生物学信息分析幻灯片.ppt

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1、生物生物学学信息分析信息分析第1页,共81页,编辑于2022年,星期一实验目的实验目的 了解相关的生物信息了解相关的生物信息学数据库(学数据库(NCBI数数据库等)和掌握数据据库等)和掌握数据库检索方法,学会相库检索方法,学会相关软件的使用,并利关软件的使用,并利用生物信息学软件根用生物信息学软件根据研究目的和对象设据研究目的和对象设计引物。计引物。第2页,共81页,编辑于2022年,星期一方法方法v根据酶或基因的名根据酶或基因的名称(称(GenBank登登录号)找到需要的基录号)找到需要的基因的核苷酸序列,根因的核苷酸序列,根据序列和据序列和PCR的目的目的设计获得该基因的设计获得该基因的的

2、CDS的引物的引物(注意注意引物设计时引物酶切引物设计时引物酶切位点位点)。第3页,共81页,编辑于2022年,星期一目的基因序列的检索目的基因序列的检索第4页,共81页,编辑于2022年,星期一主要数据库介绍主要数据库介绍GenebankEMBLDDBJ第5页,共81页,编辑于2022年,星期一vGenebank Genebank库库包含了所有已知的核酸序列包含了所有已知的核酸序列和蛋白和蛋白质质序列,以及序列,以及与它们与它们相相关关的文的文献献著作著作和生物和生物学学注注释释。它它是由美是由美国国国国立生物技立生物技术术信信息中心息中心(NCBI)建立和建立和维护维护的。的。vNCBI的

3、的网网址是:址是:http:/www.ncbi.nlm.nih.gov第6页,共81页,编辑于2022年,星期一vEMBL核酸序列数据库由欧洲生物信息学研究所由欧洲生物信息学研究所(EBI)维护的核维护的核酸序列数据构成,查询检索可以通过通酸序列数据构成,查询检索可以通过通过因特网上的序列提取系统过因特网上的序列提取系统(SRS)服务完服务完成。成。v数据库网址是:数据库网址是:http:/www.ebi.ac.uk/embl/第7页,共81页,编辑于2022年,星期一vDDBJ数据库日本日本DNA数据仓库数据仓库(DDBJ)也是一个全面也是一个全面的核酸序列数据库,与的核酸序列数据库,与Ge

4、nbank和和EMBL核酸库合作交换数据。使用其主页核酸库合作交换数据。使用其主页上提供的上提供的SRS工具进行数据检索和序列分工具进行数据检索和序列分析。析。vDDBJ的网址是:的网址是:http:/www.ddbj.nig.ac.jp/第8页,共81页,编辑于2022年,星期一vvNCBINCBI介绍:介绍:NCBINCBINCBINCBI建立在建立在建立在建立在1988198819881988年年年年,作为一种公共分子生物学信作为一种公共分子生物学信作为一种公共分子生物学信作为一种公共分子生物学信息资源息资源息资源息资源,而创建的公开数据库。而创建的公开数据库。而创建的公开数据库。而创建

5、的公开数据库。vvNCBINCBI的的计划计划:1.1.1.1.基本基本基本基本研究;研究;研究;研究;2.2.2.2.数据库;数据库;数据库;数据库;3.3.3.3.软件的开发;软件的开发;软件的开发;软件的开发;4.4.4.4.教育教育教育教育和训练和训练和训练和训练第9页,共81页,编辑于2022年,星期一vv现现现现在我在我在我在我们们们们以以以以查查查查找甘薯找甘薯找甘薯找甘薯异异戊戊烯氯喹烯氯喹异构异构酶(酶(Ipomoea batatas Ipomoea batatas isopentenyl diphosphate isopentenyl diphosphate isomera

6、se isomerase,ipiipi)的)的)的)的 编码编码编码编码序序序序列列列列为为为为例,介例,介例,介例,介绍绍绍绍如何如何如何如何从从从从中中中中在在在在线获线获线获线获取所需要的核酸序列取所需要的核酸序列取所需要的核酸序列取所需要的核酸序列应应用用举举例例第10页,共81页,编辑于2022年,星期一1.进入第11页,共81页,编辑于2022年,星期一2.选择数据库3.查询关键词4.开始查询第12页,共81页,编辑于2022年,星期一显示格式符合条件的记录数每页显示数目第13页,共81页,编辑于2022年,星期一相关记录点击进入第14页,共81页,编辑于2022年,星期一Genb

7、ank格式的序列记录第15页,共81页,编辑于2022年,星期一第16页,共81页,编辑于2022年,星期一FASTA格式的序列记录第17页,共81页,编辑于2022年,星期一基因表达的基因表达的ORF分析分析第18页,共81页,编辑于2022年,星期一aagcaagacg ccaagggcca aggctggctg caagaagcaa agaggaacga acactgtgaa 61 tatcccaatg aagcaagacg ccaagggcca aggctggctg caagaagcaa agaggaacga acactgtgaa 61 tatcccaatg aagcaagacg cc

8、aagggcca aggctggctg caagaagcaa agaggaacga acactgtgaa 61 tatcccaatg aagcaagacg ccaagggcca aggctggctg caagaagcaa agaggaacga acactgtgaa 61 tatcccaatg tcgatgatgg cttctgttca aatctgtcgg agattctctc ccctagtcgc 121 ccggccggcg tcgatgatgg cttctgttca aatctgtcgg agattctctc ccctagtcgc 121 ccggccggcg tcgatgatgg ct

9、tctgttca aatctgtcgg agattctctc ccctagtcgc 121 ccggccggcg tcgatgatgg cttctgttca aatctgtcgg agattctctc ccctagtcgc 121 ccggccggcg atttactctg ccaattcttc attcctctca ccagtctctt tcgcctcttc 181 ttctctttca atttactctg ccaattcttc attcctctca ccagtctctt tcgcctcttc 181 ttctctttca atttactctg ccaattcttc attcctctca

10、ccagtctctt tcgcctcttc 181 ttctctttca atttactctg ccaattcttc attcctctca ccagtctctt tcgcctcttc 181 ttctctttca attatgccga tccgcctccg ctgcagagct tcagtacact ctgtccgcgc 241 cgcctccacc attatgccga tccgcctccg ctgcagagct tcagtacact ctgtccgcgc 241 cgcctccacc attatgccga tccgcctccg ctgcagagct tcagtacact ctgtccgcg

11、c 241 cgcctccacc attatgccga tccgcctccg ctgcagagct tcagtacact ctgtccgcgc 241 cgcctccacc atgggggaca ccatcactga tgccaacatg gatgctgtcc agcgccgcct 301 catgtttgac atgggggaca ccatcactga tgccaacatg gatgctgtcc agcgccgcct 301 catgtttgac atgggggaca ccatcactga tgccaacatg gatgctgtcc agcgccgcct 301 catgtttgac atg

12、ggggaca ccatcactga tgccaacatg gatgctgtcc agcgccgcct 301 catgtttgac gacgagtgta ttttggtgga tgagaatgac cgtgttgttg gtcatgatac 361 caagtataat gacgagtgta ttttggtgga tgagaatgac cgtgttgttg gtcatgatac 361 caagtataat gacgagtgta ttttggtgga tgagaatgac cgtgttgttg gtcatgatac 361 caagtataat gacgagtgta ttttggtgga t

13、gagaatgac cgtgttgttg gtcatgatac 361 caagtataat tgtcatctta tggagaagat tgaatctgag aatctgcttc acagagcttt 421 cagtgttttc tgtcatctta tggagaagat tgaatctgag aatctgcttc acagagcttt 421 cagtgttttc tgtcatctta tggagaagat tgaatctgag aatctgcttc acagagcttt 421 cagtgttttc tgtcatctta tggagaagat tgaatctgag aatctgcttc

14、 acagagcttt 421 cagtgttttc ttatttaatt caaactatga gttgcttctt cagcaacgat ctgcgacaaa 481 ggtcaccttc ttatttaatt caaactatga gttgcttctt cagcaacgat ctgcgacaaa 481 ggtcaccttc ttatttaatt caaactatga gttgcttctt cagcaacgat ctgcgacaaa 481 ggtcaccttc ttatttaatt caaactatga gttgcttctt cagcaacgat ctgcgacaaa 481 ggtc

15、accttc cctttggtgt ggactaacac ctgctgcagc catcctctgt accgggagtc 541 tgagttgatt cctttggtgt ggactaacac ctgctgcagc catcctctgt accgggagtc 541 tgagttgatt cctttggtgt ggactaacac ctgctgcagc catcctctgt accgggagtc 541 tgagttgatt cctttggtgt ggactaacac ctgctgcagc catcctctgt accgggagtc 541 tgagttgatt gaagagaatg ct

16、cttggtgt gaggaatgct gcacaaagaa agcttcttga 601 tgaactgggg gaagagaatg ctcttggtgt gaggaatgct gcacaaagaa agcttcttga 601 tgaactgggg gaagagaatg ctcttggtgt gaggaatgct gcacaaagaa agcttcttga 601 tgaactgggg gaagagaatg ctcttggtgt gaggaatgct gcacaaagaa agcttcttga 601 tgaactgggg attcctgcag aggatgtccc agttgatgaa

17、ttcacaacat tgggccgtat 661 cctgtataaa attcctgcag aggatgtccc agttgatgaa ttcacaacat tgggccgtat 661 cctgtataaa attcctgcag aggatgtccc agttgatgaa ttcacaacat tgggccgtat 661 cctgtataaa attcctgcag aggatgtccc agttgatgaa ttcacaacat tgggccgtat 661 cctgtataaa gcaccttctg atgggagatg gggagagcat gaacttgatt atcttctct

18、t 721 cattgtgagg gcaccttctg atgggagatg gggagagcat gaacttgatt atcttctctt 721 cattgtgagg gcaccttctg atgggagatg gggagagcat gaacttgatt atcttctctt 721 cattgtgagg gcaccttctg atgggagatg gggagagcat gaacttgatt atcttctctt 721 cattgtgagg gatgttggca tgcacccaaa cccggatgag gttgcagatg ttaaatatgt 781 gaatagggaa gat

19、gttggca tgcacccaaa cccggatgag gttgcagatg ttaaatatgt 781 gaatagggaa gatgttggca tgcacccaaa cccggatgag gttgcagatg ttaaatatgt 781 gaatagggaa gatgttggca tgcacccaaa cccggatgag gttgcagatg ttaaatatgt 781 gaatagggaa cagctgaaag agatcttgag gaaagcaaat gctggagagg atggtataaa 841 gctttcccct cagctgaaag agatcttgag g

20、aaagcaaat gctggagagg atggtataaa 841 gctttcccct cagctgaaag agatcttgag gaaagcaaat gctggagagg atggtataaa 841 gctttcccct cagctgaaag agatcttgag gaaagcaaat gctggagagg atggtataaa 841 gctttcccct tggttcagat tagtcgtcga aaatttcttg ttcaaatggt gggatcatgt 901 cgagaaaggc tggttcagat tagtcgtcga aaatttcttg ttcaaatggt

21、 gggatcatgt 901 cgagaaaggc tggttcagat tagtcgtcga aaatttcttg ttcaaatggt gggatcatgt 901 cgagaaaggc tggttcagat tagtcgtcga aaatttcttg ttcaaatggt gggatcatgt 901 cgagaaaggc accctaatgg aagctgcaga tatgaaaacc attcacaagt tggcctaaac 961 agccattggc accctaatgg aagctgcaga tatgaaaacc attcacaagt tggcctaaac 961 agcc

22、attggc accctaatgg aagctgcaga tatgaaaacc attcacaagt tggcctaaac 961 agccattggc accctaatgg aagctgcaga tatgaaaacc attcacaagt tggcctaaac 961 agccattggc tgagcttttg ttaaaccctt acatctacca ttcacttaac tgagcaaaaa 1021 tatattctat tgagcttttg ttaaaccctt acatctacca ttcacttaac tgagcaaaaa 1021 tatattctat tgagcttttg

23、ttaaaccctt acatctacca ttcacttaac tgagcaaaaa 1021 tatattctat tgagcttttg ttaaaccctt acatctacca ttcacttaac tgagcaaaaa 1021 tatattctat ggtcttctgc ttagtttcat gcttcatgct tgaactttca agttttatgt 1081 tacttttggc ggtcttctgc ttagtttcat gcttcatgct tgaactttca agttttatgt 1081 tacttttggc ggtcttctgc ttagtttcat gcttc

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25、g ctatcaaaaa aaaaaaaaaa 1141 aaaaaaaaaa aaaaa/tgttaggaac tagtaatata tgtgaacttg ctatcaaaaa aaaaaaaaaa 1141 aaaaaaaaaa aaaaa/第19页,共81页,编辑于2022年,星期一基因表达的基因表达的ORF分析分析vv利用计算机和互联网,对核酸序列的所有相位进行搜索可利用计算机和互联网,对核酸序列的所有相位进行搜索可利用计算机和互联网,对核酸序列的所有相位进行搜索可利用计算机和互联网,对核酸序列的所有相位进行搜索可以很快地获得结果。国际互联网上的分析资以很快地获得结果。国际互联网上的分

26、析资以很快地获得结果。国际互联网上的分析资以很快地获得结果。国际互联网上的分析资源有:源有:源有:源有:http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/查查查查找找找找);http:/expasy.hcuge.ch/www/dna.html);http:/expasy.hcuge.ch/www/dna.html(将翻译为蛋白质将翻译为蛋白质将翻译为蛋白质将翻译为蛋白质)。第20页,共81页,编辑于2022年,星期一第21页,共81页,编辑于2022年,星期一第22页,共81页,编辑于2022年,星期一第23页,共8

27、1页,编辑于2022年,星期一第24页,共81页,编辑于2022年,星期一核酸序列的核酸序列的比对分析比对分析第25页,共81页,编辑于2022年,星期一vv对核酸序列的首要分析是联网进行序列的同源性分析,以对核酸序列的首要分析是联网进行序列的同源性分析,以对核酸序列的首要分析是联网进行序列的同源性分析,以对核酸序列的首要分析是联网进行序列的同源性分析,以便能够利用最新的数据库反映该序列是否是已知序列以及便能够利用最新的数据库反映该序列是否是已知序列以及便能够利用最新的数据库反映该序列是否是已知序列以及便能够利用最新的数据库反映该序列是否是已知序列以及与已知序列同源性的高低。典型的分析是采用与

28、已知序列同源性的高低。典型的分析是采用与已知序列同源性的高低。典型的分析是采用与已知序列同源性的高低。典型的分析是采用NCBINCBI的的的的BLASTBLAST软件对软件对软件对软件对GENBANKGENBANK中的非冗余数据库(中的非冗余数据库(中的非冗余数据库(中的非冗余数据库(non-non-redundant database,nrredundant database,nr)进行查询。该数据库是对)进行查询。该数据库是对)进行查询。该数据库是对)进行查询。该数据库是对GENBANKGENBANK、EMBLEMBL和和和和DDBJDDBJ中去除所有相同核酸序列中去除所有相同核酸序列中去

29、除所有相同核酸序列中去除所有相同核酸序列进行整合后所得到的最为全面的已知基因数据库,其中还进行整合后所得到的最为全面的已知基因数据库,其中还进行整合后所得到的最为全面的已知基因数据库,其中还进行整合后所得到的最为全面的已知基因数据库,其中还包括了部分基因组的序列。包括了部分基因组的序列。包括了部分基因组的序列。包括了部分基因组的序列。第26页,共81页,编辑于2022年,星期一vv运行时联网至:运行时联网至:运行时联网至:运行时联网至:http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/BLASThttp:/www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST按照提示进行查询。按照提示进行查

30、询。按照提示进行查询。按照提示进行查询。第27页,共81页,编辑于2022年,星期一vvggggtcgagt ccgcgtccac ccgcgagtac aaccttcttg cagctcctcc gtcgccggtc 61 cacacccgcc accagttcgc ggggtcgagt ccgcgtccac ccgcgagtac aaccttcttg cagctcctcc gtcgccggtc 61 cacacccgcc accagttcgc ggggtcgagt ccgcgtccac ccgcgagtac aaccttcttg cagctcctcc gtcgccggtc 61 cacac

31、ccgcc accagttcgc ggggtcgagt ccgcgtccac ccgcgagtac aaccttcttg cagctcctcc gtcgccggtc 61 cacacccgcc accagttcgc catggatgac gatatcgctg cgctcgtcgt cgacaacggc 121 tccggcatgt gcaaggccgg cttcgcgggc gacgatgctc catggatgac gatatcgctg cgctcgtcgt cgacaacggc 121 tccggcatgt gcaaggccgg cttcgcgggc gacgatgctc catggatg

32、ac gatatcgctg cgctcgtcgt cgacaacggc 121 tccggcatgt gcaaggccgg cttcgcgggc gacgatgctc catggatgac gatatcgctg cgctcgtcgt cgacaacggc 121 tccggcatgt gcaaggccgg cttcgcgggc gacgatgctc cccgggccgt cttcccctcc 181 atcgtgggcc gccctaggca ccagggtgtg atggtgggta tgggtcagaa ggactcctac cccgggccgt cttcccctcc 181 atcgtg

33、ggcc gccctaggca ccagggtgtg atggtgggta tgggtcagaa ggactcctac cccgggccgt cttcccctcc 181 atcgtgggcc gccctaggca ccagggtgtg atggtgggta tgggtcagaa ggactcctac cccgggccgt cttcccctcc 181 atcgtgggcc gccctaggca ccagggtgtg atggtgggta tgggtcagaa ggactcctac 241 gtgggcgacg aggcccagag caagagaggc atcctgaccc tgaagtac

34、cc cattgaacac 301 ggcattgtca 241 gtgggcgacg aggcccagag caagagaggc atcctgaccc tgaagtaccc cattgaacac 301 ggcattgtca 241 gtgggcgacg aggcccagag caagagaggc atcctgaccc tgaagtaccc cattgaacac 301 ggcattgtca 241 gtgggcgacg aggcccagag caagagaggc atcctgaccc tgaagtaccc cattgaacac 301 ggcattgtca ccaactggga cgata

35、tggag aagatttggc accacacttt ctacaatgag 361 ctgcgtgtgg cccctgagga gcaccctgtg ccaactggga cgatatggag aagatttggc accacacttt ctacaatgag 361 ctgcgtgtgg cccctgagga gcaccctgtg ccaactggga cgatatggag aagatttggc accacacttt ctacaatgag 361 ctgcgtgtgg cccctgagga gcaccctgtg ccaactggga cgatatggag aagatttggc accacac

36、ttt ctacaatgag 361 ctgcgtgtgg cccctgagga gcaccctgtg ctgctcaccg aggcccctct gaaccctaag 421 gccaaccgtg aaaagatgac ccagatcatg tttgagacct tcaacacccc ctgctcaccg aggcccctct gaaccctaag 421 gccaaccgtg aaaagatgac ccagatcatg tttgagacct tcaacacccc ctgctcaccg aggcccctct gaaccctaag 421 gccaaccgtg aaaagatgac ccaga

37、tcatg tttgagacct tcaacacccc ctgctcaccg aggcccctct gaaccctaag 421 gccaaccgtg aaaagatgac ccagatcatg tttgagacct tcaacacccc agccatgtac 481 gtagccatcc aggctgtgtt gtccctgtat gcctctggtc gtaccactgg cattgtgatg 541 agccatgtac 481 gtagccatcc aggctgtgtt gtccctgtat gcctctggtc gtaccactgg cattgtgatg 541 agccatgtac

38、 481 gtagccatcc aggctgtgtt gtccctgtat gcctctggtc gtaccactgg cattgtgatg 541 agccatgtac 481 gtagccatcc aggctgtgtt gtccctgtat gcctctggtc gtaccactgg cattgtgatg 541 gactccggag acggggtcac ccacactgtg cccatctatg agggttacgc gctccctcat 601 gccatcctgc gtctggacct gactccggag acggggtcac ccacactgtg cccatctatg aggg

39、ttacgc gctccctcat 601 gccatcctgc gtctggacct gactccggag acggggtcac ccacactgtg cccatctatg agggttacgc gctccctcat 601 gccatcctgc gtctggacct gactccggag acggggtcac ccacactgtg cccatctatg agggttacgc gctccctcat 601 gccatcctgc gtctggacct ggctggccgg gacctgacag actacctcat gaagatcctg 661 accgagcgtg gctacagctt ca

40、ccaccaca gctgagaggg ggctggccgg gacctgacag actacctcat gaagatcctg 661 accgagcgtg gctacagctt caccaccaca gctgagaggg ggctggccgg gacctgacag actacctcat gaagatcctg 661 accgagcgtg gctacagctt caccaccaca gctgagaggg ggctggccgg gacctgacag actacctcat gaagatcctg 661 accgagcgtg gctacagctt caccaccaca gctgagaggg aaat

41、cgtgcg tgacattaaa 721 gagaagctgt gctatgttgc cctagacttc gagcaagaga tggccactgc cgcatcctct aaatcgtgcg tgacattaaa 721 gagaagctgt gctatgttgc cctagacttc gagcaagaga tggccactgc cgcatcctct aaatcgtgcg tgacattaaa 721 gagaagctgt gctatgttgc cctagacttc gagcaagaga tggccactgc cgcatcctct aaatcgtgcg tgacattaaa 721 ga

42、gaagctgt gctatgttgc cctagacttc gagcaagaga tggccactgc cgcatcctct 781 tcctccctgg agaagagcta tgagctgcct gacggtcagg tcatcactat cggcaatgag 841 cggttccgat 781 tcctccctgg agaagagcta tgagctgcct gacggtcagg tcatcactat cggcaatgag 841 cggttccgat 781 tcctccctgg agaagagcta tgagctgcct gacggtcagg tcatcactat cggcaat

43、gag 841 cggttccgat 781 tcctccctgg agaagagcta tgagctgcct gacggtcagg tcatcactat cggcaatgag 841 cggttccgat gccccgaggc tctcttccag ccttccttcc tgggtatgga atcctgtggc 901 atccatgaaa ctacattcaa ttccatcatg gccccgaggc tctcttccag ccttccttcc tgggtatgga atcctgtggc 901 atccatgaaa ctacattcaa ttccatcatg gccccgaggc t

44、ctcttccag ccttccttcc tgggtatgga atcctgtggc 901 atccatgaaa ctacattcaa ttccatcatg gccccgaggc tctcttccag ccttccttcc tgggtatgga atcctgtggc 901 atccatgaaa ctacattcaa ttccatcatg aagtgtgacg ttgacatccg taaagacctc 961 tatgccaaca cagtgctgtc tggtggcacc accatgtacc caggcattgc aagtgtgacg ttgacatccg taaagacctc 961

45、 tatgccaaca cagtgctgtc tggtggcacc accatgtacc caggcattgc aagtgtgacg ttgacatccg taaagacctc 961 tatgccaaca cagtgctgtc tggtggcacc accatgtacc caggcattgc aagtgtgacg ttgacatccg taaagacctc 961 tatgccaaca cagtgctgtc tggtggcacc accatgtacc caggcattgc tgacaggatg 1021 cagaaggaga ttactgccct ggctcctagc accatgaaga

46、tcaagatcat tgctcctcct 1081 tgacaggatg 1021 cagaaggaga ttactgccct ggctcctagc accatgaaga tcaagatcat tgctcctcct 1081 tgacaggatg 1021 cagaaggaga ttactgccct ggctcctagc accatgaaga tcaagatcat tgctcctcct 1081 tgacaggatg 1021 cagaaggaga ttactgccct ggctcctagc accatgaaga tcaagatcat tgctcctcct 1081 gagcgcaagt a

47、ctctgtgtg gattggtggc tctatcctgg cctcactgtc caccttccag 1141 cagatgtgga tcagcaagca gagcgcaagt actctgtgtg gattggtggc tctatcctgg cctcactgtc caccttccag 1141 cagatgtgga tcagcaagca gagcgcaagt actctgtgtg gattggtggc tctatcctgg cctcactgtc caccttccag 1141 cagatgtgga tcagcaagca gagcgcaagt actctgtgtg gattggtggc

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49、ctagg cggactgtta ctgagctgcg ttttacaccc ggagtacgat gagtccggcc cctccatcgt gcaccgcaaa 1201 tgcttctagg cggactgtta ctgagctgcg ttttacaccc tttctttgac aaaacctaac 1261 ttgcgcaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa/tttctttgac aaaacctaac 1261 ttgcgcaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa/tttctttgac aaaacctaac 1261 ttgcgca

50、aaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa/tttctttgac aaaacctaac 1261 ttgcgcaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa/第28页,共81页,编辑于2022年,星期一点击第29页,共81页,编辑于2022年,星期一第30页,共81页,编辑于2022年,星期一第31页,共81页,编辑于2022年,星期一第32页,共81页,编辑于2022年,星期一第33页,共81页,编辑于2022年,星期一第34页,共81页,编辑于2022年,星期一第35页,共81页,编辑于2022年,星期一第36页,共81页,编辑于2022年,星期一

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