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1、血型及交叉配血血型及交叉配血 ABOABO血型系统血型系统ABOABO血型鉴定血型鉴定RhRh血型系统血型系统交交叉配血叉配血 第1页/共55页血型的定义血型的定义 血型是人类血液以血型抗原为血型是人类血液以血型抗原为表现形式的遗传性状，血型由血表现形式的遗传性状，血型由血型基因决定，是血细胞的特征之型基因决定，是血细胞的特征之一。一。第2页/共55页一一 ABOABO血型系统血型系统ABOABO血型系统抗原血型系统抗原ABOABO血型系统抗体血型系统抗体ABOABO血型系统亚型血型系统亚型第3页/共55页Karl Landsteiner(18681934)第4页/共55页H H物质物质：A
2、A、B B抗原的前身物质，其抗原性很抗原的前身物质，其抗原性很 弱，血清中一般没有抗弱，血清中一般没有抗H H抗体。抗体。A A抗原抗原：在在A A酶的作用下，把一个酶的作用下，把一个N-N-乙酰半乙酰半 乳糖胺连接到乳糖胺连接到H H物质的物质的D-D-半乳糖结半乳糖结 构上。构上。B B抗原抗原：在在B B酶的作用下，把一个酶的作用下，把一个D-D-半乳糖分半乳糖分 子连接到子连接到H H物质的物质的D-D-半乳糖结构上。半乳糖结构上。ABO血型系统抗原第5页/共55页H H抗原酶A+N-乙酰半乳糖胺A抗原lH H抗原酶B+D半乳糖B抗原基因H 基因A基因 H 基因B酶A=N-乙酰半乳糖胺
3、基转移酶，酶B=半乳糖基转移酶第6页/共55页第7页/共55页ABO血型及其抗原、抗体血型及其抗原、抗体第8页/共55页ABOABO血型抗原的组成与遗传血型抗原的组成与遗传一种糖蛋白一种糖蛋白母父双方各遗传给子代一个基因母父双方各遗传给子代一个基因基因型：基因型：AAAA、AOAO、BBBB、BOBO、ABAB、OOOO表型：表型：A A、B B、ABAB、OO第9页/共55页妊娠56周胎儿RBC可测出ABO抗原新生儿ABO血型抗原性约为成人的20%20岁左右ABO血型的抗原性最强人ABO血型的抗原终身不变ABO血型抗原的分布：RBC、WBC、Plt 其他组织细胞 体液及分泌液第10页/共55
4、页第11页/共55页ABOABO血型的遗传血型的遗传（部分、示例）（部分、示例）父父 母母 子子 女女表型表型 基因型基因型 表型表型 基因型基因型 AA AAAA A AAAA AAAA A AA AAAO A AA AAAO A AA或或AOAO AOAO A AA AOAO A AA或或AOAO O OO O OOBB BBBB B BBBB BBBB B BB BBBO B BB BBBO B BB或或BOBO BOBO B BB BOBO B BB或或BOBO O OO O OO第12页/共55页ABO血型系统抗体血型系统抗体天然抗体天然抗体；由自然界中具有与由自然界中具有与A A、
5、B B血血型型 抗原结构相同的物质刺抗原结构相同的物质刺激机激机 体免疫系统产生的免疫体免疫系统产生的免疫球蛋球蛋 白，以白，以IgMIgM为主。为主。免疫性抗体免疫性抗体：主要是由母婴血型不合主要是由母婴血型不合的的 妊娠及血型不合的输血妊娠及血型不合的输血产产 生，以生，以IgGIgG为主。为主。第13页/共55页IgG、IgM 抗体结构示意图抗体结构示意图第14页/共55页ABOABO血型抗体的特性血型抗体的特性特性特性 IgMIgM型型 IgGIgG型型分子量分子量（kDkD）1000 1601000 160耐热性耐热性（7070）破坏破坏 稳定稳定结合最适温度结合最适温度（）4 42
6、5 3725 37反应介质反应介质 生理盐水生理盐水 酶处理酶处理 或清蛋白溶液或清蛋白溶液被血型物质中和被血型物质中和 能能 不能不能通过胎盘通过胎盘 不能不能 能能第15页/共55页 ABOABO血型系统的亚型血型系统的亚型A A 抗原的主要亚型为抗原的主要亚型为A A1 1、A A2 2抗原抗原 形成形成ABOABO血型亚型：血型亚型：A A1 1亚型亚型 A A2 2亚型亚型 A A1 1B B亚型亚型 A A2 2B B亚型亚型 B B亚型较少见，抗原性弱，临床意义不大亚型较少见，抗原性弱，临床意义不大临床中应注意避免把弱临床中应注意避免把弱A A1 1亚型误定为亚型误定为OO型型误
7、定可导致严重的输血反应！误定可导致严重的输血反应！第16页/共55页第17页/共55页 二二 ABOABO血型鉴血型鉴定定 ABO血型鉴定的原理、方法ABO血型鉴定的质量保证ABO血型鉴定的原临床意义 第18页/共55页ABOABO血型鉴定的原理血型鉴定的原理 血型抗原与相应抗体在反应介质血型抗原与相应抗体在反应介质中中形成红细胞和相应血型抗体结合的免形成红细胞和相应血型抗体结合的免疫疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。复合物，出现肉眼可见的凝集现象。用已知的特异性标准血清检查红用已知的特异性标准血清检查红细细胞的未知血型抗原称为正定型。胞的未知血型抗原称为正定型。用已知的标准血清检查标本中的用
8、已知的标准血清检查标本中的未未知血型抗体称为反定型。知血型抗体称为反定型。第19页/共55页ABOABO血型鉴定的方法简介血型鉴定的方法简介盐水凝集法盐水凝集法：包括破片法及试管法：包括破片法及试管法 以盐水为反应介质以盐水为反应介质 评评 价：价：操作简便，无需特殊的仪操作简便，无需特殊的仪 器，但反应时间长灵敏度差。器，但反应时间长灵敏度差。凝胶微柱法凝胶微柱法：以凝胶微柱为反应介质：以凝胶微柱为反应介质 评评 价：特异性和灵敏度高，结果准价：特异性和灵敏度高，结果准 确，但试剂成本高。确，但试剂成本高。第20页/共55页第21页/共55页ABOABO血型正向鉴定及结果判断血型正向鉴定及结
9、果判断标准血清标准血清 及反应结果及反应结果 结果判断结果判断抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB AB +-+-+A A型型 -+-+B B型型 +AB AB型型 -O O型型第22页/共55页ABOABO血型反向鉴定及结果判断血型反向鉴定及结果判断标准红细胞及反应结果标准红细胞及反应结果 结果判断结果判断 A A型型 B B型型 OO型型 -+-A A型型 +-B B型型 -AB AB型型 +-+-O O型型第23页/共55页ABOABO血型鉴定的质量保证血型鉴定的质量保证 标准血清方面：标准血清方面：被检红细胞方面：被检红细胞方面：实验器材方面：实验器材方面：综合分析试验结果方面：综合分析试
10、验结果方面：第24页/共55页ABOABO血型鉴定的临床意义血型鉴定的临床意义 输血方面：输血方面：器官移植方面：器官移植方面：新生儿溶血病诊断方面：新生儿溶血病诊断方面：其他方面：其他方面：第25页/共55页三三 RhRh血型系统血型系统Rh血型系统的命名 Rh血型系统抗原及抗体 Rh血型鉴定Rh血型鉴定的质量保证Rh血型鉴定的临床意义第26页/共55页Rh血型系统 Levine第27页/共55页Alexander Wiener第28页/共55页RHESUS MONKEYS第29页/共55页RhRh血型系统的命名血型系统的命名 1、Fisher-Race命名法(CDE命名法)1号染色体断臂上
11、、三个连锁的基 因位点依次排列为CDE。各基因位点由一对等位基因组成.CDE连锁基因以复合体形式遗传。8种基因组合和36种遗传型。第30页/共55页第31页/共55页2、ISBT命名法 以以RosenfildRosenfild的基因数字表达为的基因数字表达为 基础，规范红细胞基础，规范红细胞RhRh血型系统命名，血型系统命名，其系统符号和相应代号分别为其系统符号和相应代号分别为RH004RH004，D001D001，C002C002，E003E003，c004c004，e005e005；如如D D血型抗原表达命名为血型抗原表达命名为Rh1Rh1或或 004001.004001.第32页/共55
12、页3 3、RhRh系统表型及基因型系统表型及基因型表型（表型（epitypeepitype）基因型基因型(genetype)(genetype)5 5种种RhRh抗原：抗原：D D、E E、C C、c c、e e5 5种种RhRh抗血清：抗抗血清：抗D D、抗、抗C C、抗、抗E E、抗抗 c c、抗抗e e根据根据D D抗原区分为抗原区分为RhRh阴性和阴性和RhRh阳阳性性中国人中国人RhRh阳性：阳性：99.699.6 RhRh阳性：阳性：0.4%0.4%第33页/共55页 RhRh血型系统抗原及抗体血型系统抗原及抗体 抗原性从强到弱依次为：抗原性从强到弱依次为：D D、E E、C C、
13、c c、e e，天然天然RhRh抗体极少抗体极少多数多数RhRh抗体源于输血或妊娠刺激抗体源于输血或妊娠刺激抗抗 D D最为重要最为重要第34页/共55页RhRh血型鉴定的原理血型鉴定的原理酶介质法：酶介质法：凝聚胺试验：凝聚胺试验：抗球蛋白试验：抗球蛋白试验：人源盐水介质抗人源盐水介质抗D D试验：试验：低离子强度溶液试验低离子强度溶液试验 ：第35页/共55页在盐水介质中、在盐水介质中、IgG抗体抗体不凝集不凝集RBC第36页/共55页在盐水介质中在盐水介质中IgM抗体凝集抗体凝集RBC示意图示意图第37页/共55页在凝聚胺、酶处理下在凝聚胺、酶处理下IgG抗体可凝集抗体可凝集RBC第38
14、页/共55页抗球蛋白抗球蛋白抗球蛋白试验抗球蛋白试验第39页/共55页LISS(低离子强度溶液低离子强度溶液)的原理的原理抗原非离子静电作用力抗体静电作用力离子抗原抗体当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强第40页/共55页抗球蛋白试验抗球蛋白试验 R.R.A.Coombs第41页/共55页方法评价方法评价酶介质法酶介质法（直接法）：（直接法）：酶介质法酶介质法（间接法）：（间接法）：低离子强度溶液试验：低离子强度溶液试验：抗人球蛋白试验：抗人球蛋白试验：凝聚胺试验：凝聚胺试验：人源盐水介质抗人源盐水介质抗D D试验：试验：第42页/共
15、55页RhRh血型鉴定的质量保证血型鉴定的质量保证检验前：检验前：标本处理，试剂与器材要标本处理，试剂与器材要求求检验中：检验中：严格操作规程，设置对照严格操作规程，设置对照组组检验后：检验后：认真核对，标本妥善保存认真核对，标本妥善保存第43页/共55页RhRh血型鉴定的临床意义血型鉴定的临床意义 Rh Rh血型系统及交叉配血血型系统及交叉配血 新生儿溶血病的诊断新生儿溶血病的诊断第44页/共55页HDN HDN 的发病示意图的发病示意图第45页/共55页四四 交叉配血交叉配血 交叉配血试验定义交叉配血试验定义 交叉配血试验是在血型鉴定交叉配血试验是在血型鉴定的基础上，进一步检测受血者和的基
16、础上，进一步检测受血者和供血者血液中是否存在不相配合供血者血液中是否存在不相配合的成分。交叉配血实验分两管进的成分。交叉配血实验分两管进行，主侧为受血者血清与供血者行，主侧为受血者血清与供血者红细胞；次侧为受血者红细胞与红细胞；次侧为受血者红细胞与供血者血清供血者血清第46页/共55页第47页/共55页第48页/共55页 交叉配血试验的原交叉配血试验的原理理 交叉配血试验中红细胞血型抗原交叉配血试验中红细胞血型抗原与与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试试验、酶介质试验验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝、抗球蛋白试验、凝聚聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱胺试验、
17、低离子强度溶液试验及微柱凝凝胶试验进行观察。胶试验进行观察。第49页/共55页几种交叉配血试验的方法学评价几种交叉配血试验的方法学评价配血方法 优点 缺点盐水配血试验 简单、快速 检不出不相配IgG型抗体酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差抗球蛋白试验 准确、可靠 复杂、费时、试剂贵凝聚胺试验 快速、准确 需特殊试剂及器材微柱凝胶试验 灵敏 成本高第50页/共55页交叉配血的质量保交叉配血的质量保证证检测前：检测前：标本、试剂及实验器材的要求标本、试剂及实验器材的要求检测中：检测中：工作态度严谨，高度责任感工作态度严谨，高度责任感检测后：检测后：标本存放标本存放7 7天以上天以上第51页/共55页交叉配血的临床意义交叉配血的临床意义 保证输血安全保证输血安全 发现亚型和不规则抗体发现亚型和不规则抗体 第52页/共55页参考文献参考文献南京医科大学.血液一般检验.人民卫生出版社,2002熊立凡.临床检验基础.第3版.人民卫生出版社，2002朱立华.实验诊断学.北京医科大学出版社，2002第53页/共55页再见！第54页/共55页感谢您的观看！第55页/共55页