《细胞与酶固定化课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细胞与酶固定化课件.ppt（79页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、细胞与酶固定化第1页，此课件共79页哦一、酶与细胞固定化的一、酶与细胞固定化的概念概念二、天然酶在应用中的一些缺陷二、天然酶在应用中的一些缺陷三、固定化酶三、固定化酶特点特点四、固定化酶的四、固定化酶的发展发展史史第一节第一节 概述概述第2页，此课件共79页哦一、酶与细胞固定化的概念一、酶与细胞固定化的概念 借借助助各各种种物物理理或或化化学学方方法法，将将酶酶或或细细胞胞固固定定于于水水不不溶溶性性载载体上的过程，称为酶与细胞固定化。体上的过程，称为酶与细胞固定化。水溶性酶水溶性酶水不溶性载体水不溶性载体水不溶性酶（固定化酶）水不溶性酶（固定化酶）固定化技术固定化技术第3页，此课件共79页哦
2、二、天然酶在应用中的一些缺陷二、天然酶在应用中的一些缺陷1、酶酶稳稳定性差，易定性差，易变变性失活性失活2、酶酶和底物只能反和底物只能反应应一次，一次，难难于回收利用，不于回收利用，不仅仅成成 本高，而且本高，而且难难于于连续连续化生化生产产。3、反、反应应液中混入液中混入酶酶蛋白，使蛋白，使产产品的分离品的分离纯纯化复化复杂杂化。化。研究固定化研究固定化酶酶，可使，可使酶酶在在应应用上的用上的这这些不足得到改善。些不足得到改善。第4页，此课件共79页哦1、不溶于水、不溶于水:反反应应完完成成后后，经经过过滤滤或或离离心心等等简简单单分分离离，就就可可以以回回收收，以以重重复复使使用用，降低降
3、低酶酶制制剂剂成本。成本。2、具有一定的机械、具有一定的机械强强度度:可可将将其其装装成成酶酶柱柱，当当底底物物溶溶液液缓缓缓缓流流经经酶酶柱柱时时，就就能能发发生生酶酶促促反反应应，流流出液中，即含有出液中，即含有酶酶促反促反应产应产物，其物，其产产物不易物不易带杂质带杂质，收率高，易精制。，收率高，易精制。3、稳稳定性提高定性提高:一根一根酶酶柱往往可以柱往往可以连续连续使用数十次，而使用数十次，而酶酶活力并无明活力并无明显显下降。下降。三、固定化酶特点：三、固定化酶特点：第5页，此课件共79页哦四四 固定化酶的发展史固定化酶的发展史固定化酶固定化酶(Immobilized Enzyme）
4、是）是20世纪世纪60年代发展起来的年代发展起来的项新技术。它是通过物理的或化学的手段，将酶束缚于水不溶的项新技术。它是通过物理的或化学的手段，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶柬缚在一定的空间内，限制酶分子的自由流动，载体上，或将酶柬缚在一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶充分发挥催化作用；过去曾称其为但能使酶充分发挥催化作用；过去曾称其为水不溶酶或固相酶水不溶酶或固相酶。1971年第一届国际酶工程会上正式建议采用年第一届国际酶工程会上正式建议采用固定化酶固定化酶的的名称名称。第6页，此课件共79页哦1953年年，德国人德国人Grubhofev和和Schleith首先开始了首先开始了酶
5、酶固定化研究，固定化研究，并第一次并第一次实现实现了了酶酶的固定化。的固定化。1960年年，日本的千畑一郎开始了，日本的千畑一郎开始了氨基氨基酰酰化化酶酶固定化研究固定化研究，开，开始了将固定始了将固定酶酶应应用在工用在工业业上的第一步。上的第一步。1969年年，千畑一郎成功地将氨基，千畑一郎成功地将氨基酰酰化化酶酶反反应应用用 于于DL-AA的光学的光学分析分析，实现实现了了酶酶连续连续反反应应的工的工业业化。化。这这是世界上是世界上固定化固定化酶酶用于工用于工业业的开端的开端。1973年年，千畑一郎再次在工，千畑一郎再次在工业业上成功地固定化上成功地固定化大大肠肠杆菌杆菌细细胞胞，成功成功
6、实现实现了了L-天冬氨酸天冬氨酸连续连续生生产产。第7页，此课件共79页哦一、基本一、基本概念概念二、酶和菌体固定化方法二、酶和菌体固定化方法 酶酶和和菌菌体体固固定定化化方方法法很很多多，主主要要有有吸吸附附法法、包包埋埋法法、结结合合法法、交交联联法等。法等。1.吸附法吸附法 2.包埋法包埋法 3.结合法结合法 4.交联法交联法 5.热处理法热处理法三、固定化酶的三、固定化酶的性质性质四、固定化酶的四、固定化酶的评价评价五、固定化酶的应用五、固定化酶的应用第二节第二节 酶固定化酶固定化第8页，此课件共79页哦一、基本概念一、基本概念1.固定化酶：固定化酶：固固定定在在载载体体上上，并并在在
7、一一定定空空间间范范围围内内进进行行催催化化反反应应的的酶酶称称为为固固定化酶。（分离提纯的酶）定化酶。（分离提纯的酶）2.固定化菌体：固定化菌体：固固定定于于载载体体上上的的菌菌体体或或菌菌体体碎碎片片，称称为为固固定定化化菌菌体体，它它是是固固定定化化酶酶的的一一种种形形式式。（菌菌体体即即死死细细胞胞或或细细胞胞碎碎片片上上的酶或酶系）的酶或酶系）第9页，此课件共79页哦物理吸附法物理吸附法 通通过过载载体体表表面面和和酶酶分分子子表表面面之之间间的的氢氢键键、疏疏水水键键和和-电电子子亲亲和和力力等等物物理理作作用用力力，将将酶酶固固定定于于不不溶溶性性载载体体（固固体体吸吸附附剂剂）
8、的的方方法法，称称为为物物理理吸吸附法，简称吸附法。附法，简称吸附法。1、吸附法、吸附法（1）原理原理第10页，此课件共79页哦常用吸附剂：常用吸附剂：a.无机吸附剂：无机吸附剂：高高岭岭土土、皂皂土土、硅硅胶胶、氧氧化化铝铝、磷磷酸酸钙钙胶胶、微微孔孔玻玻璃璃、羟羟基基磷磷灰灰石石，活性炭等。无机吸附剂的吸附容量一般很低，多在活性炭等。无机吸附剂的吸附容量一般很低，多在1mg蛋白蛋白/g吸附剂。吸附剂。b.有机吸附剂：有机吸附剂：纤纤维维素素、胶胶原原、火火棉棉胶胶等等。有有机机吸吸附附剂剂的的吸吸附附容容量量一一般般较较高高，如如火火棉棉胶膜吸附木瓜蛋白酶、碱性磷酸酯酶等，吸附容量为胶膜吸
9、附木瓜蛋白酶、碱性磷酸酯酶等，吸附容量为70mg蛋白蛋白/cm2膜膜。第11页，此课件共79页哦 是指在适宜的是指在适宜的pH和离子强度条件下，利用酶的侧链解离基团和离子交换基和离子强度条件下，利用酶的侧链解离基团和离子交换基间的相互作用而达到酶固定化的方法（离子键）。间的相互作用而达到酶固定化的方法（离子键）。最常用的交换剂有最常用的交换剂有CM-纤维素、纤维素、DEAE-纤维素、纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等；其葡聚糖凝胶等；其他离子交换剂还有各种合成的树脂如他离子交换剂还有各种合成的树脂如Amberlite XE-97、Dowe X-50等。等。离子交换剂的吸附容量一般大于物理吸附剂离子
10、交换剂的吸附容量一般大于物理吸附剂。离子交换吸附法离子交换吸附法DEAEDEAE纤维素吸附的纤维素吸附的淀粉酶、蔗糖酶已作为商品固定化酶淀粉酶、蔗糖酶已作为商品固定化酶第12页，此课件共79页哦（2）制备方法：制备方法：a.静态法静态法：在在没没有有搅搅拌拌、振振摇摇的的情情况况下下，将将载载体体直直接接加加入入酶酶溶溶液液，通通过过自自然然吸吸附附、解解吸吸、再再吸附等过程、制备固定化酶。吸附等过程、制备固定化酶。该法操作简便，但效率低，耗时，吸附量小且不均匀。该法操作简便，但效率低，耗时，吸附量小且不均匀。b.电沉积法电沉积法：在在酶酶溶溶液液中中放放置置两两个个电电极极，在在电电极极邻邻
11、近近加加入入载载体体，接接通通电电源源，酶酶移移向向电电极极并并沉沉积积到载体表面，以制备固定化酶。到载体表面，以制备固定化酶。该法可提高吸附时局部浓度，增加吸附量，但要注意酶在电场中的稳定性。该法可提高吸附时局部浓度，增加吸附量，但要注意酶在电场中的稳定性。第13页，此课件共79页哦c.混和振摇装载法：混和振摇装载法：是是实实验验室室常常用用方方法法，载载体体与与酶酶液液混混和和后后，要要在在搅搅拌拌下下或或摇摇床床连连续振摇下完成固定化。续振摇下完成固定化。该该法法固固定定化化较较为为均均匀匀，要要注注意意搅搅拌拌或或振振摇摇速速率率，既既不不破破坏坏酶酶和载体结构，又要达到充分混和目的。
12、和载体结构，又要达到充分混和目的。d.反应器装载法：反应器装载法：这这是是工工业业上上常常用用方方法法，它它将将固固定定化化和和其其后后的的应应用用连连在在一一起起，即即先先将将载载体体装装于于反反应应器器中中，再再加加上上酶酶液液，然然后后通通过过循循环环流流振振动动方方式式使使酶酶和和载载体体达达到到充分混和。充分混和。第14页，此课件共79页哦pH：影响载体和酶的电荷变化，从而影响酶吸附。：影响载体和酶的电荷变化，从而影响酶吸附。离子强度：多方面的影响，一般认为盐阻止吸附。离子强度：多方面的影响，一般认为盐阻止吸附。蛋白质浓度：若吸附剂的量固定，随蛋白质浓度增加，吸附量也增加，直蛋白质浓
13、度：若吸附剂的量固定，随蛋白质浓度增加，吸附量也增加，直至饱和。至饱和。温度：蛋白质往往是随温度上升而减少吸附。温度：蛋白质往往是随温度上升而减少吸附。吸附速度：蛋白质在固体载体上的吸附速度要比小分子慢得多。吸附速度：蛋白质在固体载体上的吸附速度要比小分子慢得多。载体：对于非多孔性载体，则颗粒越小吸附力越强。多孔性载体，要考虑吸附对象载体：对于非多孔性载体，则颗粒越小吸附力越强。多孔性载体，要考虑吸附对象的大小和总吸附面积的大小。的大小和总吸附面积的大小。（3）影响酶蛋白在载体上吸附程度的因素）影响酶蛋白在载体上吸附程度的因素:第15页，此课件共79页哦（4）吸附法的优点、缺点）吸附法的优点、
14、缺点 吸附法的优点：吸附法的优点：操作简单，可供选择的载体类型多，吸附过程可同时达到纯化和固操作简单，可供选择的载体类型多，吸附过程可同时达到纯化和固化的目的，所得到的固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。化的目的，所得到的固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。吸附法的缺点吸附法的缺点：酶和载体的结合力不强，易脱落，会导致催化活力的丧失和：酶和载体的结合力不强，易脱落，会导致催化活力的丧失和沾污反应产物。沾污反应产物。世界第一例获得工业应用的固定化酶是世界第一例获得工业应用的固定化酶是 DEAE-Sephadex A-25吸附的吸附的氨基酰化氨基酰化酶酶反应用于反应用于 DL-AA的光学分析。
15、的光学分析。第16页，此课件共79页哦(1)基基本本概概念念：将将酶酶或或含含酶酶菌菌体体包包埋埋于于各各种种多多孔孔载载体体中中，使使酶酶固固定定化化的的方法，称为包埋法。方法，称为包埋法。(2)包埋常用载体：包埋常用载体：琼脂、聚丙烯酰胺、海藻酸钠、琼脂糖、角叉菜胶等。琼脂、聚丙烯酰胺、海藻酸钠、琼脂糖、角叉菜胶等。(3)包埋法的类型：包埋法的类型：主要有胶格包埋、微囊型包埋、脂质体包埋。主要有胶格包埋、微囊型包埋、脂质体包埋。2、包埋法、包埋法第17页，此课件共79页哦a.胶格包埋或称凝胶包埋：胶格包埋或称凝胶包埋：常用凝胶：常用凝胶：天然胶：琼脂、海藻酸钙胶、角叉菜胶、明胶天然胶：琼脂
16、、海藻酸钙胶、角叉菜胶、明胶合成胶：聚丙烯酰胺、光交联树脂合成胶：聚丙烯酰胺、光交联树脂第18页，此课件共79页哦 制备方法：制备方法：以天然胶为载体：琼脂凝胶、海藻酸钙凝胶、角叉菜胶、明胶以天然胶为载体：琼脂凝胶、海藻酸钙凝胶、角叉菜胶、明胶等等 先先将将这这些些天天然然物物，溶溶于于含含水水介介质质，然然后后再再与与酶酶液液混混和和，最最后后分分别别通通过过各各种种方方法法，使之胶化，制成胶包埋的固定化酶。使之胶化，制成胶包埋的固定化酶。优点：包埋条件温和、操作简便、酶活影响小优点：包埋条件温和、操作简便、酶活影响小 缺点：强度差缺点：强度差如：如：胶原可以添加丁醇；胶原可以添加丁醇；角角
17、叉叉菜菜胶胶（卡卡拉拉胶胶）：卡拉胶(KCarrageenin)是由角叉菜(又名鹿角菜:Cawageen)中提取的一种多糖。具体方法：将100g酶在3750溶于水中，又将1.7g卡拉胶在4060溶于34ml生理盐水中，二者混合后冷全10，所成凝胶浸在0.3mol/L KCl 溶液中硬化，作成适当大小的颗粒，即为固定化酶。海藻酸可添加氯化钙，使之以胶的形式沉淀下来。海藻酸可添加氯化钙，使之以胶的形式沉淀下来。第19页，此课件共79页哦以合成胶为载体（如聚丙烯酰胺凝胶）：以合成胶为载体（如聚丙烯酰胺凝胶）：先将酶和丙烯酰胺单体分散于水介质中，然后加入聚合促先将酶和丙烯酰胺单体分散于水介质中，然后加
18、入聚合促进剂和进剂和N.NN.N-甲叉双丙烯酰胺聚合，酶即包埋于形成的凝胶中。甲叉双丙烯酰胺聚合，酶即包埋于形成的凝胶中。特点：合成胶强度高，对温度、特点：合成胶强度高，对温度、pHpH变化耐受性强，但要控变化耐受性强，但要控制好包埋条件。制好包埋条件。第20页，此课件共79页哦b.微囊型包埋又称半透膜包埋法：微囊型包埋又称半透膜包埋法：将将酶酶包包埋埋于于由由各各种种高高分分子子聚聚合合物物（直直径径几几十十微微米米几几百百微微米米，厚厚约约25mm的半透膜）制成的小球内，制成固定化酶。的半透膜）制成的小球内，制成固定化酶。半半透透膜膜孔孔径径Km固定化酶降低了酶的亲和固定化酶降低了酶的亲和
19、力。力。（2）载体与底物电荷相反，静电作用，载体与底物电荷相反，静电作用，KmKm第65页，此课件共79页哦四、固定化四、固定化酶酶的的评评价价 评价固定化酶的指标评价固定化酶的指标评价指标评价指标活力测定方法活力测定方法第66页，此课件共79页哦1、评价固定化酶的指标、评价固定化酶的指标 酶活定义（酶活定义（IU)：在特定条件下，每一分钟催化一个微摩尔底物转化为产物的酶量定：在特定条件下，每一分钟催化一个微摩尔底物转化为产物的酶量定义为义为1个酶活单位。个酶活单位。酶比活定义（游离）：每毫克酶蛋白或酶酶比活定义（游离）：每毫克酶蛋白或酶RNA（DNA）所具有的酶活力单位）所具有的酶活力单位固
20、定化酶的比活：每（克）干固定化酶所具有的酶活力单位。固定化酶的比活：每（克）干固定化酶所具有的酶活力单位。或：单位面积（或：单位面积（cm2）的酶活力单位表示（酶膜、酶管、酶板）。）的酶活力单位表示（酶膜、酶管、酶板）。操作半衰期：衡量稳定性的指标。操作半衰期：衡量稳定性的指标。连续测活条件下固定化酶活力下降为最初活力一半所需要的时间（连续测活条件下固定化酶活力下降为最初活力一半所需要的时间（t1/2）第67页，此课件共79页哦或称偶联效率，活力保留百分数。或称偶联效率，活力保留百分数。相对酶活力：具有相同酶蛋白（或相对酶活力：具有相同酶蛋白（或RNA）量的固定化酶活力与游离酶）量的固定化酶活
21、力与游离酶活力的比值称为相对酶活力活力的比值称为相对酶活力第68页，此课件共79页哦2、固定化酶的活力测定方法、固定化酶的活力测定方法 振荡测定法：称取一定量的固定化酶振荡测定法：称取一定量的固定化酶 加入一定量的底物溶液加入一定量的底物溶液 一边振荡或搅一边振荡或搅拌，一边进行催化反应拌，一边进行催化反应 取出一定量的反应液进行酶活力测定。取出一定量的反应液进行酶活力测定。酶柱测定法：将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应柱中酶柱测定法：将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应柱中 让底物溶液以一定让底物溶液以一定的流速流过酶柱的流速流过酶柱 收集流出的反应液收集流出的反应液 测定其中产物
22、的生成量或底物的消耗量测定其中产物的生成量或底物的消耗量第69页，此课件共79页哦1、固定化酶在工业生产中的应用、固定化酶在工业生产中的应用 现已用于工业化生产的固定化酶主要有。现已用于工业化生产的固定化酶主要有。（1）氨基酰化酶氨基酰化酶 这是世界上第一种工业化生产的固定化酶，这是世界上第一种工业化生产的固定化酶，1969年，日本田边制年，日本田边制药公司将从米曲霉中提取分离得到的氨基酰化酶，用药公司将从米曲霉中提取分离得到的氨基酰化酶，用DEAE-葡葡聚糖凝胶为载体通过离子键结合法制成固定化酶，用来拆分聚糖凝胶为载体通过离子键结合法制成固定化酶，用来拆分DL-乙酰氨基酸，连续生产乙酰氨基酸
23、，连续生产L-氨基酸；生产成本仅为用游离酶生产氨基酸；生产成本仅为用游离酶生产成本的成本的60左右。左右。五、固定化酶的应用五、固定化酶的应用第70页，此课件共79页哦（2）葡萄糖异构葡萄糖异构酶酶 这这是世界上生是世界上生产规产规模最大的一种固定化模最大的一种固定化酶酶。将培养好的含。将培养好的含葡萄糖异构葡萄糖异构酶酶的放的放线线菌菌细细胞用胞用6065热处热处理理15min，该该酶酶就就固定在菌体上，制成固定化固定在菌体上，制成固定化酶酶，用于，用于连续连续生生产产果葡糖果葡糖浆浆。此固。此固定化定化酶酶在国内外均在国内外均进进行行过过广泛的研究和广泛的研究和应应用，用，1973年就已用
24、于工年就已用于工业业化生化生产产。固定化葡萄糖异构固定化葡萄糖异构酶酶的制的制备备，除用上述，除用上述热处热处理法外，也可用吸附法、理法外，也可用吸附法、结结合法、凝胶包埋法、交合法、凝胶包埋法、交联联法或双重固定化法等法或双重固定化法等进进行固定化。行固定化。第71页，此课件共79页哦（3）天）天门门冬氨酸冬氨酸酶酶 1973年日本用聚丙年日本用聚丙烯酰烯酰胺凝胶胺凝胶为载为载体，将具有高活力天体，将具有高活力天门门冬冬氨酸氨酸酶酶的大的大肠肠杆菌菌体包埋制成固定化天杆菌菌体包埋制成固定化天门门冬氨酸冬氨酸酶酶，用于工，用于工业业化生化生产产，将延胡索酸，将延胡索酸转转化生化生产产天天门门冬
25、氨酸。冬氨酸。1978年以后，改用角叉菜胶年以后，改用角叉菜胶为载为载体制体制备备固定化固定化酶酶，也可将天，也可将天门门冬冬氨酸氨酸酶酶从大从大肠肠杆菌杆菌细细胞中提取分离出来，再用离子胞中提取分离出来，再用离子键结键结合法制成固定合法制成固定化化酶酶，用于工，用于工业业化生化生产产。第72页，此课件共79页哦（4）青霉素青霉素酰酰化化酶酶 这这是在医是在医药药工工业业上广泛上广泛应应用的一种固定化用的一种固定化酶酶。可用多种方法。可用多种方法固定化。固定化。1973年已用于工年已用于工业业化生化生产产，用于制造各种半合成青霉，用于制造各种半合成青霉素和素和头孢头孢霉素。用同一种固定化青霉素
26、霉素。用同一种固定化青霉素酰酰化化酶酶，只要改，只要改变变pH等条件，就既可以催化青霉素或等条件，就既可以催化青霉素或头孢头孢霉素水解生成霉素水解生成6-氨基青霉氨基青霉烷烷酸酸(6-APA)或或7-氨基氨基头孢头孢霉霉烷烷酸酸(7-ACA)，也可以催化，也可以催化6-APA或或7-ACA与其他的与其他的羧羧酸衍生物酸衍生物进进行反行反应应，以合成新的具有不同，以合成新的具有不同侧键侧键基基团团的青霉素或的青霉素或头孢头孢霉素。霉素。第73页，此课件共79页哦第74页，此课件共79页哦2、固定化、固定化酶酶在在传传感器方面的感器方面的应应用用酶酶传传感器感器 酶酶传传感器是由固定化感器是由固定
27、化酶酶与能量与能量转换转换器器(电电极、极、场场效效应应管、离管、离子子选择场选择场效效应应管等管等)密切密切结结合而成的合而成的传传感装置，是生物感装置，是生物传传感器的一感器的一种。已广泛种。已广泛应应用于用于临临床床诊诊断、工断、工业发业发酵酵过过程控制和程控制和环环境境监测监测等等领领域。域。其中研究最多、其中研究最多、应应用最广的是用最广的是酶酶电电极极。第75页，此课件共79页哦酶电极酶电极 酶电极是由固定化酶与各种电极密切结合的传感装置。酶电极是由固定化酶与各种电极密切结合的传感装置。葡萄糖氧化酶电极葡萄糖氧化酶电极 1962年年Clark和和Lyons提提出出模模型型，1967
28、年年Updike和和Hicks首首先先制制造出葡萄糖氧化酶电极并把它用于葡萄糖的定量分析。造出葡萄糖氧化酶电极并把它用于葡萄糖的定量分析。第76页，此课件共79页哦 用聚丙用聚丙烯酰烯酰胺凝胶包埋法将葡萄胺凝胶包埋法将葡萄糖氧化糖氧化酶酶固定化，制成厚度固定化，制成厚度为为2050m的的酶酶膜，再与氧膜，再与氧电电极和使氧容易通极和使氧容易通过过的聚四氟乙的聚四氟乙烯烯等高分子薄膜密切等高分子薄膜密切结结合，合，组组成成葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶酶电电极。极。使用使用时时，把，把酶酶电电极浸入极浸入样样品溶液中，品溶液中，样样品液中的葡萄糖品液中的葡萄糖扩扩散到散到酶酶膜中，膜中，酶酶催化催化葡萄
29、糖与氧反葡萄糖与氧反应应，生成葡萄糖酸，使氧被，生成葡萄糖酸，使氧被消耗，再由氧消耗，再由氧电电极极测测定氧定氧浓浓度的度的变变化，即化，即可知道可知道样样品中葡萄糖的品中葡萄糖的浓浓度。度。第77页，此课件共79页哦青霉素酶电极青霉素酶电极 以以固固定定化化青青霉霉素素酶酶的的酶酶膜膜与与pH电电极极结结合合而而成成。将将青青霉霉素素酶酶固固定定在在聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺凝凝胶胶或或光光交交联联树树脂脂膜膜内内，然然后后紧紧贴贴在在玻玻璃璃(pH)电电极极上即成。上即成。当当酶酶电电极极浸浸入入含含青青霉霉素素的的溶溶液液中中时时，青青霉霉素素酶酶催催化化青青霉霉素素水水解解生生成成青青霉霉烷
30、烷酸酸，引引起起溶溶液液中中氢氢离离子子浓浓度度增增加加，通通过过pH电电极极测出测出pH值变化，即可测出样品溶液中青霉素的含量。值变化，即可测出样品溶液中青霉素的含量。第78页，此课件共79页哦3、固定化、固定化酶酶在医在医疗疗治治疗疗上的上的应应用用（1）作）作为为治治疗药疗药物物 固定化固定化酶酶由于其高由于其高稳稳定性，低免疫性，使其在作定性，低免疫性，使其在作为为治治疗药疗药物物时时，较较之溶液之溶液酶酶，表，表现现出极大的出极大的优势优势。作作为为治治疗药疗药物，溶液物，溶液酶酶具有一些具有一些“致命致命”弱点：弱点：酶酶作作为为异体物异体物质质，反复，反复应应用会用会导导致免疫反致免疫反应应 酶酶是蛋白是蛋白质质，在体内易被网状内皮系，在体内易被网状内皮系统统移除和被蛋白移除和被蛋白酶酶水解破坏。水解破坏。由于稀由于稀释释效效应应，药药物物酶酶无法集中于靶器官无法集中于靶器官组织组织以达到治以达到治疗疗所需的最适高所需的最适高浓浓度。度。第79页，此课件共79页哦