色谱分析法简述幻灯片.ppt

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1、色谱分析法简述第1页,共10页,编辑于2022年,星期二一.色谱法的原理色谱法源自于对植物色素分离和提纯,现代色谱法的原理如下:混合试样中各组份在流动相和固定相间的分配系数不同,随着流动相在色谱柱中运行,各组份就在两相间进行反复多次分配。第2页,共10页,编辑于2022年,星期二由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同,因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的色谱柱后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组份的色谱峰。第3页,共10页,编辑于2022年,星期二二.色谱法的分类1.按两相的状态可以分为:(1)气相色谱法:气体为流动相。以气体或

2、低沸点有机化合物为主要分析对象;(2)液相色谱法:液体为流动相。以高沸点有机化合物为主要分析对象;第4页,共10页,编辑于2022年,星期二2.其他常用色谱法:(1)离子色谱法:液体为流动相,液相色谱法的特殊分离方式。以无机离子为主要分析对象;(2)超临界色谱:流动相处于超临界状态;(3)薄板层析色谱:液体通过毛细作用运动;(4)毛细管高效电泳:以电场为推动力,对蛋白质等生化试样有很高的分离效率。第5页,共10页,编辑于2022年,星期二三.色谱法的特点1.高灵敏度:检测器的发展,可检出10-11-10-13克的物质,可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析。2.高选择性:可有效地分离性质极为

3、相近的各种同分异构体和各种同位素。3.高效能:可分离沸点极为相似和及其复杂的多组分混合物。4.速度快:一般分析可在几分钟到几十分钟内完成,特别是气相色谱,分析速度较快。第6页,共10页,编辑于2022年,星期二四.气相色谱仪1.气路系统(1)气源一般用氢、氮、氩等。多采用氮气作为载气,作用主要是把样品输送到色谱柱和检测器中。(2)流量调节阀可以调节载气的流速,常用的有稳压阀和针形阀。(3)流量计常用的有转子流量计和皂膜流速计等。2.进样器和汽化室(1)进样工具常有定量阀(六通阀)和注射器。(2)汽化室的作用是将液体或固体样品瞬间汽化为蒸汽。第7页,共10页,编辑于2022年,星期二3.色谱柱色

4、谱柱至于柱室中,一般常用不锈钢管或铜管,填充固定相构成,管子成U型或螺旋形。柱管内径为28mm,还有内径更小的称为毛细管色谱柱,柱管长度一般为1-4m或更长。4.检测器检测器用来检测色谱柱后流出的组分,并以电压或电流信号显示出来,常用检测器有热导;氢焰检测器;电子捕获式和火焰光度式检测器等。5.数据记录和处理系统将检测器输出的信号记录下来,进行定性,定量分析。第8页,共10页,编辑于2022年,星期二五.氢焰检测器(FID)优点:结构简单、性能优异、稳定可靠、操作方便结构:FID的电离室由金属圆筒作外罩,底座中心有喷嘴;喷嘴附近有环状金属圈(极化极,又称发射极),上端有一个金属圆简(收集极),

5、两者间加90300V的直流电压,形成静电场。收集极捕集的离子流经放大器的高阻产生电压信号、放大后送至数据采集系统;燃烧气、辅助气和色谱柱由底座引入;燃烧气及水蒸气由外罩上方小孔逸出。FID由电离室(a)和放大电路(b)组成第9页,共10页,编辑于2022年,星期二原理由色谱柱流出的载气(样品)流经温度高达2100的氢火焰时,待测组分在火焰中发生离子化作用,使两个电极之间出现一定量的正、负离子,在电场的作用下,正、负离子各被相应电极所收集。当载气中不含待测物时,火焰中离子很少,即基流很小,约10-14A。当待测物通过检测器时,火焰中电离的离子增多,电流增大(但很微弱10-810-12A)。需经高阻(108l011欧)后得到较大的电压信号,再由放大器放大,才能在记录仪上显示出足够大的色谱峰。该电流的大小,在一定范围内与单位时间内进入检测器的待测组分的质量成正比,所以FID可定量分析。第10页,共10页,编辑于2022年,星期二

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