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1、脉冲标记法是一种建立较早且被广泛采用的方法，这种方法主要适用于细胞种类构成简单、细胞周期相对较短，周期均匀的细胞群体。用3H-TdR短期饲养细胞，然后置换新培养液继续培养，之后每隔一段时间进行放射自显影观察分析，确定处于某一时期的细胞数量，进而确定细胞周期各个时相的长短第1页/共18页S期的细胞被3H-TdR标记，假设之后各个细胞周期相同，且不同细胞细胞周期运转速率相同则如图所示，可认为淡蓝色图形为所有的细胞（横向代表时间，纵向代表细胞个数）第2页/共18页 S期 G2期M期时间 细胞个数标记细胞经过时间的推移，我们来看看标记细胞最前面的进入了哪个时期先头细胞第3页/共18页 G2期M期时间
2、细胞个数标记细胞G2期所占时间TG2细胞开始进入M期先头细胞进入M期带标记的分裂细胞个数时间第4页/共18页 G2期M期时间 细胞个数重叠面积达到最大未进入M期的标记细胞先头细胞进入M期末期M期所占时间TM带标记的分裂细胞个数时间TM第5页/共18页 G2期M期时间 细胞个数带标记的分裂细胞个数时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期S期所占时间TsTS第6页/共18页 G2期M期时间 细胞个数带标记的分裂细胞个数时间G1期S期下一细胞周期先头细胞达到最大值的50%G2期先头细胞达到最大值的50%整个细胞周期TCM期间期先头细胞正好经历过整个周期TC第7页/共18页到这里，
3、突然出现一个问题，由求Ts的图可以看出直线1和直线2的长度相等，可以平移带标记的分裂细胞个数时间L1L2第8页/共18页L1又可以平移到右侧L3带标记的分裂细胞个数时间L1L3第9页/共18页那么计算S期的公式将有如下的三个：1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半，经历到最大值，再下降到一半所用的时间2.Ts=先头细胞先到达M期，再上升到最大值，最后即将下降所用的时间3.Ts=先头细胞刚上升到最大值，再下降到最小值所用的时间 而且看起来公式2和3要比公式1简单许多，因为最大值的一半不好找，而上升和下降的拐点则容易找第10页/共18页 S期 G2期M期时间 细胞个数其实这是因为我们假定处在S期中各
4、个时期的细胞个数相等。如果不相等，则如下图所示标记细胞第11页/共18页 G2期M期时间带标记的分裂细胞个数时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期S期所占时间TsTS这里的图像便不是原来对称的等腰梯形了！第12页/共18页 G2期M期时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期不轴对称图形的等面积分线不在底边中间，因而分底边所得的两条线段不相等！第13页/共18页带标记的分裂细胞个数时间L1L2结合上一张图，可以得出这里L1不等于L2第14页/共18页因而对于如下的三个计算S期的公式：1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半，经历到最大值，再下降到一半所用的时
5、间（时刻准确）2.Ts=先头细胞先到达M期，再上升到最大值，最后即将下降所用的时间（在特殊情况下准确）3.Ts=先头细胞刚上升到最大值，再下降到最小值所用的时间（在特殊情况下准确）因此虽然公式1比较麻烦，但是得出的结论符合一般情况，而公式2和3只有在特殊情况下（即假设细胞分布的图像是轴对称图形）才能够成立。而且观察图线虽然容易得到拐点，但是拐点处斜率变化很大，取值精确度低，而在50%左右的地方，斜率变化趋于平缓，此时取值更为准确。考虑到实验的准确性和正确性，应当取公式1第15页/共18页同时我们也应当牢记其余的几个公式，下面再复习一遍 【TG 1=Tc-(TM+Ts+TG 2)】时间间期TCTMTS第16页/共18页敢竭鄙怀，恭疏见解，敢竭鄙怀，恭疏见解，请洒潘江，各倾陆海云尔请洒潘江，各倾陆海云尔 。谢谢观赏！谢谢观赏！第17页/共18页感谢您的观看！第18页/共18页