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1、一一.实验原理:实验原理:某些某些化学试剂化学试剂能够使生物组织中的有关能够使生物组织中的有关有有机化合物机化合物产生特定的产生特定的颜色反应颜色反应。如:。如:.还原性糖的鉴定:还原性糖的鉴定:还原性糖还原性糖+.脂肪的鉴定:脂肪的鉴定:脂肪脂肪+脂肪脂肪+.蛋白质的鉴定:蛋白质的鉴定:蛋白质蛋白质+淀粉+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色碘碘蓝色蓝色第第18181919页页生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定方法步骤:方法步骤:1 1实验材料、仪器和试剂的选择实验材料、仪器和试
2、剂的选择 2 2设计记录表格,记录预测结果设计记录表格,记录预测结果 3 3检测的方法步骤检测的方法步骤 (1)(1)还原糖的检测和观察还原糖的检测和观察;(2)(2)脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察;(3)(3)蛋白质的检测和观察蛋白质的检测和观察;注意事项注意事项:3.斐林试剂甲液和乙液的正确用法?斐林试剂甲液和乙液的正确用法?甲液和乙液等量混合均匀后再注入组织样液。甲液和乙液等量混合均匀后再注入组织样液。2.斐林试剂要现配现用,不能放置太久?斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,时间太长,Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与
3、反应。反应。1.斐林试剂甲液和乙液分别是?斐林试剂甲液和乙液分别是?甲液:甲液:NaOH浓度为浓度为0.1g/mL乙液:乙液:CuS04浓度为浓度为0.05g/mL选材:选材:l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应 mL组织样液刚配制的斐林试剂mL现象:现象:(用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min葡萄糖、果糖、麦芽糖等。葡萄糖、果糖、麦芽糖等。含糖量较高的含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色
4、的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰),苹果、梨最好,苹果、梨最好。还原糖的检测和观察:还原糖的检测和观察:浅蓝色浅蓝色(Cu(OH)2)棕色棕色(浅蓝色和砖(浅蓝色和砖红色的混合物)红色的混合物)砖红色沉淀砖红色沉淀 (Cu2O)注意事项注意事项:3.双缩脲试剂双缩脲试剂A液加液加1mL,而,而B液只加液只加4滴滴,为什么为什么B液不液不加加1mL或多于或多于1mL?过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B液会与液会与A A液反应,使溶液变蓝色,掩液反应,使溶液变蓝色,掩盖生成的紫色。盖生成的紫色。2.在蛋白质的鉴定试验中,为什么先加在蛋白质的鉴定试验中,为什么先加A液再加液再
5、加B液?液?先加先加A A液是为了创造一个碱性环境,因为蛋白质在碱性条液是为了创造一个碱性环境,因为蛋白质在碱性条件下与件下与Cu2+Cu2+发生反应生成紫色化合物。发生反应生成紫色化合物。1.双缩脲试剂A液和液和B液分别是?液分别是?A液:液:NaOH浓度为浓度为0.1g/mLB液:液:CuS04浓度为浓度为0.01g/mL3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显显色色反反应应mL组织样液双缩脲试剂mL现象:现象:无色无色紫色或紫红色紫色
6、或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果比比较项较项目目试剂试剂及成及成分分溶液溶液浓浓度度方法方法加加热热与否与否结结果果可溶可溶还还原糖的原糖的鉴鉴定定斐林斐林试剂试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖红砖红色沉色沉淀淀蛋白蛋白质质的的鉴鉴定定双双缩脲试缩脲试剂剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶液溶液呈紫呈紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g
7、/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,摇匀。滴,摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片),去皮,将子叶削成薄片 制片:制片:选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹)染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色 吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴
8、蒸馏水,盖上盖玻片,制成滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片临时装片显微观察:显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:现象:有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒(多余的苏丹多余的苏丹)苏丹苏丹 或苏丹或苏丹IV易溶于酒精易溶于酒精脂肪的检测结果脂肪的检测结果4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆取材:马铃薯匀浆检测:检测:mL组织样液碘液碘液2滴滴现象:现象:摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色 各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃胡萝卜胡萝卜黄豆黄豆花生种子花生种子小麦种子小麦种
9、子 其中适合于鉴定其中适合于鉴定可溶性还原糖可溶性还原糖的是的是 ,理由是梨,理由是梨的组织细胞的组织细胞 ,你打,你打算用什么试剂鉴定算用什么试剂鉴定?。小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为为 ,你打算,你打算用什么试剂鉴定用什么试剂鉴定?.例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:根据下表所列各种材料回答问题:梨梨 颜色为白色,并且糖含量较高颜色为白色,并且糖含
10、量较高 斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高,也不容易做切片脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用苏丹用苏丹或苏丹或苏丹试剂试剂小麦种子中糖类化合物小麦种子中糖类化合物 含量很高,却不适合用含量很高,却不适合用来鉴定来鉴定 _,这是因为,这是因为 _。适合于鉴定蛋白质的是适合于鉴定蛋白质的是 ,理由是,理由是 ,鉴定所用的试剂是,鉴定所用的试剂是 。蛋白质含量高蛋白质含量高 黄豆和花生黄豆和花生 双缩脲试剂双缩脲试剂淀粉淀粉 可溶性还原糖可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水淀粉是非还原糖且不溶于水 例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时
11、,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:根据下表所列各种材料回答问题:各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃胡萝卜胡萝卜黄豆黄豆花生种子花生种子小麦种子小麦种子1、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是()A青苹果汁中有淀粉,不含还原糖青苹果汁中有淀粉,不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉 C苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖苹果转熟时,大量淀粉水
12、解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉苹果转熟时单糖聚合成淀粉 C、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是剂是()A.斐林试剂斐林试剂 B.红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 B3生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是验中,以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产
13、生砖红色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A 知识结构第二章组成细胞的分子第二章组成细胞的分子网络构建网络构建蛋白质的结构和功能蛋白质的结构和功能核酸的结构和功能核酸的结构和功能细胞的分子组成细胞的分子组成糖类的种类和作用糖类的种类和作用脂质的种类和作用脂质的种类和作用水和无机盐的作用水和无机盐的作用8590%水水蛋白质蛋白质710%脂质脂质12%无机盐无机盐11.5%糖类和核酸糖类和核酸11.5%C C、
14、H H、O O、N N氨基酸氨基酸脱水缩合脱水缩合多肽多肽盘曲折叠盘曲折叠2020种种种类种类化学键名称化学键名称肽键肽键氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构蛋白质结构的多样性蛋白质结构的多样性蛋白质功能的多样性蛋白质功能的多样性细胞的组成物质细胞的组成物质良好的溶剂良好的溶剂参与生化反应参与生化反应运送营养物质和代谢废物运送营养物质和代谢废物脂肪:脂肪:磷脂:磷脂:固醇固醇单糖单糖二糖二糖多糖多糖结构蛋白结构蛋白催化作用催化作用运输载体作用运输载体作用信息传递作用信息传递作用免疫作用免疫作用胆固醇胆固醇:性激素:性激素:维生素维生素D D:CHO 生物体内
15、的储能物质生物体内的储能物质CHONP CHONP 细胞膜和细胞器膜的组成成分细胞膜和细胞器膜的组成成分细胞膜的重要成分,参与脂质的运输细胞膜的重要成分,参与脂质的运输促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成促进对钙、磷的吸收促进对钙、磷的吸收离子离子某些有机物的组成成分某些有机物的组成成分维持细胞和生物体的生命活动维持细胞和生物体的生命活动维持细胞正常的渗透压和酸碱平衡维持细胞正常的渗透压和酸碱平衡:葡萄糖 核糖脱氧核糖核酸的组成成分细胞内的主要能源物质麦芽糖、蔗糖、乳糖能水解成单糖供能:淀粉:纤维素:糖原构成细胞壁的主要成分植物细胞中的储能物质动物细胞中的储能物质核糖核苷酸核糖核苷酸C C、H H、O O、N N、P P核糖核酸(核糖核酸(RNARNA)磷酸、核糖、碱基(磷酸、核糖、碱基(AGCUAGCU)磷酸、脱氧核糖、碱基(磷酸、脱氧核糖、碱基(AGCTAGCT)脱氧核苷酸脱氧核苷酸单链单链结构结构吡咯红吡咯红 细胞质细胞质染色剂、分布部位染色剂、分布部位mRNAmRNA、tRNAtRNA、rRNArRNA种类种类脱氧核糖核酸(脱氧核糖核酸(DNADNA)结构?分布?载体?结构?分布?载体?染色剂?染色剂?