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1、其次章其次章/第一节红细胞检查第一节红细胞检查正常状况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，正常状况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。血液中红细胞数量可血液中红细胞数量可 通过红细胞计数获得通过红细胞计数获得 红细胞计数红细胞计数（red blood cell count,RBC）n测定单位体积血液中红细胞的数量测定单位体积血液中红细胞的数量n诊断贫血及红细胞增多的指标之一诊断贫血及红细胞增多的指标之一n红细胞计数的方法红细胞计数的方法 n显微镜计数法显微镜计数法 n血液分析仪法血液分析仪法n显微镜计数法（重点）显微镜计数
2、法（重点）n用等渗液稀释血液后，滴入用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数确定范血细胞计数板，计数确定范围内的红细胞，经换算得每围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。升血液中的红细胞数。检测原理检测原理 RBCRBC未解除未解除白细胞数量影响白细胞数量影响n10ul末梢血或末梢血或EDTA抗凝静脉血抗凝静脉血n加入加入2ml等渗液中，混匀等渗液中，混匀n混悬液充入改良牛鲍计数板混悬液充入改良牛鲍计数板n高倍镜下计数中心大方格的四角及中心五个高倍镜下计数中心大方格的四角及中心五个中方格内的红细胞总数中方格内的红细胞总数A。n换算？换算？操作操作RBC/L=（A/5)2510106200
3、 =(A/100)1012Neubauer计数盘血液分析仪法血液分析仪法n接受电阻抗法或激光检测法接受电阻抗法或激光检测法方法学评价方法学评价方法方法 优点优点 缺点缺点 适用范围适用范围 显微镜显微镜计数法计数法 传统方法，设传统方法，设备简单，廉价备简单，廉价 费时费力，费时费力，精密度低精密度低 参考方法；分析参考方法；分析仪异常结果复核仪异常结果复核 血液分血液分析仪法析仪法操作便捷，操作便捷，易于标准化，易于标准化，精密度高精密度高 价贵；环境价贵；环境要求较高要求较高 健康人群普查；健康人群普查；大批量标本筛检大批量标本筛检 质量保证（显微镜法）质量保证（显微镜法）n技术误差技术误
4、差n仪器误差仪器误差n分布误差分布误差n显微镜法红细胞计数误差来源有三个显微镜法红细胞计数误差来源有三个稀释倍数不当稀释倍数不当2血液凝固血液凝固4采血部位不当采血部位不当3 1充液不当充液不当3 3技术误差技术误差 参考值参考值n成年男性成年男性：（：（4.095.74）1012/Ln成年女性：（成年女性：（3.685.13）1012/Ln新生儿：（新生儿：（5.26.4）1012/Ln婴儿：婴儿：（4.04.3）1012/Ln儿童：儿童：（4.04.5）1012/LRBC存在年龄存在年龄与性别的差异与性别的差异临床意义临床意义RBC参考值上限，参考值上限，RBC增多增多RBC参考值下限，即
5、贫血参考值下限，即贫血生理性生理性变更变更病理性病理性变更变更生理性增多生理性增多 生理性缺氧引起6个月-2岁婴儿n相对性增多：见于呕吐、高热等引起短相对性增多：见于呕吐、高热等引起短暂性血液浓缩。通过补液，血容量复原正暂性血液浓缩。通过补液，血容量复原正常，红细胞增多即消逝。常，红细胞增多即消逝。n确定性增多：确定性增多：n继发性增多，由继发性增多，由EPOEPO代偿性或非代偿性代偿性或非代偿性增高引起。增高引起。n原发性增多，红细胞系统异样增殖性疾原发性增多，红细胞系统异样增殖性疾病。病。病理性增多病理性增多 病理性削减（贫血）病理性削减（贫血）3 13 23 3生成削减生成削减 破坏过多
6、破坏过多 血管丢失血管丢失 贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。容低于参考值下限。病因学分类病因学分类红细胞生成削减红细胞生成削减 n骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。性贫血。n造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。n细胞内在缺陷（遗传性缺陷）细胞内在缺陷（遗传性缺陷）n 膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异样致红细胞寿膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异样致红细胞寿命缩短。命缩短。n细胞外在异样（获得性因素）细胞外在异样（获得性
7、因素）n 免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。等。n 非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。寄生虫及脾亢等。红细胞破坏过多红细胞破坏过多血液丢失：血液丢失：急、慢性失血性贫血急、慢性失血性贫血外伤引发的出血外伤引发的出血血红蛋白（血红蛋白（hemoglobin，Hb）n在有核红及网织红内合成在有核红及网织红内合成n是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白nHb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）确定了红细胞的双凹圆盘形态中心部少）确定了
8、红细胞的双凹圆盘形态n合成速度受促红细胞生成素（合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激）与雄激素调整素调整 Hb（四聚体）（四聚体）珠蛋白珠蛋白血红素血红素2条条链链2条非条非链链原原卟啉卟啉铁原子铁原子血红蛋白组成血红蛋白组成 血液中血红蛋白的存在形式血液中血红蛋白的存在形式 存在形式存在形式 所占比例所占比例还原血红蛋白（还原血红蛋白（Fe2+）正常成人正常成人99%99%氧合血红蛋白氧合血红蛋白碳氧血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白（高铁血红蛋白（Fe3+）1%1%Hb测定即测定血液中测定即测定血液中各种血红蛋白各种血红蛋白的总浓度。的总浓度。n血液的物理特性：比
9、重法，折射仪法血液的物理特性：比重法，折射仪法nHb的分子组成：全血铁法的分子组成：全血铁法nHb与与O2可逆性结合：血气分析法可逆性结合：血气分析法nHb衍生物光谱特点：衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等等检测原理检测原理 HiCN法检测原理法检测原理n红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白除外）氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与试剂中的），后者与试剂中的 CN-结合生成棕红结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在）。在540nm处测定处测定HiCN的吸光度，干脆换
10、算的吸光度，干脆换算Hb浓度或在标准曲线上查得浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。浓度。n20ul血液加入血液加入5ml转化液中，充分溶转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本血转化后，以转化液调零，测定标本（HiCN）在）在540nm的吸光度的吸光度A。n计算计算操作操作n干脆计算（符合干脆计算（符合WHO标准的分光光度计）标准的分光光度计）n Hb A6445844000251A367.7n以以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度参考液绘制标准曲线，利用吸光度n A在标准曲线上查出在标准曲线上查出Hb浓度浓度方法学评价方法学评价n缺点：缺点：试剂有毒、试剂有毒、高高WBC造成试剂造
11、成试剂混浊混浊、HbCO 转化慢、不能测转化慢、不能测SHb。HiCN测定法测定法（参考方法）（参考方法）n优点：操作简洁优点：操作简洁，反应速度快，产物，反应速度快，产物稳定，便于质控。稳定，便于质控。方法学评价方法学评价n优点：操作简洁优点：操作简洁，试剂无毒，结果精确，试剂无毒，结果精确，重复性好重复性好。n缺点：缺点：SDS质量差异大；消光系数未定，质量差异大；消光系数未定，不能干脆计算不能干脆计算Hb浓度；不能测定浓度；不能测定SHb；SDS破坏白细胞。破坏白细胞。SDS-Hb测定法测定法（HiCN替代方法）替代方法）方法学评价方法学评价n优点：试剂简易无毒、呈色稳定、精优点：试剂简
12、易无毒、呈色稳定、精确性与精密性较高。确性与精密性较高。n缺点：缺点：575nm波长比色，波长比色，血液分析仪血液分析仪上应用受限，不能转化上应用受限，不能转化HbF。AHD575测定法测定法 方法学评价方法学评价n优点：精确度、精密度较高。优点：精确度、精密度较高。n缺点：缺点：试剂有毒、试剂有毒、HbCO HbCO 转化慢。转化慢。HiN3测定法测定法方法学评价方法学评价n优点：优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于溶血强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。血液分析仪。n缺点：精密度、精确度低。缺点：精密度、精确度低。CATB测定法测定法 质量保证（比色法）质量保证（比色法）n标本：引起血清浊度
13、增加的因素致标本：引起血清浊度增加的因素致HbHb假性增高。假性增高。n器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。血管和刻度吸管，保证试剂质量。n技术操作：限制技术误差。技术操作：限制技术误差。n废弃物：妥当处理废液。废弃物：妥当处理废液。参考值参考值n成年男性：成年男性：131172 g/Ln成年女性：成年女性：113 151 g/Ln新生儿：新生儿：180190 g/Ln婴儿：婴儿：110120 g/Ln儿童：儿童：120140 g/Ln老年（老年（70岁）：男性岁）：男性 94122 g/L 女性女性 87112 g
14、/L Hb存在年龄存在年龄与性别的差异与性别的差异临床意义（同红细胞计数）临床意义（同红细胞计数）n推断贫血程度优于红细胞计数推断贫血程度优于红细胞计数n临床应用留意事项临床应用留意事项 nHb和和RBC不确定正确反应全身红细胞总容量不确定正确反应全身红细胞总容量的变更。的变更。n某些贫血，某些贫血，Hb和和RBC削减程度可不一样，削减程度可不一样，同时测定同时测定Hb和和RBC，对诊断更有意义。，对诊断更有意义。贫血程度的判定贫血程度的判定分度分度 Hb含量含量 症状症状 轻度：轻度：91g/L正常值下限正常值下限 症状稍微症状稍微中度：中度：61g/L90g/L 活动后心悸、气促活动后心悸、气促重度：重度：31g/L60g/L 休息时也有心悸、休息时也有心悸、气促气促极重度：极重度：30g/L 常合并贫血性心脏常合并贫血性心脏病病小结小结HbHb测定方法学评价测定方法学评价RBCRBC显微镜计数法原理显微镜计数法原理RBCRBC计数的临床意义计数的临床意义HiCNHiCN测定法测定法原理原理