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1、关于红细胞计数和关于红细胞计数和血红蛋白测定血红蛋白测定第一页,讲稿共三十二页哦2红细胞检查红细胞检查第二页,讲稿共三十二页哦3红细胞概述红细胞概述第三页,讲稿共三十二页哦472小时小时48小时小时第四页,讲稿共三十二页哦血血红红蛋蛋白白(血血色色素素,Hb 或或 HGB)是是一一种种微微红红色色的胶体物质,分子量为的胶体物质,分子量为 64 458。是是一一种种呼呼吸吸载载体体,每每克克血血红红蛋蛋白白可可携携带带氧氧1.34 毫毫升升成成人人红红细细胞胞总总量量约约有有 600 g 血血红红蛋蛋白白,可可携氧携氧 800 毫升。毫升。血红蛋白概述血红蛋白概述第五页,讲稿共三十二页哦61.1
2、.血红蛋白组成血红蛋白组成FEPFe+血红素血红素HPHb第六页,讲稿共三十二页哦72.2.血红蛋白分子结构及成分血红蛋白分子结构及成分组成组成 Hb 的多肽链两大类:的多肽链两大类:类链:类链:和和链;链;非非链:链:链。链。链由链由 141 个氨基酸组成,个氨基酸组成,链由链由 146 个氨基酸组成。个氨基酸组成。第七页,讲稿共三十二页哦8每个每个 Hb 分子由分子由 2 条条类肽链和类肽链和 2 条条类肽链组成,类肽链组成,每条珠蛋白肽链含有每条珠蛋白肽链含有 1 个亚铁血红素。个亚铁血红素。第八页,讲稿共三十二页哦 在人体不同生长时期,在人体不同生长时期,Hb Hb 种类与比例不同:种
3、类与比例不同:第九页,讲稿共三十二页哦10 检测方法检测方法1.手工显微镜法手工显微镜法:2.血液分析仪法血液分析仪法:任务一任务一 红细胞计数红细胞计数第十页,讲稿共三十二页哦11 手工显微镜法定义:测定每升血液中所含红细胞数目,用?.?X1012/L表示。第十一页,讲稿共三十二页哦12改良牛鲍计数板改良牛鲍计数板计数板计数板第十二页,讲稿共三十二页哦13第十三页,讲稿共三十二页哦14第十四页,讲稿共三十二页哦15【操作操作】1.1.准备计数板准备计数板2.2.加稀释液:加稀释液:2ml2ml3.3.加血:加血:1010l l混匀混匀4.4.充池充池5.5.计数计数6.6.计算:红细胞数计算
4、:红细胞数=N/5*25*10*200*10=N/5*25*10*200*106 6/L/L第十五页,讲稿共三十二页哦16 1 1手工法手工法误差来源:标本、操作、器材、固有误差 2 2仪器法仪器法 严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控 质量控制质量控制第十六页,讲稿共三十二页哦171.1.手工显微镜法手工显微镜法 血液分析仪的校正 白细胞减少时的对照核实。血小板计数受小红细胞干扰时的校正 2 2血液分析仪法血液分析仪法 方法精确,且操作简便、快速,已广泛应用。方法学评价方法学评价第十七页,讲稿共三十二页哦18成年:男性(45.5)1012/L 女性(3.55.0)1012/L新生儿:(6
5、.07.0)1012/L参考值参考值第十八页,讲稿共三十二页哦191生理性变化生理性变化(1)年龄与性别的年龄与性别的 差异差异(2)精神因素精神因素(3)剧烈体力运动和剧烈体力运动和劳动劳动(4)气压降低气压降低(5)妊娠中、后期妊娠中、后期 临床意义临床意义第十九页,讲稿共三十二页哦20 2病理性变化病理性变化 (2)红细胞增多红细胞增多 1)原发性红细胞增多 2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白红细胞和血红蛋白量减少量减少1)红细胞生成障碍2)造血原料缺乏3)利用障碍红细胞4)破坏过多和失血临床意义临床意义第二十页,讲稿共三十二页哦21 医学决定水平医学决定水平
6、高于6.8l012/L,应采取相应的治疗措施。低于3.51012/L为诊断贫血的界限,应继续寻找原因。低于1.5l012L应考虑输血 指该项目结果如高于或指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采低于某一个值时就应该采取一定的措施,为患者处取一定的措施,为患者处理起提供依据的作用。理起提供依据的作用。临床意义临床意义第二十一页,讲稿共三十二页哦22 定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/l表示任务二任务二 血红蛋白测定血红蛋白测定第二十二页,讲稿共三十二页哦231 1氰化高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白(HiCN)(HiCN)测定法测定法 2 2其他测定法其他测定法 十二烷基
7、硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法(CTAB)等 检测原理检测原理第二十三页,讲稿共三十二页哦24HiCNHiCN转化液:即文齐氏液转化液:即文齐氏液540 nm 540 nm 处有一吸收波峰,用分光光度计测定处有一吸收波峰,用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。CN-血红蛋白血红蛋白高铁血高铁血红蛋白红蛋白氰化高铁氰化高铁血红蛋白血红蛋白高铁氰化高铁氰化钾钾540nm血红蛋血红蛋白浓度白浓度吸光度吸光度
8、第二十四页,讲稿共三十二页哦25第二十五页,讲稿共三十二页哦26血红蛋白浓度计算公式:血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/L)=A540HiCN64458/44000251 =A367.7第二十六页,讲稿共三十二页哦27方法学评价方法学评价第二十七页,讲稿共三十二页哦28 方法方法 优点优点 缺点缺点 HiCN操作简便、快速操作简便、快速(5min),结果稳,结果稳定可靠,定可靠,试剂容易保存,便于质试剂容易保存,便于质控,为控,为参考方法参考方法KCN有剧毒有剧毒高白细胞和高球蛋白可致浑浊。高白细胞和高球蛋白可致浑浊。HbCO转化慢转化慢 SDS-Hb 不用剧毒试剂、无公害,操作简不用剧毒试剂、
9、无公害,操作简便,呈色稳定,准确度和精度高便,呈色稳定,准确度和精度高 SDS-Hb消光系数未确定消光系数未确定SDS质量差异性大。质量差异性大。SDS溶血活力大,不适于同时进溶血活力大,不适于同时进行自动化分析行自动化分析 AHD575 同同HiCN法,不用剧毒试剂法,不用剧毒试剂 不便于自动检测、氯化血红素纯度不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准达不到标准 HiN3 准确度和精密度高,试剂毒性低准确度和精密度高,试剂毒性低HbCO转化慢转化慢 CTAB溶血活力强,但不破坏白细胞,溶血活力强,但不破坏白细胞,适合自动化分析适合自动化分析精密度和准确性低精密度和准确性低第二十八页,讲稿共三
10、十二页哦29 质量控制质量控制第二十九页,讲稿共三十二页哦30 成年:成年:男性:120160gL;女性:llO150gL。新生儿:新生儿:170200gL。老年老年(70(70岁以上岁以上):男性:94122gL;女性87112gL。参考值参考值第三十页,讲稿共三十二页哦31u 轻度贫血,成年男性轻度贫血,成年男性HbHb120g/L120g/L,成年女性成年女性100g/L100g/L;u中度贫血中度贫血90g/L90g/L;u重度贫血重度贫血60g/L60g/L;u极度贫血极度贫血30g/L30g/L。临床意义临床意义第三十一页,讲稿共三十二页哦感感谢谢大大家家观观看看第三十二页,讲稿共三十二页哦