第46页/共70页5.原生质体的融合v化学法诱导融合化学法诱导融合1)按比例混合双亲原生质体-2)滴加PEG-3)滴加高钙高PH值溶液-4)洗涤原生质体溶液-5)离心获得原生质体溶
22、液-6)筛选杂种细胞-7)再生杂种细胞。第47页/共70页6.融合细胞的培养鉴定与筛选杂和细胞的显微镜鉴别；互补法鉴定杂和细胞；细胞与分子生物学法；植株形态的鉴别。第48页/共70页第49页/共70页（三）人工种子 人工种子即人为制造的种子，它是一种含有植物胚状体或芽、营养成分、激素、及其他成分的人工胶囊。其具有种子的功能，可直接用于田间播种。第50页/共70页 1、人工种子的构成人工种子的构成 人工种皮 胚 状 体 人工胚乳第51页/共70页2、人工种子的特点人工种子的特点：（1）可以不受环境条件的限制，周年进行生产；（2）经人工无性繁殖产生，有利于保存该种系 的优良性状；（3）成本低，适于
23、田间机械化生产；（4）可根据需要调节胚乳成分。第52页/共70页3、人工种子的制备人工种子的制备（1）胚状体的制备及其同步生长；（2）人工胚乳的制备；（3）配制包埋剂及人工包埋。第53页/共70页人工种子包埋示意图 4%海藻酸钠 体细胞胚 包埋丸 2%CaCl 人工种子 水 第54页/共70页4、人工种子的贮存与萌发 低温、干燥、洁净。第55页/共70页第56页/共70页第57页/共70页第58页/共70页第59页/共70页第60页/共70页第61页/共70页第62页/共70页第63页/共70页第64页/共70页第65页/共70页第66页/共70页第67页/共70页第68页/共70页第69页/共70页感谢您的观看。第70页/共70页