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1、转录转录后后后后遗传遗传信息的信息的信息的信息的扩扩展展展展第1页，此课件共25页哦第一节 mRNA前体加工的分子基础一、核不均一mRNA（hnRNA）真核基因是单顺反子！平均每个基因8个内含子；占比例高，有的基因内含子达99%。第2页，此课件共25页哦5 -UTR3-UTR第3页，此课件共25页哦RNA剪接的4种方式：类型I自我剪接、类型II自我剪接、hnmRNA的剪接和核tRNA的自我剪接。第4页，此课件共25页哦1.剪接体内含子剪接体内含子主要内含子剪接位点特征主要内含子剪接位点特征 边界序列：5-GU-AG-3 内含子还有分支保守序列。分支位点？酵母：UACUAAC 高等真核：YNCU
2、RAY（A代表分支形成点，N任意碱基、R嘌呤、Y嘧啶）第5页，此课件共25页哦 次要内含子剪接特征：边界序列：5-AU-AC-3上述内含子需要剪接蛋白和snRNA参与剪接2.自我剪接内含子：细菌、真核生物细胞器、低等真核生物细胞核；I型内含子：边界序列5-U-G-3。II型内含子：边界序列5-GU-AG-3III型内含子：第6页，此课件共25页哦二、催化活性的小核RNA（snRNA）是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spliceosome）的主要成分，参与mRNA前体的加工过程。其长度在哺乳动物中约为100-215个核苷酸，主要有6种，常与核蛋白结合，形成snRNP（小核核糖体蛋白颗粒）
3、第7页，此课件共25页哦三、剪接蛋白三、剪接蛋白酵母中有30多种剪接蛋白1.SR蛋白蛋白含Ser和Arg二肽重复序列，在hnRNA剪接中起重要作用。广泛存在于动物、部分植物；分子量10-50 KD.2.与多聚嘧啶串结合的蛋白与多聚嘧啶串结合的蛋白现发现的有4种，2种U2辅助因子，多嘧啶串结合蛋白，串联剪接因子。第8页，此课件共25页哦3.snRNP联结蛋白：小核核糖核蛋白颗粒（small nuclear ribonucleoprotein particles）4.其他蛋白RNA解旋酶类剪接因子KH结合域剪接因子第9页，此课件共25页哦四、剪接体四、剪接体 Spliceosome，进行RNA剪接
4、时形成的多组分复合物，其大小为50-60S，主要是由hn RNA、snRNA和蛋白质组成。snRNA 主要有U1U2U3U4U5等 剪接体的组装是非常复杂的过程。第10页，此课件共25页哦第11页，此课件共25页哦第二节 内含子的剪接snRNP蛋白结合到pro-mRNA前体剪接位点，促进U2 snRNP结合到分支序列，SR蛋白发挥跨内含子识别功能。真核基因内含子长度差异很大，剪接装置需要在巨大的内含子RNA中识别小小的外显子。第12页，此课件共25页哦一、剪接体参与的内含子共有序列的识别和剪接复合体的组装 U1snRNP首先识别内含子的5端剪接位点，U2 snRNP识别分支位点，确定要被删除的
5、内含子。随后，U5 snRNP取代U1snRNP，U6 snRNP取代U2 snRNP。形成活性60s剪接体。发生转脂反应，切去RNA前体的内含子，连接相邻外显子。第13页，此课件共25页哦剪接过程第14页，此课件共25页哦第15页，此课件共25页哦第16页，此课件共25页哦二、自我剪接机制1.I型内含子剪接机制 I型内含子具有自我剪接的功能。在剪接反应中，要有鸟嘌呤核苷的辅助。有9个由碱基配对形成的特定二级结构。2.II型内含子 主要存在于线粒体中的一类自我剪接内含子，遵从GT-AG规律。6个结构域可形成发夹环。不需要鸟苷的辅助。第17页，此课件共25页哦I型内含子第18页，此课件共25页哦
6、I型内含子第19页，此课件共25页哦第3节 变位剪接和反式剪接常规剪接形式：常规剪接形式：剪接体参与的主要剪接方式内含子自我剪接非常规剪接形式：非常规剪接形式：变位剪接（选择性剪接）反式剪接第20页，此课件共25页哦u变位剪接（选择性剪接）变位剪接（选择性剪接）：是指从一个hn mRNA通过不同的剪接方式产生不同的成熟mRNA，产生不同的蛋白质表型。人类基因组约有35000个基因，其中有约40%一60%的基因存在变位剪接过程。u反式剪接：指的是两条不同的mRNA的外显子连接到一起。与正常的顺式剪接不同，“经典”反式剪接见于锥虫和线虫，近期在人类身上也发现了反式剪接。第21页，此课件共25页哦一
7、、变位剪接（选择性剪接）一、变位剪接（选择性剪接）1.基本形式：改变常规剪接位点，相同的hnmRNA产生多个成熟mRNA。存在多个潜在剪接位点。外显子剪接位点选择性剪接内含子剪接位点选择性剪接外显子的选择保留或切除多个外显子的可变拼接内含子的可变保留第22页，此课件共25页哦2.剪接的发生方式剪接的发生方式 组织特异性可变剪接诱导变位剪接3.变位剪接的调控变位剪接的调控多种顺式作用元件：如，ESE（外显子剪接增强子）,ESS（外显子剪接沉默子），ISE（内含子剪接增强子），ISS。多种反式作用因子：SR蛋白等。二、二、反式剪接反式剪接第23页，此课件共25页哦第四节 RNA编辑一、RNA编辑的概念：是指mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。最早在原生动物椎虫线粒体中发现。第24页，此课件共25页哦二、RNA编辑的方式插入或缺失编辑替换编辑，一般为C变U，偶有U变C。三、RNA编辑位点特征不同生物不同基因间的RNA编辑位点和数量存在差异，直接影响编辑的效果。同一基因编辑位点可能存在物种差异。第25页，此课件共25页哦